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文档简介
第四章尿液检查第一节概述尿液由肾脏生成,通过输尿管
膀胱及尿道排出体外一、尿液的生成与排泄二、尿液分析目的三、尿标本的收集、保存与检测后处理一、尿液的生成与排泄(一)肾脏的结构:肾单位
(二)尿液生成过程:肾小球的虑过
肾小管和集合管重吸收
肾小管和集合管的分泌与排泄(三)尿液的排泄肾单位的构成
血管球
肾小体肾小囊:内层、外层、囊腔、外层
近端小管曲部
近端小管
肾单位
近端小管直部
近端小管直部肾小管细段
远端小管直部
远端小管直部
远端小管
远端小管曲部
二、尿液分析的目的泌尿系统疾病的筛查与鉴别其他系统疾病的辅助诊断与观察安全用药的监护中毒与职业病的防护健康体检三、尿液本的收集、保存与检测后处理收集:保证检测结果的准确性保存:防止化学和有形成分的改变处理:防止疾病传播标本的收集(一)、容器:清洁干燥密封性好较大口的一次性尿样杯易于启盖的密封容器,准确标记(二)、标本种类及留取方法:1、晨尿
2、随机尿3、定时尿:餐后尿3h尿12h尿24h尿
晨尿方法:清晨起来第一次尿优点:尿液浓缩酸化
利于异常成分的检查
临床应用:住院病人
糖尿病、泌尿系疾病
疗效观察定时尿3h-尿细胞排泄率一般是早晨的收集上午的6:00~9:00时间段12h-尿沉渣定量晚上8:00到次晨8:00十二小时之内尿液24h-尿化学成分定量上午8:00排空膀胱,并弃去排出的尿,收集此后每次派出的尿液并记录直到次日早上8:00最后一次排出的尿液,全部收集于容器内。尿液标本的接收与保存标本接收:缺少下列信息临床有权拒收1、患者姓名、性别、科别、床号2标本采集时间、日期(超过2小时拒收)3尿量不够、采集标本容器不符合要求等尿标本保存1.4°C冷藏或冷冻可保存6小时。化学防腐:防腐剂1甲醛-管型、细胞检查2甲醛-尿糖、蛋白3浓盐度酸或冰乙酸-17羟类固醇4麝香草酚-化学、细胞5碳酸钠-卟啉检测和处理消毒-防止疾病的传播标本、实验器材、尿杯及其他耗材第二节尿液理学检查尿液的一般性状检查(
一)
尿量(二)尿液外观(三)气味一尿量一定时间内排出的尿量健康人:1-2L/24h
多尿:>2.4L/24h少尿:<17mL/h、0.4L/24h
无尿:<100mL/24h、0/12h少尿或无尿:尿量<17ml/h<0.8ml/kg体重)或24h尿量<0.4L称为少尿;尿量<100ml/12h内无尿液排出者为无尿二尿液外观1血尿2血红蛋白3肌红蛋白4胆红蛋白5乳糜尿6脓尿7盐类结晶尿8尿液无色或黄色变浅血红蛋白尿胆红蛋白尿定义血浆游离Hb>1000mg/L—Hb尿外观新鲜—粉红陈旧—棕/酱油/浓茶特点镜检无RBC、潜血(BLD)+
意义血管内溶血乳糜尿乳糜尿(chyluria)乳糜/淋巴液尿原理特点①乳糜试验混尿+乙醚—乳糜微粒+苏丹Ⅲ染色
阳性橘红色脂肪球②尿静置后分三层盐类结晶尿结晶尿(crystalluria)
定义尿内含大量的盐类结晶种类①尿酸盐—+热清②磷酸/碳酸盐—+乙酸清/+气泡③草酸盐—+盐酸清镜检见大量盐类结晶尿液无色或黄色变浅肌红蛋白
外观新鲜—粉红陈旧—暗褐色特点镜检无RBC、潜血(BLD)+
加80%硫酸铵溶液—溶解意义各种肌损伤:大面积烧伤/缺氧缺血肌病三气味正常:略酸氨味-慢性膀胱炎、尿潴留烂苹果味-糖尿病酮症酸中毒腐败臭味-泌尿系感染老鼠屎-苯丙酮尿症尿比重测定㈠定义尿比重(urinaryspecif£gravity,SG)指在4℃时尿液与同体积的纯水重量之比,又称尿比密,它表示肾小管的浓缩和稀释能力尿液比密测定测定方法:称重法折射仪法试带法浮标法参考值:成年人晨尿1.015~1.025;随机尿1.003~1.035;婴儿尿比密偏低质量控制:方法选择仪器校正及维护意义※
1、SG↑缺水、溶质↑、急性肾炎2、SG↓肾炎、大量饮水、尿崩症1、试带法⑴简单,不受GS,造影剂影响⑵精确度差,对过高/低的SG不敏感,不能作为诊断肾功能变化的指标。2、折射计法有手提式或座式两种仪器。标本用量小,可重复测定,尤其适用于少尿患者。结果精确可靠,还可测算总固体量。应用较为普遍。被NCCLS推荐为参考方法。3尿比重计法由于比重计本身刻度标示误差较大而容易引起系统误差,因而NCCLS建议不再使用比重计法。尿液渗透浓度测定㈠定义在一定大气压和温度下尿内溶质分子和离子的个数。㈡检测方法及评价1冰点法
2评价:尿渗透压比SG更能客观的反映肾脏的浓缩稀释功能.㈢临床意义※
⑴正常600∽1000mOsm/KgH2O⑵了解肾小管浓缩稀释功能
参考值随机尿:600~1000mOsm/kgH2O
晨尿:<14岁657S士179mOsm/kgH2O15~59岁768士226mOsm/kgH2O60~75岁557士226mOsm/kgH2O血浆渗量275~315mOsm/kg.H2O尿渗量/血浆渗量:(浓度指数)3.0~4.5:1清晨空腹时:渗透溶质清楚率2~3mL/分限水时:自由水清除率-0.4~-10.7ml/分水负荷时:1-9 ML/分质量控制冰点渗透压计的校准标准要求与处理临床意义评价肾胀浓缩稀释功能:1.若UOsm/posm均为正常,表明为高渗尿,浓缩稀释功能正常2若UOsm/posm等于或接近于1,称等渗尿,为肾脏浓缩功能接近完全丧失的表现;3Uosm<200mOsm, kgH2O,UOsm/posm<1为低渗尿鉴别肾前性和肾性少尿:肾前性少尿,肾小管浓缩功能完好,故尿渗量较高,常>450mOsm/kgH2O;肾小管坏死致肾性少尿时,尿渗量常<350mOsm/kgH2O.尿液浓缩稀释实验测定方法及评价参考区间质量控制临床意义测定方法及评价Fishber9(费氏)浓缩稀释实验昼夜尿比密实验(又称莫氏浓缩试验)3h尿比密实验(又称改良莫氏实验)参考区间昼夜尿比密实验:24小时尿量为1000~2000mL,昼夜尿量之比为3~4:1,12小时夜尿量<750ml;尿液最高比密>1.020;最高比密与最低比密之差>0.0093小时尿比密实验:白天的尿量占24小时尿量的2/3~3/4,其中必有一次尿比密>1.025;一次<1.003质量控制1.最好采用折射仪发测定尿比密,质控措施同尿比密测定2.每次留尿必须空排,准确测量尿量及比密并记录。3.夏季夜间留尿需要注意防腐,解释实验结果时还应该考虑气温的影响。4.水肿患者因钠水潴留,影响实验结果,不宜做该实验。临床意义鉴于1:肾小管功能受损早期如:慢性肾炎晚期、慢性肾盂肾炎、高血压、糖尿病、肾动脉硬化晚期。2:肾外疾病如:尿崩症、妊娠高血压、严重肝病及低蛋白水肿等。第七节尿液干化学分析仪及临床应用一尿液干化学分析仪的类型按测试项目分类8项尿液分析仪9项尿液分析仪10项尿液分析仪11项尿液分析仪
