大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻课件

大豆抗原蛋白与仔猪过敏性腹泻谯仕彦教授中国农业大学上海源耀生物股份有限公司2014年4月16日中国·上海

内容提要仔猪腹泻与产生原因1.日粮致敏性腹泻与大豆抗原蛋白2.大豆抗原蛋白的消除3.大豆抗原蛋白的分析检测4.仔猪腹泻发生的原因传染性病因

1.1病毒性腹泻传染性胃肠炎、轮状病毒感染1.2细菌性腹泻仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪副伤寒、仔猪红痢3.应激因素3.1温度骤变

皮下脂肪薄，被毛稀少：保温能力差；糖原水平低，产热能力不足，因此仔猪对冷相当敏感1234周龄6756842免疫力主动免疫被动免疫（母乳）断奶3.2断奶应激胃酸分泌不足，消化酶活性不高母乳→饲料饲料（营养）因素4.1营养消化不良

日粮抗原蛋白过敏——导致仔猪腹泻的一个重要因素

饲料（营养）因素4.2日粮抗原过敏

大豆中含多种抗营养因子

蛋白酶抑制因子

脲酶

凝集素

植酸

寡糖（

热敏性

）（热稳定性）大豆抗营养因子

抗原蛋白

抗维生素因子

其他

单宁Glycinin由6个酸性多肽和6个碱性多肽组成的大分子蛋白（360

kDa）

酸性多肽碱性多肽Glycinin晶体结构占大豆总球蛋白的40%（李德发，2003）孙鹏等，2008仔猪对glycinin的过敏反应Glycinin对仔猪小肠内肥大细胞数量及组胺含量的影响Glycinin水平0%2%4%8%SEMP-值十二指肠空肠回肠10.5321.0920.1517.172.600.0510.9320.1017.7617.082.010.0410.2519.9714.5410.891.930.01日粮中添加2%或4%

的glycinin可显著增加仔猪空肠、回肠内组胺的释放量。孙鹏等，2008大豆抗原蛋白与仔猪断奶腹泻饲喂含与不含大豆抗原蛋白的仔猪腹泻情况（Miller，1994）大豆抗原蛋白与仔猪生长性能

大豆抗原蛋白使仔猪在断奶后第一周生长速度明显下降(P<0.05)Li等（1990，1991）Glycinin对仔猪（24-28日龄）生长性能影响Glycinin水平P-值0%2%4%8%SEMGlycininLinearQuad0-6天ADG,g/d282.75263.72237.39222.3912.830.020.0020.88ADFI,g/d326.61325.17318.89304.0815.690.730.300.67F:G,g/g1.161.231.341.410.060.040.0040.970-10天ADG,g/d372.41338.82320.38291.2916.130.020.0020.89ADFI,g/d423.10412.02396.20381.4823.650.630.200.94F:G,g/g1.141.221.241.310.040.0030.0040.90孙鹏等（2008）纯样品大豆抗原蛋白通过诱发幼龄动物的过敏反应，影响机体消化系统和免疫功能，导致腹泻，最后抑制动物生长减少豆粕用量是减轻断奶仔猪过敏反应的有效措施正确的饲喂制度免疫耐受的产生需要一定时间（断奶后7-10d）教槽料应持续用到断奶后10天在使用前，对大豆抗原蛋白进行消除是提升大豆及其制品质量，避免仔猪腹泻的关键。微生物发酵大豆抗原蛋白寡肽生物活性肽抗原活性降低微生物发酵发酵过程控制PH值温度水分酸性蛋白酶α-半乳糖苷酶大豆抗原不良寡糖降解降解……枯草芽孢酵母菌乳酸菌大豆蛋白在进入动物体内之前降解为小分子蛋白，提高蛋白质的利用率；降低大豆抗原蛋白的抗原活性；降解不良寡糖（棉籽糖、水苏糖）；产生有益代谢产物（乳酸>3%）；具有发酵香味，提高适口性和采食量；豆粕生物发酵的优势大豆基因工程改良β-conglycininα´-亚基对大鼠肠道超微结构的影响正常组：上皮细胞微绒毛结构清晰试验组：上皮细胞微绒毛结构模糊——郭鹏飞（2007）结果表明，β-conglycinin的α´-亚基同样有较强的致过敏活性。RNAGelBlotShowsConglycininCosuppressionTransgenicSoybeanSeeds’

——Kinney等，2001基因敲除（沉默）但研究表明，大豆β-conglycinin含量的减少，将伴随着glycinin含量的增加。而glycinin同样是一种抗原蛋白品名优势劣势微生物发酵法（勃乐）1、零抗原、零不良寡糖；2、含有发酵产生的约7％乳酸(HPLC法)；3、浓郁发酵香味，多吃10%；4、消化率高（体外消化率＞96％）；5、代谢产物丰富，改善肠道微环境；1、相对SPC粗蛋白含量略低（CP50%)有机溶剂萃取法（SPC）1.零不良寡糖；2.蛋白含量高，配方空间大；1.抗原的去除不稳定，仍有部分抗原；2.适口性差；3.性价比不好；膨化大豆1.脂肪利用率高；2.适口性好；1.抗原蛋白未完全去除；2.不良寡糖未去除；酶解（HP3000）1.抗原大部分降解；2.零不良寡糖；1.性价比不好；不同加工工艺大豆蛋白比较因此生物发酵技术是目前降低大豆抗原蛋白的最佳方法发酵豆粕的质量差异及大豆抗原蛋白的含量检测

SDS（定性）抗血清测定（特异性问题）高效液相色谱分析（设备、前处理问题）

以抗大豆β-conglycinin单克隆抗体为介质的

免疫学检测方法Marker豆粕对照发酵豆粕1发酵豆粕2发酵豆粕3发酵豆粕4发酵豆粕5发酵豆粕6电泳图谱以单抗为介质的E