20170701生化检测系统的性能验证与思考课件

生化检测系统的性能验证与思考黄石市中心医院医学检验科1生化检测系统的性能验证与思考黄石市中心医院医学检验科1性能验证的意义与目的一生化分析仪性能验证要点二定量检验的分析性能验证三目录性能验证总结与几点思考四2性能验证的意义与目的一生化分析仪性能验证要点二定量检验的分析2006年6月1日起开始施行的《医疗机构临床实验室管理办法》对检测系统的性能作出特别要求CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》的明确要求CAP认证特别强调实验室需要建立检验方法验证文件3一、性能验证的意义与目的2006年6月1日起开始施行的《医疗机构临床实验室管理办法》性能评价自行研究或开发了一个检测方法，为了使方法的检测结果符合临床要求，必须对方法的性能作详细而全面的实验，这时的实验就是性能评价。该工作由厂家完成性能验证对他人或厂商的评价资料中的几个主要性能的证实。该工作由实验室自己完成4一、性能验证的意义与目的性能评价4一、性能验证的意义与目的为什么要做性能验证？5性能验证是为了确保实验室开展的检验项目，所应用的检测系统的分析性能或检验项目的方法学(检验程序)能够满足检测及临床要求，从而保证患者标本检测结果准确可靠。一、性能验证的意义与目的为什么要做性能验证？5性能验证是为了确保实验室开展的检验项目在哪里做性能验证？6按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗机构临床实验室应承担所开展检验项目的性能验证工作。一、性能验证的意义与目的在哪里做性能验证？6按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗何时做性能验证？7

初次性能验证：新安装的仪器拟开展的项目；新开展项目；同一项目的试剂变更厂家或检验方法发生变更时；仪器校准、发生故障维修后或更换主要的配件后，可能对结果产生较大的影响时，可选择其所开展的部分检验项目进行分析性能验证。一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？7初次性能验证：一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？8

再次性能验证：初次验证后，对精密度、正确度及可报告范围等性能参数至少每12个月进行一次评估。若评估的结果不可接受，则需重新进行性能验证。一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？8再次性能验证：一、性能验证的意义与目的由谁做性能验证？9性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成，必要时可由技术支持人员协助完成试验；而性能验证报告必须由资深的检验人员完成，并经科室主任审核后归档保存。一、性能验证的意义与目的由谁做性能验证？9性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成性能验证包括哪些方面？10定量项目性能验证的内容包括但不限于：精密度（批内、批间）；正确度；检测低限（灵敏度）；携带污染率；线性范围；可报告范围；生物参考区间；检验结果量值溯源；测量不确定度等。一、性能验证的意义与目的性能验证包括哪些方面？10定量项目性能验证的内容包括但不限于怎么做性能验证？11准备工作范围：确定定量检测的项目材料：所需的仪器、配套试剂、校准品、质控品、特殊临床标本等材料方案：制定完整的性能验证方案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据）。一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？11准备工作一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？12试验要求：仪器应进行校准或保养（完成仪器的性能验证）；要尽可能在相同条件下进行各项试验；所有试验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？12试验要求：一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？13对于配套系统一般验证以下内容：准确度---EP15-A《用户对精密度和准确度性能的核实试验—批准指南》正确度---EP9-A2《用患者样本进行方法学比对及偏倚评估—批准指南》第二版精密度---EP5-A2《定量测量方法的精密度性能评价—批准指南》第二版可报告范围---EP-6（EP6-P/EP6-A）《定量测量方法的线性评价》参考区间---CLSIC28-A2《临床实验室如何确定生物参考区间—批准指南》对于非配套系统包括但不限于以上内容（参考CNAS要求）一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？13对于配套系统一、性能验证的意义与目的二、生化分析仪性能验证的要点主要性能指标需满足国家标准YY/T0654-2008国家食品药品监督管理局.中华人民共和国医药行业标准YY/T0654-2008《全自动生化分析仪》[M].北京:中国标准出版社,2008:1-10）14生化分析仪性能标准二、生化分析仪性能验证的要点主要性能指标需满足国家标准YY二、生化分析仪性能验证的要点杂散光：用亚硝酸钠标准溶液，在波长340nm处测定，其吸光度不小于2.0吸光度重复性：仪器对待测物吸光度检测的重复性，CV值应不大于1%吸光度稳定性：在30分钟内，仪器对同一个待测物检测其吸光度的变化不大于0.01吸光度线性范围：仪器对样本吸光度检测的线性误差应不大于1.0%15生化分析仪性能验证要求二、生化分析仪性能验证的要点杂散光：用亚硝酸钠标准溶液，在波二、生化分析仪性能验证的要点吸光度线性范围：仪器对样本吸光度检测的线性误差应不大于1.0%，最大吸光度值不小于2.0交叉污染率：在相同的反应杯中，先后加样检验不同浓度样本时，引起的交叉污染率应不大于1.0%加样加样准确度与重复性：要求加样准确度误差应不超过５％,ＣＶ应不超过２％温度准确度：比色杯内待测液温度为37℃时，准确度为±0.2℃，波动值不大于0.4℃16生化分析仪性能验证要求二、生化分析仪性能验证的要点吸光度线性范围：仪器对样本吸光度示例说明示例说明17181、精密度试验三、定量检验的分析性能验证181、精密度试验三、定量检验的分析性能验证精密度定义：在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相符合的程度19精密度定义：在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼精密度包括：重复性(repeatability)：是指在相同的条件下（时间、校准、操作者、仪器）获得的精密度（即通常说的批内精密度）中间精密度(intermediateprecision)：是指在一种或几种条件因素发生变化，但在同一实验室内获得的精密度（以前常称批间精密度）重现性(reproducibility)：在不同实验室、不同条件下获得的精密度（又称实验室间精密度）实验室内精密度（within-labprecision)：同一实验室内，使用同样设备，由不同操作者在不同时间内获得的精密度（不包括大的设备维护、仪器校准和更换试剂批号）（以前称总精密度）20精密度包括：202121试验依据