1、8项尿液分析仪检测项目:尿蛋白、尿糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血2、9项尿液分析仪检测项目:尿蛋白、尿糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白细胞。
3、10项尿液分析仪检测项目检测项目:蛋白、糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞4、11项尿液分析仪检测项目:蛋白、糖、ph、酮体、胆红素、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、比密、尿隐血、维生素c按自动化分类半自动尿液分析仪检测项目包括8项9项10项11项12项全自动尿液分析仪检测项目包括10项11项12项二尿干化学分析试带组成及反应原理尿液尿干化学分析多联干化试带的组成1、第一层为尼龙莫2、第二层绒制层3、第三层吸水层4、第四层支持层尿液干化学试带测试项目的原理蛋白质(PRO):PH指示剂蛋白误差原理。干化学试纸中含有溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统及表面活性剂,其中溴酚蓝的PH阈为3.0-4.6,在PH3.2时会产生阴离子,与带阳离子的蛋白质结合后产生颜色反应,本试剂只适合于白蛋白的检测,球蛋白浓度高时呈弱阳性。隐血(BLD)血红蛋白中含有血红素基团,具有过氧化物酶活性,可使试带中的过氧化物(如过氧化氢茴香素)放出新生氧,将邻联甲苯胺受体氧化成蓝色化合物。本试带不能区分血红蛋白和肌红蛋白,与血红蛋白起反应时呈均匀的绿-蓝色;与红细胞起反应时呈斑点状绿-蓝色。葡萄糖(GLU)葡萄糖氧化酶法。试纸中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、缓冲剂及显色原。尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,天生葡萄糖酸内酯和过氧化氢,后者在过氧化物酶的催化下使色素原(如邻联甲苯胺、碘化钾等)氧化而呈色。酮体(KET)尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮和β-羟丁酸。含酮体的尿液中加亚硝基铁氰化钠后,与氨液接触时出现紫红色环。白细胞(LEU)粒细胞中存在酯酶,能作用于试纸中的吲哚酚酯(特异性酯酶底物),使后者开释出吲哚酚,吲哚酚又与重氮盐发生反应形成紫色络合物,根据显色深浅换算白细胞数。本实验只能检测出粒细胞,而不能检测淋巴细胞。比重(SG)试纸中含有高分子电解质甲乙烯酸/马来酸及指示剂麝香草酚蓝等,高分子电解质的COONˉ基与尿中的电解质发生反应时开释出H+,后着使指示剂变色。胆红素(BIL)重氮反应原理。试纸中含有2,4,2-三氯苯胺重氮盐,在强酸介质中葡萄糖醛酸胆红素与2,4,2-三氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色。尿胆原(UBG):重氮反应原理。
PH值:试纸中含有指示剂,一般为两种酸碱指示剂如甲基红(PH为4.6-6.2)和溴香草酚蓝(PH为6.7-7.5)适当配合。变色范围一般为4.5-9.0,由橙红色→蓝色。
抗坏血酸(VitC):吲哚酚法。尿中含高浓度的抗坏血酸,可使试带的葡萄糖、隐血试验呈假阴性,因此有的干化学试带上含有抗坏血酸,以便对尿液分析结果作正确判定。
亚硝酸盐(NIT):Griess实验原理。试纸中含有对氨基苯胂酸,被亚硝酸盐重氮化而成重氮盐,后者与1,2,3,4-四氢苯并喹啉-3酚偶联产生粉红色。当尿液中含有硝酸盐还原阳性菌(如大肠埃希氏菌)存在并繁殖时,呈阳性反应。而球菌、真菌或支原体感染时呈阴性反应。三尿液干化分析仪的主要部件与工作原理(一)机械系统:全自动尿液分析仪
半自动尿液分析仪(二)光学系统:滤光片分光系统
发光二极管系统CCD系统(三)电路系统四、尿液干化学分析仪的安装、保养与使用(一)仪器的安装(二)仪器的鉴定(三)仪器的日常的维护与保养(四)仪器的使用(—)仪器的安装1、实验室环境要求清洁、通风、温湿度适宜2、实验台要求台面稳定、水平,最好选用水泥试验台3、实验空间空间大小适宜、便于操作4、用电安全保证仪器接地良好,电源电压稳定(二)仪器的鉴定:新仪器安装后或每次大维修之后,必须对仪器的技术性能进行测试、评价、这对保证检验质量起着重要作用1、首先将仪器调整在最佳工作状态2、评价仪器及干化学试带的准确度3、用传统的方法与尿液分析仪测定做对比分析4了解仪器对每项检测指标的测试范围(三)仪器的日常维护与保养1、尿液分析仪日常维护2、尿液干化学分析仪的保养每日保养:每日工作完毕,应用清水或无腐蚀性的中性清洗剂清洗每周保养或每月保养:各类尿液分析仪的每周或每月保养,根据仪器的具体情况而定(四)仪器的使用1、保持仪器洁净2、标本要新鲜测定并注意混匀3、使用配套的合格试带并妥善保管4、保证干化学反应区有足够的尿量5、检测温度要适宜6、正确解释检验结果.五、尿液干化学分析仪检验的质量控制六、尿液干化学分析仪的临床应用与评价第六节尿液其他化学成分检查尿液葡萄糖定量测定乳糜尿定性检查尿液人绒毛膜促性腺激素检查尿液含铁血黄素定性检查尿液卟啉定性检查尿液苯丙酮酸定性检查尿液葡萄糖定量测定【测定方法及评价】己糖激酶法邻甲苯胺法葡萄糖氧化酶法【质量控制】收集24小时的尿液,因标本放置时间长,需加甲苯防腐。一般每升尿液中加甲苯5~20ml。留尿后立即测定,因尿易引起污染而使尿糖降低先用班氏法做定性试验,按测出的大概按量,用蒸馏水稀释尿液使葡萄糖含量在3g每升以下,再进行操作,计算结果剩以稀释倍数。【参考区间】<2.8mmol/
