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文档简介
淋球菌检查华中科技大学附属协和医院皮肤科林能兴【适应证】淋病【禁忌证】无【并发症】无
【用物准备】无菌生理盐水、细小棉拭子、扩阴器、载玻片,培养皿,氧化酶试剂等附:革兰氏染色法革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:(口诀11半半)1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。2)草酸铵结晶紫染1分钟。3)自来水冲洗,去掉浮色。
4)用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。5)用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。6)用蕃红染液复染30秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。2.淋球菌培养1)取材(1)男性患者从尿道取材,用细小棉拭子伸入尿道2~4cm,轻轻转动并停留10~20s后取出。(2)女性患者在妇检床上取材,先用扩阴器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一拭子插入宫颈口内1~2cm,转动并停留10~20s后取出。
2)标本取出后立即接种于培养基中,目前常用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基
3)初次分离培养应使用5%~10%CO2浊缸,培养温度36℃为宜,24~48小时后观察3)菌落在接触氧化酶试剂15~20S出现红色,保持30s以上,然后逐渐变成紫色,最后是黑色,为氧化酶试验阳性,证实为淋球菌【注意事项】1)涂片时不要用力涂擦,厚薄要合适。2)培养取材时拭子伸入尿道或宫颈的深度要足够,并停留一段时间。3)取材后应立即接种。4)对症状不典型的男性患者取材,最好是晨起排尿前或排尿4h后。5)女性宫颈分泌物、咽和直肠标本在涂片中由于杂菌较多,故推荐用培养法6)分离培养应采用加抗生素的选择性培养基7)氧化酶试剂应为新鲜配制(现用现配),在棕色瓶中避光保存8)氧化酶遇铁也会变成红色,接种环应为非铁丝所制考试模拟题:女性淋病取材培养项目项目分内容及评分标准满分得分操作流程70于妇检床上取材,充分暴露外阴10
用灭菌生理盐水清洗外阴15
用扩阴器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一拭子插入宫颈口内1~2cm,转动并停留10~20s后取出。20
标本取出后立即接种于培养基中,放入36℃培养箱培养。15
24~48小时后观察。10
注意事项301.涂片时不要用力涂擦,厚薄要合适。10
2.培养取材时拭子伸入宫颈
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