CLSI颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南》第二版22试验依据CLSI颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的用于试验的样品一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的血清(浆)样本。常采用日常工作中的室内质控品。所选浓度应为在测量范围内有医学意义的值，即至少有一个浓度在医学决定水平左右。不要为了得到较小的精密度，都选用较高值的样品，甚至超出测量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品，此时所得的精密度往往偏大。23用于试验的样品一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的试剂和校准品评估批内精密度时，要求在整个评估阶段，尽可能使用相同条件，应使用同一种类同一批号的试剂和校准物,如有可能,只进行一次校准。使用不同批号试剂和多次校准都会增加检验结果的变异程度。24试剂和校准品评估批内精密度时，要求在整个评估阶段，尽可能测量重复性（批内精密度）试验方法：连续重复测定20次；结果计算：计算20次检测结果的SD和CV；判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作为允许总误差（TEa），批内精密度<1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提供的标本浓度25测量重复性（批内精密度）试验方法：连续重复测定20次；25测量再现性（中间精密度）试验方法：每天1次测试，连续测试20天；或每天2次测试，连续测试10天；或每天4次测试，连续测定5天;结果计算：剔除离群值后，计算20次检测结果的SD和CV；判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书的要求。注意事项：若选择临床标本，首先应考虑检测物的稳定性，浓度要求同批内精密度；若检测物不稳定，则必须使用质控品进行该试验。26测量再现性（中间精密度）试验方法：每天1次测试，连续测试20示例说明示例说明27282、正确度与准确度三、定量检验的分析性能验证282、正确度与准确度三、定量检验的分析性能验证基本概念准确度(accuracy):一次测量的结果与被测量真值的接近程度。正确度(trueness):真实度，大量测量的均值与真值的接近程度。29基本概念准确度(accuracy):一次测量的结果与被测量3030试验依据

CLSI颁布的EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实指南》31试验依据CLSI颁布的EP15-A文件《用户对精密度和实验方法测定具有溯源性的标准物质参加国家或省临床检验中心室间质评