24h(<0.5g/24h)或0.1~0.8mmol每升。【临床意义】同定性试验。但定量测定有助于胰岛素依赖性糖尿病患者治疗过程的检测。第三节尿液常用的化学检查一、尿液PH测定二、尿液蛋白质定性检查三、尿液葡萄糖定性四、尿液酮体定性检查五、尿液胆红素定性检查六、尿胆原定性检查七、尿液血红蛋白定性试验八、尿液亚酸盐定性检查一、尿液PH测定【测定方法及评价】(1)试纸法试纸/试带浸入尿中目/仪器测特点:①简单,广泛用应;`
②试带易变潮—试带垫片(BTB+甲基红)
黄-酸(2)指示剂法尿+溴麝香草酚篮绿-中`
`
蓝-碱特点①简单②黄疸/血尿易干扰`③指示剂变色范围(6-7.6)⑶滴定法0.1mol/LNaOH+尿PH滴定至7.4
`求尿液可滴定酸特点:①可进行pH值动态监测
②操作复杂⑷PH计法用电极直接测定特点①精确度高,适用于科研`②需要特殊仪器—经常效准PH计【质量控制】⑴试纸要避光、干燥保存,防止被其它化学物质污染。⑵标本应及时测定,长期放置会因细菌生长分解尿素产生氨,使pH偏高。⑶尿液pH本身还可作为其它检查项目的质控指标,若pH<3或>9均会影响其它检测结果,如蛋白、比重等。应按规定进行调整。【临床意义】⑴正常①尿PH=4.5~8.0晨尿=5.5~6.5`②尿可滴定酸=20~40mmol/24h⑵尿PH减低①进酸性物—高蛋白食/酸性药物②体内产酸增多:A饥饿/运动/应激;B酸中毒/痛风/白血病/糖尿病等③肾小管排酸增多:低血钾性碱中毒④CO2潴留—呼吸性酸中毒⑶尿PH增高①进碱性物—过多蔬菜水果/碱性药物体内丢酸增多肾小管排酸减少肾小管性酸中毒④CO2排出增多呼吸性碱中毒⑤产碱增多—尿路感染细菌分解尿素产氨⑷指导临床用药二、尿液蛋白质定性检查定义:尿蛋白>150mg/24h或>100mg/L常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿。
【测定方法与评价】⑴试带法原理:蛋白+指示剂--PH颜色变化—蛋白量成正比评价:A快速,简便-适于普查`
B清蛋白—敏感/球蛋白—不敏感`
`
本周蛋白漏检`
C尿PH增高—假阳性⑵加热乙酸法原理:蛋白+热—变性/凝固+酸—易沉淀消除磷酸盐干扰评价:A特异性强,干扰因素少B检出清/球蛋白—敏感度低(0.15g/L)C用作蛋白质定性的确证试验⑶磺基水杨酸(磺柳酸)法原理:带正电蛋白+磺柳酸沉淀注意1.某些药物-青霉素/SMZ-CO及造影剂假阳性2.尿内含高浓度尿/草酸或粘蛋白评价:A简便/灵敏/迅速/敏感度高(0.05g/L)`
B与所有的蛋白都能反应【参考区间】阴性【质量控制】1.方法的选择2.干扰因素的控制和分析标本质量PH离子强度药物3.在规定时间内判读试带的选购和保管【临床意义】⑴正常定性(-)⑵蛋白尿定性(+)①生理性
机理肾血管痉挛→毛细血管通透性↑原因:运动,受寒,紧张,妊娠,发热,体位性等。特点定性(+)A、肾小球性蛋白尿机理肾小球滤过膜孔径↑或静电屏障改变特点定性+~++++原因原发或继发肾小球肾炎(+~++)肾病综合症(++++)B肾小管性蛋白尿机理肾小管损害特点±~++原因肾小管间质性肾炎
②病理性C混合性蛋白尿机理与特点小球+小管原因小球和小管性疾病后期D溢出性蛋白尿病机多发性骨髓瘤溶血性疾病大面积肌损伤(肌红蛋白)特点定性(+)—(++)E组织蛋白尿机理肾单位分泌其它器脏产生的原因提示组织损伤,心肌坏死,肿瘤
F假性蛋白尿原因血液/白带/月经/前列腺液等污染三、尿液葡萄糖定性检查【测定方法及评价】⑴班氏法原理:GS+班氏试剂——变色质控——
假阳性评价:①非特异性定性试验`②简单/但易受其他还原物的影响⑵干化学试带法原理:特异性GS+过氧化物酶——蓝/红质控1尿混有强氧化物—漂白粉—假(+)2标本久放-细菌分解GS—假(-)评价:特异性强/灵敏度高/简便迅速⑶薄层层析法复杂/费时/昂贵【参考区间】【质量控制】空腹尿及餐后尿:
阴性容器清洁干化学试带选购、保存与使用标本留取及时送检干扰因素及处理维生素C等还原物质可将尿液煮沸几分钟在进行测定高比密及高酮体可使用班氏法辅助确定阳性成度蛋白尿其他还原性糖类黄疸尿可干扰反应颜色F)判断结果g)
其他【临床意义】⑴正常定性(-)⑵糖尿定性(+)①生理性A饮食性
B精神性
C妊娠(15~20%)②病理性A垂体前叶机能↑—生长激素↑1)B甲亢内分泌疾病C胰岛素分泌↓→利用葡萄糖↓
D肾上腺皮功↑→促糖原异生
E嗜酪细胞瘤去甲…,肾上腺素↑
—肝糖原降解2)肾性糖尿小管损害(肾糖阈↓)③其他糖尿如乳糖等四、尿液酮体定性检查1概念尿酮体(urineketoneodies,KET)是脂肪代谢中间产物,由乙酰乙酸、β羟丁酸和丙酮组成。【测定方法和评价】⑴Lange法硝普钠在碱性条件下与乙酰乙酸丙酮生成紫红色化合物⑵Rothera原理同Lange法⑶干化学试带法原理同上质控尿要新鲜方法灵敏度(mg/L)
乙酰乙酸β羟丁酸丙酮
Lange50-200Rothera80
-100干化学试带法
50~100
