《微生物与免疫学实验》课程教学大纲

微生物与免疫学实验MicrobiologyandImmunologyExperiment教学大纲学分数2适用专业生物科学、生物技术使用教材（按作者、教材名称、出版社、出版年月顺序填写）沈萍，陈向东主编，微生物学实验（第4版），高等教育出版社，2008.2教学参考资料（按作者、参考资料名称、出版者、出版年月顺序填写；填写的教学参考资料应不少于三种）1.朱道银，吴玉章主编，免疫学实验，科学出版社，2010.12.中华人民共和国国家标准，GB/T4789.10—2016“食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验”3.中华人民共和国国家标准，GB/T5750.12—2006“生活饮用水标准检验方法微生物指标”一、概述1、课程定位与性质微生物学及免疫学实验是生物科学与生物技术专业学科设置中重要的基础课程之一。本课程系统讲授了微生物学及免疫学相关实验知识及基本理论，同时进行大量的实际操作与试验设计。2、课程教学目标通过微生物学及免疫学实验课程的学习，使学生系统掌握微生物及免疫学实验的基本知识理论，熟练掌握微生物显微技术、无菌技术、微生物分离纯化与鉴别、微生物检测、免疫学检测等基础实验技能；同时培养学生发现问题、分析问题和解决问题的能力，加强学生综合实验技能；通过大量综合性、设计性实验的开设，努力培养学生的创新技能，为后续课程学习以及实践研究工作打下坚实的基础。3、课程大纲适用专业、年级、开课时间本课程大纲适用于生物科学、生物技术专业，二年级，开课时间：全年二、教学内容与学时分配1、各实验课时分配表。序号实验名称实验类型学时1油浸系物镜的使用与细菌形态观察验证性实验22细菌简单染色验证性实验23细菌革兰氏染色验证性实验34微生物大小测定与计数验证性实验35土壤中微生物的分离与观察（一）培养基配制与消毒灭菌综合性实验46土壤中微生物的分离与观察（二）分离培养与观察综合性实验67饮用水微生物卫生指标的测定综合性实验68凝集反应与沉淀反应验证性实验49酶联免疫吸附检测牛奶中抗生素素残留综合性实验210产淀粉酶芽孢杆菌的分离(一)方案设计设计性实验411产淀粉酶芽孢杆菌的分离(二)方案实施设计性实验612枯草芽孢杆菌的鉴定(一)形态鉴定与生化反应鉴定综合性实验413枯草芽孢杆菌的鉴定(二)分子生物学鉴定综合性实验614大肠杆菌营养缺陷型的筛选综合性实验615食品中金黄色葡萄球菌的检测综合性实验6实验一实验编号：07210080－1实验名称：油浸系物镜的使用与细菌形态观察实验学时：2实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、学习掌握普通光学显微镜中油浸系物镜的使用方法。2、观察了解细菌的基本形态。实验内容：1、普通光学显微镜油浸系物镜的使用。2、细菌基本形态的观察。主要仪器：显微镜实验二实验编号：07210080－2实验名称：细菌简单染色实验学时：2实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、学习了解微生物染色的基本原理与方法2、学习掌握细菌的简单染色技术实验内容：1、制片2、简单染色3、显微镜观察主要仪器：显微镜实验三实验编号：07210080－3实验名称：细菌革兰氏染色实验学时：3实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、学习了解细菌细胞壁结构与革兰氏染色的关系2、学习掌握细菌革兰氏染色的原理与方法实验内容：1、制片2、革兰氏染色：初染——媒染——脱色——复染3、显微镜观察主要仪器：显微镜实验四实验编号：07210080－4实验名称：微生物大小测定与计数实验学时：3实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、学习掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法2、学习掌握血细胞计数板进行细菌计数的方法实验内容：1、微生物大小测定2、微生物计数主要仪器：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血细胞计数板实验五实验编号：07210080－5实验名称：土壤中微生物的分离与观察（一）培养基配制与消毒灭菌实验学时：4实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习掌握培养基的配制方法2、学习掌握微生物消毒灭菌的常用方法实验内容：1、培养基配制与材料准备2、消毒灭菌主要仪器：高压蒸汽灭菌器、电热干燥箱实验六实验编号：07210080－6实验名称：土壤中微生物的分离与观察（二）分离培养与观察实验学时：6实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习掌握细菌、放线菌、霉菌的分离培养技术方法。2、观察掌握细菌、放线菌、霉菌的菌落与个体形态特征。