5个不同水平的质控品，测定均值与靶值的偏差小于临床检验中心室间质评的允许误差表示准确度可以接受32实验方法测定具有溯源性的标准物质32实验方法样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施较好的、或已获认可或的实验室，或与使用配套分析系统的实验室进行比对33实验方法样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施样本比对样本比对34353、可报告范围验证三、定量检验的分析性能验证353、可报告范围验证三、定量检验的分析性能验证基本概念线性范围（LinearRange)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。分析测量范围（AnalyticalMeasurementRange）方法直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果总误差符合要求的分析物浓度的范围。临床可报告范围（ClinicallyReportableRange)是方法可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值的范围。

36基本概念线性范围（LinearRange)是指系统最终的输试验依据

CLSI颁布的EP6-A文件《定量测量方法的线性评价》37试验依据CLSI颁布的EP6-A文件《定量测量方法样品类型

为避免基质效应对结果的影响，选用的样品应与临床实验样品相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用物质的样品，如溶血、脂血、黄疸或含有某些特定药物的样品。样品物浓度应包括试剂厂商提供的试剂所能达到的线性范围。用于试验的样品38样品类型用于试验的样品38样品制备

收集临床检测过程中的高值样品（H）和低值样品(L)，若收集不到低值样品，可用生理盐水或蒸馏水替代（高值和低值标本的浓度值接近于厂家给定的分析测量范围低值和高值）。将H和L样品按：1L、3L+1H、2L+2H、1L+3H、1H关系各自配制(必要时可改变比例)混合，形成系列评价样品。用于试验的样品39样品制备用于试验的样品39

样品测定

在进行线性范围确立时，应进行7-11个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2-4次。进行可报告范围验证时，应进行5个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2次。如果测定方法本身存在明显的携带污染，应根据实际情况采取恰当措施尽量避免对测定结果的影响。用于试验的样品样品测定用于试验的样品40试剂、校准品和仪器试剂

应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或不同批号的试剂。校准品

可采用与评价试剂配套的校准品。校准品的使用应严格按照产品说明，仪器校准步骤与间隔应按照本室的标准操作程序进行。仪器

应有较好的测定精密度及不存在明显的携带污染等。对仪器应进行定期维护及校准，保证其处于正常状态。41试剂、校准品和仪器试剂41数据收集与统计处理预测值计算统计处理以预期值为横坐标，以实测值为纵坐标进行线性回归，得到直线回归方程Y＝aX+b结果分析

1、a在0.97～1.03范围内，b接近于0，r2＞0.95，则该实测值范围为线性范围（再与厂家给定的范围做比较）。2、若a、b、r2不符合上述要求，则缩小范围再验证，若通过则缩小后的范围即为真实范围。（也可采用多项式回归法评价分析测量范围）42数据收集与统计处理预测值计算4220170701生化检测系统的性能验证与思考课件43可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限值；可报告范围的低限：线性范围的检测低限或功能灵敏度为可报告范围的低限。44可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限20170701生化检测系统的性能验证与思考课件45464、参考区间的验证三、定量检验的分析性能验证464、参考区间的验证三、定量检验的分析性能验证参考区间的转移：把一个实验室建立的参考区间转移到另一个实验室使用。参考区间的验证：验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性。基本概念47参考区间的转移：把一个实验室建立的参考区间转移到另一个实验室实验方法1）从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个年龄段），依照实验室标准操作规程检测样本。2）发现离群值应弃用，并新的参考个体代替，以确保测试结果不含离群值。48实验方法1）从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个3）如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在参考区间外，则已知的参考区间可以接受。若3例以上超出界限，再选择20个参考个体进行验证，若少于或等于2个检测值超过已知参考限，则已知参考区间可以接受。若又有3个以上超出参考限，则就应该重新检查所用的分析程序，考虑两个样本总体生物学特征上可能存在差异，并且考虑是否按照大规模研究指南建立自己的参考区间。实验方法493）如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在注意事项参考区间若有国家或行业标准，实验室应转移并验证该参考区间如果同一项目其参考范围有年龄、性别、不同生理时期的差异，则需要一一验证。参考区间的验证关键在于筛选出“健康人群”参考个体不应该是住院患者或者临床病人，除非绝对需要，如可能是必需的儿童患者或老年人的研究。50注意事项参考区间若有国家或行业标准，实验室应转移并验证该参考结果分析按照实验方法评估参考区间的可接受性。51结果分析按照实验方法评估参考区间的可接受性。51525、测量不确定度评定三、定量检验的分析性能验证525、测量不确定度评定三、定量检验的分析性能验证