-400~700评价不同试带对酮体的敏感性不同【参考区间】【参考区间】
阴性
【质量控制】
尿液要正常正确分析结果【临床意义】⑴正常定性(-)⑵糖尿病酮症酸中毒假(-)①肾酮阈值增高—肾严重受损`②酮血症期——β羟丁酸⑶其它应激-剧烈运动/饥饿/感染/严重腹泻,呕吐/全麻等中毒五、尿液胆红素定性检查
尿胆红素尿胆原尿胆素衰老RBC无效RBC生成其它:如Mb等血红素↓胆绿素↓胆红素单核-吞噬C胆红素-清蛋白复合物(非结合胆红素)非结合胆红素↓↓↓葡萄糖醛酸胆红素(结合胆红素)血管肝C胆管
葡萄糖醛酸胆红素
胆素原←一一胆红素胆素→
粪
胆素原肾尿肠管
尿三胆【测定方法及评价】(1)Harrison法原理胆红素+氯化钡——胆氯素(绿色)评价:Harrison法-稍繁但灵敏度高(2)干化学试带法结合胆红素+二氯苯胺重氮盐红色复合物评价:操作快速、简便、具有半定量作用。【质量控制】【临床意义】标本要新鲜、避光防止胆红素造成假阴性Harrison法应保证尿中有足够的SO注意药物的干扰试带法结果可疑者,最好用Harrison加以验证肝细胞性黄疸阻塞性黄疸先天性高胆红素血症ˉ⒉⒋六、尿胆原定性检查【测定方法及评价】⑴改良Ehrlich法原理URO+对二甲氨基苯甲醛——樱红色⑵干化学法①原理同上②URO+重氮化合物→红色复合物评价:
A干化学法可半定量,不受胆红素的影响
B改良Ehrlich法操作简便但易受干扰【参考区间】
弱阳性;尿液1:20稀释阴性【质量控制】【临床意义】方法选择标本采集与送检假阳性尿的鉴别假阴性分析温度结果观察黄疸的鉴别反应肝细胞损伤的敏感指标长时间大剂量应用抗生素可抑制肠道菌群七、尿液血红蛋白定性检查【测定方法及评价】
⑴化学法原理Hb-亚铁血红素+——变色质控:评价:简单、特异性低、稳定性差⑵试带法原理、质控同上评价:①稳定性比⑴好`②灵敏度150~300μg/L邻联甲苯胺氨基比林防假(+)—尿含有铁/锌/碘化物/细菌产生过氧化物酶⑶金单克隆抗体法原理胶体金标记抗人Hb的单克隆抗体质控尿中Hb过高稀释免假(-)评价:灵敏度高、特异性强、操作快【临床意义】
⑴正常(-)⑵各种原因血管内溶血性疾病⑶因泌尿系统疾病引起的出血八、尿液亚硝酸盐定性检查【测定方法及评价】⑴干化学法
尿中具有硝酸盐还原酶的细菌增加时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与α-萘胺偶联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比。评价灵敏度为0.3~0.6mg/L,可用于仪器检测。⑵湿化学法原理同上评价方便/快速NIT阳性的三个条件:①感染的病原微生物的种类,②尿液滞留时间,③硝酸盐的存在。【质量控制】使用新鲜的晨尿.【临床意义】该指标可作为泌尿系统感染的的过筛试验,但NIT阴性不能排除感染。第四节尿液其他蛋白质的检查一、尿液本周蛋白定性检查1特点
本周蛋白:是免疫球蛋白分子的轻链,属于不完全抗体蛋白,在PH4.5~5.5条件下,加热至40~60℃(通常为56℃)时沉淀,继续加热至90~100℃沉淀溶解,而温度下降到56℃时恢复凝固,因此又称凝-溶蛋白。2测定方法及评价热沉淀法:特异性较高,但操作费时,敏感度低,目前已不常用。对甲苯磺酸沉淀法:操作简单,敏感度较热沉淀法高,但特异性差,因此仅作为本周蛋白的过筛试验。电泳法:灵敏度高,检出率可达97%,但会出现类似于“M”带,需进行免疫电泳加以鉴别。免疫电泳:简单易行、样品用量少、分辨率高。免疫固定电泳:用特异抗体鉴别区带电泳分离的蛋白,比区带电泳和免疫电泳更敏感。免疫速率散射浊度法:测试速度快、灵敏度高、精确度高、稳定性好,是目前免疫学分析中比较先进的方法。【参考区间】
阴性【质量控制】
(1)标本采集的要求收集新鲜尿液,最好晨尿,尿量不少于15ml,及时送检。(2)去除其他蛋白的干扰混浊尿标本不能用于热沉淀法检查,应离心取上清液,若为蛋白尿,应先用加热醋酸法沉淀普通蛋白质,趁热过滤。过滤要迅速,不要震荡。(3)严格要求PH
热沉淀法最适PH为4.5~5.5,低于PH4.0时,分子聚合受到抑制而致假阴性。
(4)对甲苯磺酸沉淀法如尿中出现其他球蛋白(大于5.0g/L)可出现假阳性。(5)电泳法如尿中本周蛋白含量低,则需先浓缩,为便于分析常需做患者及正常人血清蛋白电泳及浓缩电泳。(6)免疫电泳法是电泳技术与双向免疫扩散技术的组合,方法简单易行、样品用量少、分辨率高。需预测抗原与抗体的最适比;电泳条件可直接影响沉降线的分辨率;结果判断需积累一定的经验。要注意抗血清的有效期和加入的量。(7)药物影响在使用某些药物如利福平类抗结核药时,有的患者可出现本周蛋白尿。
5临床意义多发性骨髓瘤巨球蛋白血症原发性淀粉样变性其他疾病二、尿液肌红蛋白定性检查1概念肌红蛋白:是存在于横纹肌细胞中的一种色素蛋白质,每个肌红蛋白分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素组成,分子量1.745KD,约为HB分子量的1/4,有种属特异性,与氧可逆性结合,为肌肉组织供能。2MB的特性
(1)MB可自由透过肾小球形成肌红蛋白尿。(2)具有类过氧化物酶的活性。(3)能溶于80%硫酸铵溶液中,HB则不能,这是MB区别于HB的一个特性。3测定方法及评价
(1)化学法:此法检查方便,灵敏度也较高,临床上常作为过筛试验。尿液上清液隐血试验(2)分光光度法:利用HB与MB的氧化物在580~600nm处各自吸收光谱完全不同的特点,将二者区别开,但灵敏度不高。(3)单克隆抗体免疫法:有酶联免疫,放射免疫及免疫胶体金试带法,因其方便、快速、灵敏、特异,已成为测定MB的主要方法。80%硫酸铵沉淀HB4参考区间阴性5质量控制
(1)
标本处理
标本要新鲜