实验内容：1、土壤微生物的分离：土壤悬液的制备——稀释分离——恒温培养2、不同微生物菌落形态的观察3、不同微生物个体形态的观察主要仪器：生化培养箱、显微镜实验七实验编号：07210080－7实验名称：饮用水微生物卫生指标的测定实验学时：6实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、了解检测水中细菌总数和大肠菌群数的意义2、学习掌握水中细菌总数和大肠菌群的检测方法实验内容：1、细菌总数的测定2、大肠菌群的检测3、水质微生物指标的评价主要仪器：显微镜、培养箱、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、电磁炉实验八实验编号：07210080－8实验名称：凝集反应与沉淀反应实验学时：4实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、学习掌握凝集反应的原理与技术2、学习掌握琼脂扩散的方法及原理实验内容：1、凝集反应：免疫血清的制备——凝集效价的测定2、琼脂扩散实验：琼脂凝胶的制备——加样反应——结果观察主要仪器：培养箱、电冰箱、显微镜、微量移液枪实验九实验编号：07210080－9实验名称：酶联免疫吸附检测牛奶中抗生素素残留实验学时：2实验类别：必做实验性质：验证性实验实验目的：1、掌握酶联免疫吸附试验的原理及基本方法2、掌握酶标仪酶联免疫吸附试验的具体操作步骤3、了解酶联免疫吸附试验的应用实验内容：1、实验试剂的准备（按照酶联免疫吸附试剂盒的说明书进行）2、加样：分别设置空白孔、标准孔和待测样品孔；3、酶标板覆膜，37℃孵育90min；4、洗板3次5、加酶结合物，酶标板覆膜，37℃孵育60min；6、洗板5次7、加底物溶液，酶标板覆膜，37℃避光孵育15min；8、终止反应9、酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（OD值）10、制作标准曲线，计算出待测牛奶样品中抗生素的含量。主要仪器：微孔板酶标仪、离心机、恒温培养箱、微量移液器、振荡器等实验十实验编号：07210080－10实验名称：产淀粉酶芽孢杆菌的分离（一）方案设计实验学时：4实验类别：必做实验性质：设计性实验实验目的：1、学习掌握微生物目的菌株的分离技术2、锻炼学生综合运用微生物实验知识的能力实验内容：1、试验方案的指导设计2、试验方案的审核评估主要仪器：实验十一实验编号：07210080－11实验名称：产淀粉酶芽孢杆菌的分离（二）方案实施实验学时：6实验类别：必做实验性质：设计性实验实验目的：1、学习掌握微生物目的菌株的分离技术2、锻炼学生综合运用微生物实验知识的能力实验内容：1、试验方案的指导实施2、实验结果的验收与评价主要仪器：培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、电子天平、超净工作台、电磁炉实验十二实验编号：07210080－12实验名称：枯草芽孢杆菌的鉴定(一)形态鉴定与生化反应鉴定实验学时：4实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习掌握枯草芽孢杆菌鉴定中形态学鉴定的方法2、学习掌握枯草芽孢杆菌鉴定中生化反应的实验方法及原理3、学习了解生化反应在细菌分类鉴定中的意义实验内容：1、菌种纯化培养2、形态学鉴定：革兰氏染色、芽孢染色观察3、生化反应鉴定：接触酶；氧化酶；VP试验；甲基红试验；葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇利用试验；柠檬酸盐利用试验；硝酸盐还原；淀粉水解；明胶液化；酪素分解等试验主要仪器：培养箱、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、电磁炉实验十三实验编号：07210080－13实验名称：枯草芽孢杆菌的鉴定(二)分子生物学鉴定实验学时：6实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习掌握枯草芽孢杆菌鉴定中分子生物学鉴定的方法2、学习了解分子生物学在细菌分类鉴定中的意义实验内容：1、菌种纯化培养2、细菌模板DNA的提取3、PCR扩增4、琼脂糖凝胶电泳检测5、结果判定主要仪器：PCR仪、高速离心机（12000r/min以上）、恒温培养箱、超净工作台实验十四实验编号：07210080－14实验名称：大肠杆菌营养缺陷型的筛选实验学时：6实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习了解诱变育种的基本方法2、学习掌握营养缺陷型的筛选方法3、学习掌握微生物培养基的配制方法及各种灭菌操作技术实验内容：1、培养基的配制及灭菌2、菌悬液制备及诱变处理3、营养缺陷型的浓缩4、营养缺陷型的筛选5、营养缺陷型的鉴定主要仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、培养箱、高速离心机、超净工作台、磁力搅拌器、紫外灯、电子天平、电磁炉实验十五实验编号：07210080－15实验名称：金黄色葡萄球菌的检测实验学时：6实验类别：必做实验性质：综合性实验实验目的：1、学习了解金黄色葡萄球菌生物学特性2、学习掌握金黄色葡萄球菌的分离方法与原理实验内容：1、增菌培养2、平板分离3、革兰氏染色镜检4、血浆凝固酶实验主要仪器：显微镜、培养箱、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电热干燥箱、电磁炉三、教学方法本课程采用多种教学方法进行教学。理论知识以多媒体课堂讲授为主，注重学生学习的自觉性；实践技能教学以学生自己设计、操作为主，教师进行全过程指导。四、考核要求本课程采用教学过程评价、多元化能力评价与实验理论知识考核相结合的考核评价模式。依据课堂教学内容要求，针对学生学习过程中掌握基本实验理论知识情况、动手操作能力、实验报告的书写情况以及出勤情况等多个方面，对学生的教学过程给予综合评定。从基础实验技能、综合实验技能、创新技能等方面对学生进行多元化能力评价。以微生物显微技术、无菌技术、微生物分离纯化技术等微生