测量不确定度：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果结果相联系的参数。扩展不确定度：确定测量结果区间的量，合理赋予被测量之值分布的大部分在此区间。标准不确定度：以标准差表示的测量不确定度。合成表征不确定度：当测量结果是由若干其他值求得时，按其他各量的方差和协方差算得的标准不确定度。基本概念53测量不确定度：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果测量不确定度评定方法不确定度的评定方法有自下而上（Botton-up）和自上而下（Top-down）医学实验室适用自上而下（基于正确度和精密度两个主要分量）54测量不确定度评定方法不确定度的评定方法有自下而上（Botto试验依据杨有业,张秀明.临床检验方法学评价[M],人民卫生出版社,2008.CNAS-GL05：2011《测量不确定度要求的实施指南》CNAS-TRL-001：2012《医学实验室――测量不确定度的评定与表达》55试验依据杨有业,张秀明.临床检验方法学评价[M],人民卫生出不确定度评定过程第一步规定被测量第二步识别不确定度来源第三步量化不确定度第四步计算合成不确定度56不确定度评定过程第一步规定被测量56第一步规定被测量说明正在测量什么，包含：系统（需要对存在时间和空间的说明），如血清；组分及分析物，如钙离子；量、质量、浓度、活性等，如mmol/L

57第一步规定被测量说明正在测量什么，包含：系统（需要对存在时第二步识别不确定度来源①样品（取样程序、样品代表性、存储条件）②精密度（重复性、实验室内复现性）③校准（溯源性、值得不确定度、校准方法）④校准值正确性和测量不确定度、校准品与参考物质的互通性⑤与样本相关的效应（基质、干扰物）⑥试剂、校准品和参考物质的批间差⑦不同的操作者⑧器材的变异（天平、移液器、容量瓶等）⑨环境的变化（温度、湿度、震动、电压等）58第二步识别不确定度来源①样品（取样程序、样品代表性、存储第三步量化不确定度1）实验室内测量复现性引入的测量不确定度评定（推荐的优先次序）：①从实验室室内质控数据计算②从实验室间比对数据计算③从重复测量常规样本的合并标准偏差计算59第三步量化不确定度1）实验室内测量复现性引入的测量不确定第三步量化不确定度2）偏倚引入的测量不确定度的评定（推荐的优先次序）①使用有证参考物质（CRM），包括正确度质控品②应用PT数据（无计量溯源性PT项目应慎用）③与参考测量方法比较60第三步量化不确定度2）偏倚引入的测量不确定度的评定（推荐第四步计算合成不确定度1）合成标准不确定度合成前，所有不确定度分量都必须以标准不确定度即标准偏差表示合成标准不确定度计算：

UC=√u2c(bias)+u2(Rw)+….uc(bias)为标准偏倚不确定度

u(Rw)为室内复现性不确定度61第四步计算合成不确定度1）合成标准不确定度61第四步计算合成不确定度2）合成相对不确定度合成前，所有不确定度分量都必须以相对标准不确定度表示合成相对不确定度计算：

Ucrel=√u2crel(bias)+u2rel(Rw)+….uc(bias)为相对偏倚不确定度

u(Rw)为相对室内复现性不确定度62第四步计算合成不确定度2）合成相对不确定度62第四步计算合成不确定度3）扩展不确定度

扩展不确定度需要给出一个区间，合理地赋予被测量值的数量分布大部分会落在此区间内扩展不确定度计算：

U=K*ucUrel=K*ucrel

U为扩展不确定度，Urel为相对扩展不确定度，K为扩展因子。正态分布K=2时，包含概率P=95.43%,K=3时,包含概率P=99.73%，通常采用K=263第四步计算合成不确定度3）扩展不确定度6320170701生化检测系统的性能验证与思考课件64测量不确定度的报告1）血清葡萄糖

