阴道毛滴虫 本科-2012年修订 (2)课件

河北北方学院张进顺杜氏利什曼原虫

Leishmaniadonovani肉足鞭毛门（Phylumsarcomastigophora）动鞭纲（ClassZoomastigophora）动基体目（OrderKinetoplastida）锥体科（FamilyTrypanosomatidae）眼虫门（PhylumEuglenozoa）动基体纲（ClassKinetoplastea）锥体目（OrderTrypanosomatida）锥体科（FamilyTrypanosomatidae）分类简史In1900,WilliamLeishmandiscoveredLeishmaniadonovaniinspleensmearsofasoldierwhodiedfromafevercontractedatDum-Dum,India,knownasDum-DumfeverorkaJa-azar.Hisobservationswerepublishedin1903,inwhichyearCharlesDonovanfoundthesameparasiteinsmearsmadefromsplenicpuncturebiopsy.NicolleandCompte(1908)foundtheparasiteindogsinTunis.ThetransmissionofL.donovanibythesandflyPhlebotomusargentipeswasdemonstratedbytheIndianKala-azarCommission（l931-1934).MorerecentlyithasbeenproposedthattheagentoftheMediterraneanvisceralleishmaniasisofchildrenbeassignedadistinctspecies,L.infanlum(Adler,1964;Hommel,1978).黑热病是我国五大寄生虫病之一。生活史有前鞭毛体和无鞭毛体两期。前者寄生于节肢动物（白蛉）的消化道内，后者寄生于脊椎动物的单核吞噬细胞内，通过白蛉传播。利什曼原虫引起人与动物的利什曼病，是一种人兽共患寄生虫病。利什曼病及病原种类内脏利什曼病：杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)引起；在印度，患者皮肤上常有暗的色素沉着，并有发热，故称Kala-azar，即黑热病。粘膜皮肤利什曼病：巴西利什曼原虫（L.braziliensis）引起。皮肤利什曼病：热带利什曼原虫(L.tropica)和墨西哥利什曼原虫(L.mexicana)、硕大利什曼原虫（L.major）、秘鲁利什曼原虫（L.peruviana）、埃塞俄比亚利什曼原虫（L.aethiopica）引起。我国黑热病是由杜氏利什曼原虫引起。但因其动基体DNA微环有不同属、种、亚种甚至株的差异，故认为是一个复杂的种团（complex）,包括杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)、婴儿利什曼原虫（L.infantum）、恰氏利什曼原虫（L.chagasi）。骨髓液涂片Giemsastain(姬母萨染色）细胞质呈淡蓝色，核呈红色或紫红色，动基体紫红色AMacrophageFilledWithLeishmaniaamastigotes2.（前）鞭毛体（Promastigote）虫体呈梭形大小为10～20µm×1.5～4µm核位于虫体中部动基体在前部基体发出一鞭毛，长与虫体相近，弯曲培养基内常以虫体前端聚集成团，排列成菊花状。细胞质呈蓝色，核呈紫红色前鞭毛体运动活泼，鞭毛不停地摆动二、生活史(Lifecycle)寄生部位与致病虫期：无鞭毛体（利杜体）寄生于肝、脾、骨髓和淋巴结等（巨噬细胞内）传播媒介：白蛉感染阶段：前鞭毛体，寄生于白蛉消化道内感染方式：雌性白蛉吸血，鞭毛体随唾液注入人体寄生部位:肝、脾、骨髓和淋巴结等（巨噬细胞内）传播媒介:白蛉感染阶段:前鞭毛体感染方式:经皮生活史要点三、致病（pathogenesis）（一）内脏利什曼病潜伏期(incubationperiod)：3～8个月或更长(4～10个月).发热(fever):为最早主要症状,占90～99.9%。热型不规则。脾肿大（splenomegaly）:92.7%～100%。初次发热半月后即可触及，2-3月，达肋缘和脐水平，半年后超过脐部甚至达耻骨联合上缘。早期柔软，晚期变硬。原因：Mφ增生、浆细胞增多；细胞增多、血流受阻致充血性脾肿大；晚期网状纤维和结缔组织增生，质地变硬。肝肿大（hepatomegaly）:我国占39-64.8%，较脾大出现晚，不超过1-4cm.示脾肿大黑热病俗称“大肚子病”