,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉淀,导致假阴性。(2)防止假阴性宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微震荡,防止局部浓度过高沉淀肌红蛋白引起假阴性。
6临床意义
(1)创伤挤压综合症、电击伤、烧伤、手术创伤等。外伤造成的肌肉组织损伤,尤其是发生挤压综合症时,可引起急性肾衰竭。(2)缺氧、缺血如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。(3)阵发性肌红蛋白尿见于剧烈运动如马拉松长跑后。(4)其他原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎综合症(多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等)、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。三、尿液清蛋白定量测定1概述
清蛋白(albumin,Alb)是血浆蛋白的主要成分,不容易滤过肾小球,主要由近曲肾小管重吸收。早期的肾小球病变,清蛋白排泄率即有所增加,该指标的早期变化能敏感地反映肾小球功能的损害。2测定方法及评价
常用的检测方法有免疫分析法和化学定量法(1)化学定量法主要是溴甲酚绿法,该法操作简单,试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线性范围窄,不利于检出微量清蛋白。(2)放免法和酶免疫法
有成品试剂盒。受实验室条件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免疫比浊法取代的趋势。可根据实验室条件选择应用。(3)免疫比浊法该法操作简便,敏感度及特异性也较高。有商品试剂盒,可在全自动生化仪上完成实验。此法应注意非特异性浊度及抗原抗体比例的控制。3参考值晨尿6.5±5.1mg/L
随机尿1.27±0.78mg/mmolCr24h尿5.7±2.6mg/24h4临床意义肾小球发生病变可使清蛋白滤过增加,肾小管受损影响蛋白质重吸收也会出现清蛋白排泄率升高。
(1)早期肾损害的筛检如用于糖尿病、高血压、重金属及药物中毒性肾病的早期肾损害的筛检。
(2)过敏性紫癜的肾功能监测有助于防止并发肾损害。
(3)肾小球肾炎的病情观察病变急性期UAE明显升高,在恢复期趋于正常,但疾病稍有活动该指标立即上升。
(4)其它如尿路感染、某些特发性水肿等可轻度升高。四、尿总蛋白定量测定1测定方法及评价(1)双缩脲法是测定尿蛋白质总量的常规参考方法,本法显色稳定、重复性好,对清蛋白、球蛋白具有相同的敏感性。缺点是灵敏度低。
(2)染料结合法这类方法灵敏度高、操作简便快速呈色稳定。考马斯亮蓝法邻苯三酚红钼酸络合法丽春红S法(干扰因素少)
(3)比浊法主要有磺基水杨酸-硫酸钠法(SSA)、三氯乙酸法(TCA)和钨酸法。
(4)免疫比浊法或放射免疫法是最精密准确的方法,不但可以进行蛋白总量的测定,还能进行成分分析。(线性范围窄,受水杨酸类药物和麝香草酚的干扰)(受表面活性剂的干扰)2参考值双缩脲法:40~150mg/24h尿丽春红S法:46.5~18.1mg/L
考马斯亮蓝法:58.6~134mg/24h尿3质量控制(1)方法选择尿蛋白成分很复杂,应根据蛋白成分特点,结合实验方法的灵敏度和线性范围选择测定方法,最好采用对清蛋白球蛋白同样敏感的方法。(2)标本要求应首先离心除去杂质,取上清液进行蛋白定性,根据估算量和方法的敏感及线性决定样本加入量(稀释或加大标本用量。)具体要求是:①双缩脲法:蛋白定性阴性时,无须进行定量;蛋白定性为1+~2+,标本用量为5ml;蛋白定性为3+~4+,标本用量1ml,以蒸馏水稀释5倍。②丽春红S法:蛋白定性阴性(含量0.1g/L),标本用量1.0ml,浓缩后测定;定性±~1+(<1g/L)标本用量100ul;定性2+(1~3g/L),尿液50ul,结果×2;定性3+~4+(3~10g/L),标本10ul,结果×10。
(3)尿液浓缩标本经酸沉淀处理后应除净上清液,谨防丢失蛋白沉淀物。(4)防腐剂气温较高时标本需冷藏或以适量甲苯,麝香草酚等防腐。
4临床意义同尿蛋白定性试验,优点是大大提高了肾脏疾病的阳性检出率。五、尿β2微球蛋白定量测定1概述
β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)是机体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小(11800KD),它是人类淋巴细胞表面抗原(HLA)的β链部分,由100个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于β2区带而命名,生物半衰期约107min。β2-MG广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。
2测定方法及评价
主要用免疫法测定。
(1)放射免疫法敏感度高、特异性强,但受到实验室条件限制,且污染环境,对工作人员造成辐射损伤。(2)酶联免疫法具有高度的灵敏度及特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体均可以检测,且不需昂贵仪器,测定方法简单,但受酶活性、温度、PH等影响。(3)免疫比浊法敏感度高、特异性强、稳定性好,操作简便、能直接定量,在普通分光光度计、紫外分光光度计及自动生化分析仪上均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。3参考区间
尿β2-MG<0.3mg/24h;β2-MG排泄率为<o.2mg/(g.Cr)4质量控制