GLU=5.13mmol/L,U=0.18mmol/L(K=2)

表示95%的包含概率2）血清葡萄糖

GLU=（5.13±0.18）mmol/L(K=2)

表示95%的包含概率报告的有效数字，在应用uc和U时大都采用两位有效数字。在最终报告结果时一般做法是降测量不确定度修约到小数后一位（特殊要求例外）65测量不确定度的报告1）血清葡萄糖65总结与几点思考仪器性能指标的验证如有医药行业标准需要严格按照行业标准进行，如果没有可参考厂家标准。

仪器的性能验证通常要求仪器厂家有授权的工程师完成，现场需要有经验的人员进行监督确认，如有校准没有通过的情况，一定要要求厂家认真解决并重新校准，直到符合国家标准并出具校准报告。四、性能验证总结与几点思考66总结与几点思考仪器性能指标的验证如有医药行业标准需要严格按照总结与几点思考方法学的分析性能验证包涵许多的内容、技术要求较高，在实际工作中，应根据具体情况进行分析，在质量体系允许的范围内，选择合适的试验方法完成此项工作，保留原始数据，结合制定的判断标准，综合分析试验结果，以评价所选的检验程序能否满足临床实验的要求。性能验证是校准的一种确认，是对仪器检测系统的一种赋值的肯定，是保证检验结果的可靠性必备步骤。四、性能验证总结与几点思考67总结与几点思考方法学的分析性能验证包涵许多的内容、技术要求较谢谢大家聆听！68谢谢大家聆听！68生化检测系统的性能验证与思考黄石市中心医院医学检验科69生化检测系统的性能验证与思考黄石市中心医院医学检验科1性能验证的意义与目的一生化分析仪性能验证要点二定量检验的分析性能验证三目录性能验证总结与几点思考四70性能验证的意义与目的一生化分析仪性能验证要点二定量检验的分析2006年6月1日起开始施行的《医疗机构临床实验室管理办法》对检测系统的性能作出特别要求CNAS-CL02：2012《医学实验室质量和能力认可准则》的明确要求CAP认证特别强调实验室需要建立检验方法验证文件71一、性能验证的意义与目的2006年6月1日起开始施行的《医疗机构临床实验室管理办法》性能评价自行研究或开发了一个检测方法，为了使方法的检测结果符合临床要求，必须对方法的性能作详细而全面的实验，这时的实验就是性能评价。该工作由厂家完成性能验证对他人或厂商的评价资料中的几个主要性能的证实。该工作由实验室自己完成72一、性能验证的意义与目的性能评价4一、性能验证的意义与目的为什么要做性能验证？73性能验证是为了确保实验室开展的检验项目，所应用的检测系统的分析性能或检验项目的方法学(检验程序)能够满足检测及临床要求，从而保证患者标本检测结果准确可靠。一、性能验证的意义与目的为什么要做性能验证？5性能验证是为了确保实验室开展的检验项目在哪里做性能验证？74按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗机构临床实验室应承担所开展检验项目的性能验证工作。一、性能验证的意义与目的在哪里做性能验证？6按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗何时做性能验证？75

初次性能验证：新安装的仪器拟开展的项目；新开展项目；同一项目的试剂变更厂家或检验方法发生变更时；仪器校准、发生故障维修后或更换主要的配件后，可能对结果产生较大的影响时，可选择其所开展的部分检验项目进行分析性能验证。一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？7初次性能验证：一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？76

再次性能验证：初次验证后，对精密度、正确度及可报告范围等性能参数至少每12个月进行一次评估。若评估的结果不可接受，则需重新进行性能验证。一、性能验证的意义与目的何时做性能验证？8再次性能验证：一、性能验证的意义与目的由谁做性能验证？77性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成，必要时可由技术支持人员协助完成试验；而性能验证报告必须由资深的检验人员完成，并经科室主任审核后归档保存。一、性能验证的意义与目的由谁做性能验证？9性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成性能验证包括哪些方面？78定量项目性能验证的内容包括但不限于：精密度（批内、批间）；正确度；检测低限（灵敏度）；携带污染率；线性范围；可报告范围；生物参考区间；检验结果量值溯源；测量不确定度等。一、性能验证的意义与目的性能验证包括哪些方面？10定量项目性能验证的内容包括但不限于怎么做性能验证？79准备工作范围：确定定量检测的项目材料：所需的仪器、配套试剂、校准品、质控品、特殊临床标本等材料方案：制定完整的性能验证方案（尤其是各项性能参数的判断标准的制定及其依据）。一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？11准备工作一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？80试验要求：仪器应进行校准或保养（完成仪器的性能验证）；要尽可能在相同条件下进行各项试验；所有试验均需在室内质控结果在控的情况下方可进行。一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？12试验要求：一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？81对于配套系统一般验证以下内容：准确度---EP15-A《用户对精密度和准确度性能的核实试验—批准指南》正确度---EP9-A2《用患者样本进行方法学比对及偏倚评估—批准指南》第二版精密度---EP5-A2《定量测量方法的精密度性能评价—批准指南》第二版可报告范围---EP-6（EP6-P/EP6-A）《定量测量方法的线性评价》参考区间---CLSIC28-A2《临床实验室如何确定生物参考区间—批准指南》对于非配套系统包括但不限于以上内容（参考CNAS要求）一、性能验证的意义与目的怎么做性能验证？13对于配套系统一、性能验证的意义与目的二、生化分析仪性能验证的要点主要性能指标需满足国家标准YY/T0654-2008国家食品药品监督管理局.中华人民共和国医药行业标准YY/T0654-2008《全自动生化分析仪》[M].北京:中国标准出版社,2008:1-10）82生化分析仪性能标准二、生化分析仪性能验证的要点主要性能指标需满足国家标准YY二、生化分析仪性能验证的要点杂散光：用亚硝酸钠标准溶液，在波长340nm处测定，其吸光度不小于2.0吸光度重复性：仪器对待测物吸光度检测的重复性，CV值应不大于1%吸光度稳定性：在30分钟内，仪器对同一个待测物检测其吸光度的变化不大于0.01吸光度线性范围：仪器对样本吸光度检测的线性误差应不大于1.0%83生化分析仪性能验证要求二、生化分析仪性能验证的要点杂散光：用亚硝酸钠标准溶液，在波二、生化分析仪性能验证的要点吸光度线性范围：仪器对样本吸光度检测的线性误差应不大于1.0%，最大吸光度值不小于2.0交叉污染率：在相同的反应杯中，先后加样检验不同浓度样本时，引起的交叉污染率应不大于1.0%加样加样准确度与重复性：要求加样准确度误差应不超过５％,ＣＶ应不超过２％温度准确度：比色杯内待测液温度为37℃时，准确度为±0.2℃，波动值不大于0.4℃84生化分析仪性能验证要求二、生化分析仪性能验证的要点吸光度线性范围：仪器对样本吸光度示例说明示例说明85861、精密度试验三、定量检验的分析性能验证181、精密度试验三、定量检验的分析性能验证精密度定义：在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼此相符合的程度87精密度定义：在规定条件下，多次重复测定同一量时各测定值之间彼精密度包括：重复性(repeatability)：是指在相同的条件下（时间、校准、操作者、仪器）获得的精密度（即通常说的批内精密度）中间精密度(intermediateprecision)：是指在一种或几种条件因素发生变化，但在同一实验室内获得的精密度（以前常称批间精密度）重现性(reproducibility)：在不同实验室、不同条件下获得的精密度（又称实验室间精密度）实验室内精密度（within-labprecision)：同一实验室内，使用同样设备，由不同操作者在不同时间内获得的精密度（不包括大的设备维护、仪器校准和更换试剂批号）（以前称总精密度）88精密度包括：208921试验依据