(1)标本收集①收集随机尿检测时,应同时测定尿肌酐,以二者的比值代表β2-MG排泄率;②24小时尿标本做β2-MG定量测定。
(2)标本处理
尿中β2-MG较不稳定,酸性尿尤其在pH5.2以下极易分解,因此标本采集后应立即测定,或将pH调至6.5~7.0后再冷藏保存。
(3)其他
试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控样品。放射免疫法时,要注意防护。5临床意义
(1)肾小管疾病的早期诊断指标
肾小管炎症、中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,尿β2-MG排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾毒性药物后尿β2-MG增加,提示应减量或停药。(2)鉴别上、下尿路感染
肾盂肾炎时,肾小管受损β2-MG增加;下尿路感染则正常。(3)观察肾移植排斥反应
肾移植发生排斥反应时尿β2-MG增加。
六、尿液免疫球蛋白定量测定1概述
血浆中的免疫球蛋白有五大类:即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。它们的分子量为16~100kD,不易通过肾小球滤过,故正常情况下不出现在尿液中。肾脏疾病时,由于免疫复合物沉积或肾小球受到损伤,Ig可通过肾小球从尿中排出。尿中Ig有两个来源,一个是来自血浆中的Ig,另一个来源是尿路感染局部免疫反应产生的抗体。2测定方法及评价
(1)单向免疫扩散法在琼脂胶中加入一定量抗体,使待测的抗原溶液从局部向琼脂内自由扩散,在一定区域内形成可见的沉淀环。在一定范围内,Ig的含量与沉淀环的直径成正比。该法重复性和线性均好,但不够灵敏。
(2)免疫比浊法抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,反应液出现浊度。当保持反应液抗体过量时,形成的复合物随抗原增高而增高,反应液浊度也随着增高,其结果与一系列标准品对照,即可计算出受检物的含量。该法灵敏度高、特异性强,检测速度快、操作方便。3参考区间
成人晨尿:IgG(0.3±0.2)mg/L;IgA(0.7±0.3)mg/L;IgM(0.03±0.01)mg/L。4临床意义(1)诊断肾小球性蛋白尿尿液中出现大分子量的免疫球蛋白,提示为肾小球性蛋白尿的非选择性蛋白尿。
(2)评价肾小球的损害程度
尿IgM增高,提示肾小球滤过膜损害严重,尿蛋白失去选择性,对激素治疗不敏感,预后较差。(3)肾炎型肾病
尿IgM及IgG升高的阳性率高于单纯肾病。第五节尿液酶的检查尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶(NAG)尿液γ–谷氨酰基转移酶尿丙氨酸氨基肽酶(AAP)尿淀粉酶测定尿胰蛋白酶II(TR)一、尿N-乙酰-β-D氨基葡糖苷酶(NAG)概念:存在各种组织的溶酶体—水解酶分子量为14万、不能滤过肾小球基膜意义:①正常<18.5U/L②是肾小管损害最敏感的指标之一③可作为上下尿路感染的鉴别上—NAG↑下—NAG正常二、尿液γ–谷氨酰基转移酶【测定方法】(1)对硝基苯胺比色法(2)速率法(3)重氮反应比色法【参考区间】对硝基苯胺比色法:37℃4~42U/L或6~45U/gCr速率法:<30U/L或3~3.7U/mmolCr(<18~37U/gCr)【质量控制】【临床意义】1、标本要求2、仪器校准3、底物与试剂1、肝脏受损的早期诊断2、肾小球肾炎的疗效观察3、肾癌的标志物4、肾脏移植排斥反应观察指标
三、尿液丙氨酸氨基肽酶测定【测定方法】
速率法【参考区间】<1.8U/mmolCr(或<U/gCr)【临床意义】1、各种肾脏疾病诊断的辅助指标2、肾脏移植后排斥反应的观察3、肾毒性损害的早期发现
四、尿淀粉酶测定淀粉酶(AMY)的主要来源:主要来源于胰腺(为同工酶P)和唾液腺(为同工酶S),血清中AMY易从肾脏排出。【测定方法及评价】
(1)碘-淀粉比色法(Somoggi法)其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级反应。本法应尽量使用同一批号的淀粉底物;当A测定<1/2A空白时,应将标本加大稀释倍数后再测定。(2)2-氯-4硝基苯酚-α-麦芽糖三糖法(CNP-G3法)
线性:血清<1300U/L;尿液<2500U/L。氟化物、草酸盐、柠檬酸盐及EDTA盐等干扰本法的水解反应,应避免使用,最好使用血清。(3)对硝基麦芽七糖法(4NP-7G法)
线性(25℃时,2000U/L)及稳定性均较好。△A/min>0.15时,应将标本稀释后再测定。(4)免疫抑制法和电泳法
用于同工酶测定【参考区间】方法参考值(U/L)血清尿液Somoggi法(37℃)800~1800100~12004NP-7G法(37℃)100~220120~1200CNP-G3法(37℃)<600<300五、尿胰蛋白酶II(TR)【测定方法】
放免疫或连续监测法免疫层析法【参考区间】阴性【质量控制】1、尿样采集时间2、注意抗原抗体的比例3、结果判断【临床意义】急性胰腺炎、尿胰蛋白酶Ⅱ阳性,有助于快速诊断第六节尿液其他化学成分检查尿液葡萄糖定量测定乳糜尿定性检查尿液人绒毛膜促性腺激素检查尿液含铁血黄素定性检查尿液卟啉定性检查尿液苯丙酮酸定性检查尿液葡萄糖定量测定【测定方法及评价】己糖激酶法邻甲苯胺法葡萄糖氧化酶法【质量控制】收集24小时的尿液,因标本放置时间长,需加甲苯防腐。一般每升尿液中加甲苯5~20ml。留尿后立即测定,因尿易引起污染而使尿糖降低先用班氏法做定性试验,按测出的大概按量,用蒸馏水稀释尿液使葡萄糖含量在3g每升以下,再进行操作,计算结果剩以稀释倍数。【参考区间】<2.8mmol/