CLSI颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的精密度性能评价-批准指南》第二版90试验依据CLSI颁布的EP5-A2文件《定量测量方法的用于试验的样品一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的血清(浆)样本。常采用日常工作中的室内质控品。所选浓度应为在测量范围内有医学意义的值，即至少有一个浓度在医学决定水平左右。不要为了得到较小的精密度，都选用较高值的样品，甚至超出测量范围。也不应选用靠近最低检出限的样品，此时所得的精密度往往偏大。91用于试验的样品一般常采用临床实验室收集的稳定和冷冻贮存的试剂和校准品评估批内精密度时，要求在整个评估阶段，尽可能使用相同条件，应使用同一种类同一批号的试剂和校准物,如有可能,只进行一次校准。使用不同批号试剂和多次校准都会增加检验结果的变异程度。92试剂和校准品评估批内精密度时，要求在整个评估阶段，尽可能测量重复性（批内精密度）试验方法：连续重复测定20次；结果计算：计算20次检测结果的SD和CV；判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作为允许总误差（TEa），批内精密度<1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提供的标本浓度93测量重复性（批内精密度）试验方法：连续重复测定20次；25测量再现性（中间精密度）试验方法：每天1次测试，连续测试20天；或每天2次测试，连续测试10天；或每天4次测试，连续测定5天;结果计算：剔除离群值后，计算20次检测结果的SD和CV；判断标准：<1/3TEa；或者符合试剂说明书的要求。注意事项：若选择临床标本，首先应考虑检测物的稳定性，浓度要求同批内精密度；若检测物不稳定，则必须使用质控品进行该试验。94测量再现性（中间精密度）试验方法：每天1次测试，连续测试20示例说明示例说明95962、正确度与准确度三、定量检验的分析性能验证282、正确度与准确度三、定量检验的分析性能验证基本概念准确度(accuracy):一次测量的结果与被测量真值的接近程度。正确度(trueness):真实度，大量测量的均值与真值的接近程度。97基本概念准确度(accuracy):一次测量的结果与被测量9830试验依据

CLSI颁布的EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实指南》99试验依据CLSI颁布的EP15-A文件《用户对精密度和实验方法测定具有溯源性的标准物质参加国家或省临床检验中心室间质评

5个不同水平的质控品，测定均值与靶值的偏差小于临床检验中心室间质评的允许误差表示准确度可以接受100实验方法测定具有溯源性的标准物质32实验方法样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施较好的、或已获认可或的实验室，或与使用配套分析系统的实验室进行比对101实验方法样本室间比对：要求与使用相同检测方法的、质量保证措施样本比对样本比对1021033、可报告范围验证三、定量检验的分析性能验证353、可报告范围验证三、定量检验的分析性能验证基本概念线性范围（LinearRange)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。分析测量范围（AnalyticalMeasurementRange）方法直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果总误差符合要求的分析物浓度的范围。临床可报告范围（ClinicallyReportableRange)是方法可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值的范围。

104基本概念线性范围（LinearRange)是指系统最终的输试验依据

CLSI颁布的EP6-A文件《定量测量方法的线性评价》105试验依据CLSI颁布的EP6-A文件《定量测量方法样品类型

为避免基质效应对结果的影响，选用的样品应与临床实验样品相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用物质的样品，如溶血、脂血、黄疸或含有某些特定药物的样品。样品物浓度应包括试剂厂商提供的试剂所能达到的线性范围。用于试验的样品106样品类型用于试验的样品38样品制备

收集临床检测过程中的高值样品（H）和低值样品(L)，若收集不到低值样品，可用生理盐水或蒸馏水替代（高值和低值标本的浓度值接近于厂家给定的分析测量范围低值和高值）。将H和L样品按：1L、3L+1H、2L+2H、1L+3H、1H关系各自配制(必要时可改变比例)混合，形成系列评价样品。用于试验的样品107样品制备用于试验的样品39

样品测定

在进行线性范围确立时，应进行7-11个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2-4次。进行可报告范围验证时，应进行5个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2次。如果测定方法本身存在明显的携带污染，应根据实际情况采取恰当措施尽量避免对测定结果的影响。用于试验的样品样品测定用于试验的样品108试剂、校准品和仪器试剂

应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或不同批号的试剂。校准品

可采用与评价试剂配套的校准品。校准品的使用应严格按照产品说明，仪器校准步骤与间隔应按照本室的标准操作程序进行。仪器

应有较好的测定精密度及不存在明显的携带污染等。对仪器应进行定期维护及校准，保证其处于正常状态。109试剂、校准品和仪器试剂41数据收集与统计处理预测值计算统计处理以预期值为横坐标，以实测值为纵坐标进行线性回归，得到直线回归方程Y＝aX+b结果分析

1、a在0.97～1.03范围内，b接近于0，r2＞0.95，则该实测值范围为线性范围（再与厂家给定的范围做比较）。2、若a、b、r2不符合上述要求，则缩小范围再验证，若通过则缩小后的范围即为真实范围。（也可采用多项式回归法评价分析测量范围）110数据收集与统计处理预测值计算4220170701生化检测系统的性能验证与思考课件111可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限值；可报告范围的低限：线性范围的检测低限或功能灵敏度为可报告范围的低限。112可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限20170701生化检测系统的性能验证与思考课件1131144、参考区间的验证三、定量检验的分析性能验证464、参考区间的验证三、定量检验的分析性能验证参考区间的转移：把一个实验室建立的参考区间转移到另一个实验室使用。参考区间的验证：验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性。基本概念115参考区间的转移：把一个实验室建立的参考区间转移到另一个实验室实验方法1）从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个年龄段），依照实验室标准操作规程检测样本。2）发现离群值应弃用，并新的参考个体代替，以确保测试结果不含离群值。116实验方法1）从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个3）如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在参考区间外，则已知的参考区间可以接受。若3例以上超出界限，再选择20个参考个体进行验证，若少于或等于2个检测值超过已知参考限，则已知参考区间可以接受。若又有3个以上超出参考限，则就应该重新检查所用的分析程序，考虑两个样本总体生物学特征上可能存在差异，并且考虑是否按照大规模研究指南建立自己的参考区间。实验方法1173）如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在注意事项参考区间若有国家或行业标准，实验室应转移并验证该参考区间如果同一项目其参考范围有年龄、性别、不同生理时期的差异，则需要一一验证。参考区间的验证关键在于筛选出“健康人群”参考个体不应该是住院患者或者临床病人，除非绝对需要，如可能是必需的儿童患者或老年人的研究。118注意事项参考区间若有国家或行业标准，实验室应转移并验证该参考结果分析按照实验方法评估参考区间的可接受性。119结果分析按照实验方法评估参考区间的可接受性。511205、测量不确定度评定三、定量检验的分析性能验证525、测量不确定度评定三、定量检验的分析性能验证

测量不确定度：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果结果相联系的参数。扩展不确定度：确定测量结果区间的量，合理赋予被测量之值分布的大部分在此区间。标准不确定度：以标准差表示的测量不确定度。合成表征不确定度：当测量结果是由若干其他值求得时，按其他各量的方差和协方差算得的标准不确定度。基本概念121测量不确定度：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果测量不确定度评定方法不确定度的评定方法有自下而上（Botton-up）和自上而下（Top-down）医学实验室适用自上而下（基于正确度和精密度两个主要分量）122测量不确定度评定方法不确定度的评定方法有自下而上（Botto试验依据杨有业,张秀明.临床检验方法学评价[M],人民卫生出版社,2008.CNAS-GL05：2011《测量不确定度要求的实施指南》CNAS-TRL-001：2012《医学实验室――测量不确定度的评定与表达》123试验依据杨有业,张秀明.临床检验方法学评价[M],人民卫生出不确定度评定过程第一步规定被测量第二步识别不确定度来源第三步量化不确定度第四步计算合成不确定度124不确定度评定过程第一步规定被测量56第一步规定被测量说明正在测量什么，包含：系统（需要对存在时间和空间的说明），如血清；组分及分析物，如钙离子；量、质量、浓度、活性等，如mmol/L

125第一步规定被测量说明正在测量什么，包含：系统（需要对存在时第二步识别不确定度来源①样品（取样