24h(<0.5g/24h)或0.1~0.8mmol每升。【临床意义】同定性试验。但定量测定有助于胰岛素依赖性糖尿病患者治疗过程的检测。二乳糜尿定性检查乳糜尿:尿液中混有淋巴液而成白色牛奶状得名。乳糜尿内含脂肪微粒.卵磷脂.胆固醇及少量纤维蛋白原和清蛋白等。如含有较多血液时,称为乳糜血尿。【测定方法及评价】乳糜尿用脂溶性有机溶剂萃取尿中的乳糜微粒或脂肪小滴后,再用脂溶性染料使之着色,显微镜下观察,出现橘红色较大的脂肪滴为定性阳性。本法简便易行,过小的脂滴不易在显微镜下观察,可利用尿液加乙醚后是否变清来判断,若变清为乳糜尿。【质量控制】1.乳糜尿与过多的盐类结晶及脓尿在外观上容易混淆。鉴别方法:盐类结晶尿加酸,加碱或加热溶解;脓尿常成颗粒样混浊,经离心上层液体清晰,底层为脓细胞;乳糜尿经离心后还不分层,管底沉淀可能有少数淋巴细胞,且加乙醚后澄清。2.定性检查阳性,应在显微镜下查找微丝蚴。【参考区间】阴性【临床意义】乳糜尿阳性常见于:1.累及淋巴循环的疾病:先天性淋巴管畸形.肿瘤压迫及肺结核等。2.丝虫病三、尿液人绒毛膜促性腺激素检查人绒毛膜促性腺激素(hCG)是妇女受精卵移行至子宫内着床后形成胚胎,由胚胎滋养层细胞分泌产生,具有促性腺发育的一种糖蛋白激素,由一条a链和一条链组成。hCG主要用于早期妊娠的诊断及滋养层细胞肿瘤的诊断及疗效观察。【测定方法】1.胶乳凝集抑制试验2.双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)3.单克隆抗体胶体金标记免疫层析法4.放射免疫5.电化学发光免疫分析(ECLIA)法【参考区间】非孕妇健康人:阴性正常妊娠:阳性【临床意义】1.早期妊娠诊断2.滋养层细胞肿瘤诊断及预告判断3.协助诊断异位及流产4.其他脑垂体疾病.甲亢.子宫内膜增生.宫颈癌等hCG也增高可出现阳性。尿液含铁血黄素定性检查尿含铁血黄素定性试验是一项用于检查尿液是否正常的辅助检查。尿液检查的一种。这是用于诊断血管内溶血的定性实验,主要用于判断阵发性睡眠性血红蛋白尿症。当尿中含有含铁血黄素时,其中高铁离子与亚铁氰化物作用,在酸性环境中产生蓝色的亚铁氰化铁沉淀称为普鲁士蓝反应。通过此项检查可以判断相应的病征。尿含铁血黄素定性试验检查过程1取混匀的新鲜尿液15ml(以2000r/min时间5分钟)离心,倾去上清液。2在沉渣中加入新鲜配制的2%亚铁氰化钾试剂及3%盐酸各2ml,充分混匀,室温静止10分钟。3再离心沉淀,取沉淀物涂片,加盖片后用高倍镜检查(必要时用油镜)。4如见有分散或成堆蓝色闪光颗粒(直径1~3μm)即为阳性,如在细胞内则为可信。【参考区间】本法的健康人群尿含铁血黄素定性试验为阴性。【注意事项】不合宜人群:一般无不适合人群。检查前禁忌:检查前一天晚上九点以后不要进食,可喝水,检查当天早上起床后不吃东西也不喝水,便于检查准确。【临床意义】
慢性血管内溶血,如阵发性睡眠性血红蛋白尿症可引起含铁血黄素尿,但在溶血初期,虽然有血红蛋白尿,由于血红蛋白尚未肾上皮细胞所吸收,未形成含铁血黄素排出,该试验可为阴性,而隐形试验可为阳性。但有时血红蛋白含量少,隐血试验可能为阴性,而本试验可能阳性。
五尿液卟啉定性检查.1.卟啉是构成血红蛋白、肌红蛋白、过氧化物酶、细胞色素等的重要成分,由4个吡咯环连接而成的环状化合物,是血红素生物合成的中间体。卟啉尿是指尿液中排出过多的卟啉,或卟啉的前身物如δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)及卟胆原(porphobilinogen,PBG)。正常人尿中含有少量的卟啉类化合物(ALA、PBG;粪卟啉coproporphyrin,CP)。2.正常人尿卟啉定性试验为阴性。病理情况下,如种独立的与血红素合成有关酶遗传性缺陷的疾病)引起卟啉代谢紊乱,导致其合成异常和卟啉及其卟啉前身物包括ALA、PBG;的排泄异常。异常代谢过程中产生的尿卟啉(uroporphyrin,UR)、粪卟啉由尿中大量排出;卟啉尿是一种症状,除了卟啉病外,还可见于其他多种疾病。方法1.取尿液5毫升加入有塞试管再加入试剂3毫升(试剂1份乙酸和4份乙酸乙酯混合而成),充分振荡,静置片刻,观察尿液与乙酸乙酯的分层情况。2.待尿液与乙酸乙酯分层后,吸取上层的抽取液,在紫外线下观察抽取液的荧光。3.判断结果:蓝色荧光(—),紫色荧光(+),粉红色荧光(++),红色荧光(+++)。【参考区间】阴性【临床意义】卟啉尿是一种症状,产生卟啉尿的疾病为卟啉病,是一类先天性或获得性卟啉代谢混乱的疾病。该病时卟啉代谢产物尿卟啉.粪卟啉.卟胆原等大量由尿.粪中排出.故尿中卟啉定性检查多为阳性.获得性多见于肝炎.肝硬化.化学药物和慢性铅中毒引起。六尿液丙酮酸定性检查尿苯丙酮酸定性-1检验目的1.苯丙酮酸是苯丙氨酸代谢产物。当肝脏缺乏苯丙氨酸羟化酶时,苯丙氨酸不能氧化成酪氨酸,苯丙氨酸积累,少部分由尿排出,大部分转变为苯丙酮酸,由尿排出。因此检测尿苯丙酮酸对苯丙酮酸尿症诊断提供依据。尿苯丙酮酸定性-2检测原理尿中的苯丙酮酸在酸性条件下与三氯化铁作用,生成铁离子与苯丙酮酸烯醇基的蓝绿色螯合物。尿苯丙酮酸定性-3标本1收集患者清晨10ml随机尿液。2标本采集后应立即送到临床检验科体液检验室。3样品在收集过程中应放在阴凉处保存。不能及时测定的标本应于2℃~8℃冰箱保存。
尿苯丙酮酸定性-4试剂1三氯化铁溶液:称取三氯化铁(FeCl3.6H2O)10g,加水至100ml。2磷酸盐沉淀剂:称取氯化镁(MgCl2.6H2O)2.20g,氯化铵(NH4Cl)1.40g,浓氨液2ml,加水至1000ml。尿苯丙酮酸定性-5操作步骤1尿液4ml加磷酸盐沉淀剂1ml,混匀,静置3分钟,如出现沉淀,可用滤纸过滤或离心除去。2滤液中加入浓盐酸2~3滴和三氯化铁溶液2~3滴,每加1滴立即观察颜色变化。3结果观察:如尿液显蓝绿色并持续2~4分钟即为阳性。如绿色很快消失,提示可能有尿黑酸,可报告苯丙酮酸定性试验阴性。尿苯丙酮酸定性-6质量控制试验操作过程中,每次应做一次正常对照。【参考区间】阴性【临床意义】1.正常人为阴性2.大多数苯丙酮酸尿症患者为阳性,但有1/4~1/2病例可能漏检,故于6周后检查为宜。第七节尿液干化学分析仪及临床应用一、尿液干化学分析仪的类型按测试项目分类8项尿液分析仪9项尿液分析仪10项尿液分析仪11项尿液分析仪一、8项尿液分析仪检测项目:尿蛋白、尿糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血二、9项尿液分析仪检测项目:尿蛋白、尿糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白细胞。
三、10项尿液分析仪检测项目检测项目:蛋白、糖、ph、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞四、11项尿液分析仪检测项目:蛋白、糖、ph、酮体、胆红素、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、比密、尿隐血、维生素c按自动化分类半自动尿液分析仪检测项目包括8项9项10项11项12项全自动尿液分析仪检测项目包括10项11项12项二、尿干化学分析试带组成及反应原理尿液尿干化学分析多联干化试带的组成1、第一层为尼龙莫2、第二层绒制层3、第三层吸水层4、第四层支持层尿液干化学试带测试项目的原理蛋白质(PRO):PH指示剂蛋白误差原理。干化学试纸中含有溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统及表面活性剂,其中溴酚蓝的PH阈为3.0-4.6,在PH3.2时会产生阴离子,与带阳离子的蛋白质结合后产生颜色反应,本试剂只适合于白蛋白的检测,球蛋白浓度高时呈弱阳性。隐血(BLD)血红蛋白中含有血红素基团,具有过氧化物酶活性,可使试带中的过氧化物(如过氧化氢茴香素)放出新生氧,将邻联甲苯胺受体氧化成蓝色化合物。本试带不能区分血红蛋白和肌红蛋白,与血红蛋白起反应时呈均匀的绿-蓝色;与红细胞起反应时呈斑点状绿-蓝色。葡萄糖(GLU)葡萄糖氧化酶法。试纸中含有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、缓冲剂及显色原。尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下,天生葡萄糖酸内酯和过氧化氢,后者在过氧化物酶的催化下使色素原(如邻联甲苯胺、碘化钾等)氧化而呈色。酮体(KET)尿酮体包括乙酰乙酸、丙酮和β-羟丁酸。含酮体的尿液中加亚硝基铁氰化钠后,与氨液接触时出现紫红色环。白细胞(LEU)粒细胞中存在酯酶,能作用于试纸中的吲哚酚酯(特异性酯酶底物),使后者开释出吲哚酚,吲哚酚又与重氮盐发生反应形成紫色络合物,根据显色深浅换算白细胞数。本实验只能检测出粒细胞,而不能检测淋巴细胞。比重(SG)试纸中含有高分子电解质甲乙烯酸/马来酸及指示剂麝香草酚蓝等,高分子电解质的COONˉ基与尿中的电解质发生反应时开释出H+,后着使指示剂变色。胆红素(BIL)重氮反应原理。试纸中含有2,4,2-三氯苯胺重氮盐,在强酸介质中葡萄糖醛酸胆红素与2,4,2-三氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色。尿胆原(UBG):重氮反应原理。
PH值:试纸中含有指示剂,一般为两种酸碱指示剂如甲基红(PH为4.6-6.2)和溴香草酚蓝(PH为6.7-7.5)适当配合。变色范围一般为4.5-9.0,由橙红色→蓝色。
抗坏血酸(VitC):吲哚酚法。尿中含高浓度的抗坏血酸,可使试带的葡萄糖、隐血试验呈假阴性,因此有的干化学试带上含有抗坏血酸,以便对尿液分析结果作正确判定。
亚硝酸盐(NIT):Griess实验原理。试纸中含有对氨基苯胂酸,被亚硝酸盐重氮化而成重氮盐,后者与1,2,3,4-四氢苯并喹啉-3酚偶联产生粉红色。当尿液中含有硝酸盐还原阳性菌(如大肠埃希氏菌)存在并繁殖时,呈阳性反应。而球菌、真菌或支原体感染时呈阴性反应。三、尿液干化分析仪的主要部件与工作原理(一)机械系统:全自动尿液分析仪
半自动尿液分析仪(二)光学系统:滤光片分光系统
发光二极管系统CCD系统(三)电路系统四、尿液干化学分析仪的安装、保养与使用(一)仪器的安装(二)仪器的鉴定(三)仪器的日常的维护与保养(四)仪器的使用(—)仪器的安装1、实验室环境要求清洁、通风、温湿度适宜2、实验台要求台面稳定、水平,最好选用水泥试验台3、实验空间空间大小适宜、便于操作4、用电安全保证仪器接地良好,电源电压稳定(二)仪器的鉴定:新仪器安装后或每次大维修之后,必须对仪器的技术性能进行测试、评价、这对保证检验质量起着重要作用1、首先将仪器调整在最佳工作状态2、评价仪器及干化学试带的准确度3、用传统的方法与尿液分析仪测定做对比分析4了解仪器对每项检测指标的测试范围(三)仪器的日常维护与保养1、尿液分析仪日常维护2、尿液干化学分析仪的保养每日保养:每日工作完毕,应用清水或无腐蚀性的中性清洗剂清洗每周保养或每月保养:各类尿液分析仪的每周或每月保养,根据仪器的具体情况而定(四)仪器的使用1、保持仪器洁净2、标本要新鲜测定并注意混匀3、使用配套的合格试带并妥善保管4、保证干化学反应区有足够的尿量5、检测温度要适宜6、正确解释检验结果.第八节尿液有形成分检查
概念:尿液有形成分检查是利用显微镜或尿液有形成分分析仪对尿液中细胞、管型、结晶、细菌等有形成分的识别及计数,结合尿液理学或化学检查的结果,用于泌尿系统的
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