12岁男孩脾肿大贫血严重消瘦5.贫血（anemia

）：全血（红细胞、白细胞及血小板）减少。原因：脾功能亢进；免疫溶血，利什曼原虫代谢物抗原中有1-2种与红细胞抗原相同，或红细胞表面附有利什曼原虫抗原。可引起鼻衄、齿龈出血、皮下出血等。

WBC减少：可致继发感染如坏死性口腔炎（走马苷）、黏膜溃疡、肺炎等；可呈急性粒细胞缺乏。6.免疫机能异常：

免疫无反应（anergy）状态：易致感染性疾病如伤寒等；变态反应：免疫复合物沉积，肾小球淀粉样变性。可致蛋白尿、血尿。7.白/球蛋白比例倒置：浆细胞增生导致血浆内白蛋白量减少，球蛋白量增加。患者经特效药物治疗后，痊愈率较高，可获终生免疫.（二）皮肤型黑热病国内统计约有100余例。可与内脏病变同时存在（58%）；在内脏病变消失多年以后（32.3%），称黑热病后皮肤利什曼疹（post-kala-azardermalleishmanoid）；少数患者（9.7%）为原发病人。多数为结节型，结节呈大小不等的肉芽肿，或呈暗色丘疹状，常见于面部及颈部，在结节内可查到无鞭毛体。Cutaneousleishmaniasisoftheface.(byDermatologyInternetService,DepartmentofDermatology,UniversityofErlangen.)CutaneousleishmaniasisMucocutaneousleishmaniasis（三）淋巴结型黑热病无黑热病病史，局部淋巴结肿大，大小不一，较表浅，无压痛，无红肿，Eos增高为特征之一。淋巴结活检在类上皮细胞内可见许多无鞭毛体。活检可查到无鞭毛体。近年报告内蒙荒漠地带移民中发生44例。新疆、内蒙都证实有自然疫源地存在。少数地区疫情有回升，如甘肃文县、四川南坪，不但病人数增多，病犬感染率也高达15%（余森海，1987）。四、免疫细胞免疫：巨噬细胞、Th1细胞（IL-2、IFN-γ）使感染消退；特异性免疫抑制：使患者易发其他感染消除性免疫：硕大利什曼原虫非消除性免疫：杜氏利什曼原虫，但治愈后一般不再发。五、诊断(Diagnosis)（一）病原检查1.穿刺检查：⑴涂片法：

骨髓穿刺：最为常用，检出率80％～90％；淋巴结穿刺：检出率46％～87％，主要用于考核疗效。脾穿刺：检出率90.6％～99.3％，不安全，少用。（2）培养法穿刺物接种于NNN培养基，置22～25℃培养1周，或用Schneider培基，3天查前鞭毛体。（3）动物接种法穿刺物接种于易感动物（如地鼠、BALB／c小鼠等），1～2个月后取肝、脾作印片或涂片，瑞氏染液染色，镜检。2.皮肤活组织检查或淋巴结活检(二)免疫诊断法1.查抗体：皮内实验、ELISA、IHA、IFA、IF等。因抗体可终身阳性，多用于流行病学调查。2.查循环抗原：单抗-抗原斑点实验（McAb-AST）、IFA、ELISA等。（三）分子生物学方法

1.PCR：用利什曼原虫动基体k-DNA微环序列设计引物，阳性率95.5%。RT-PCR更敏感。2.DNA探针3.Dip-stick试纸条：重组抗原rk39制备，与骨穿符合率100%。六、流行(Epidermiology)(一)分布呈世界性分布，亚、欧、非、拉丁美洲均有本病流行。主要在热带和亚热带地区，特别是印度及地中海沿岸国家，在东非正在扩散。世界上利什曼病在1200万以上，每年皮肤利什曼病的新发病例100多万，内脏利什曼病50万。在我国，黑热病流行于长江以北的广大农村中，包括山东、河北、天津、河南、江苏、安徽、陕西、甘肃、新疆、宁夏、青海、四川、山西、湖北、辽宁、内蒙古及北京等17个省、市、自治区。建国后，防治工作取得了显著成绩。我国黑热病，1958～1960年先后达到了基本消灭的要求。近年来主要在甘肃、四川、陕西、山西、新疆和内蒙古等地每年有病例发生，病人集中于陇南和川北。每年新发病人数约100人。新疆、内蒙古都证实有黑热病的自然疫源地存在。近来，对我国利什曼原虫分离株的分子核型、基因组DNA基因型分析表明，我国利什曼原虫虫种复杂。新疆克拉玛依亦有皮肤利什曼病报告，病原体为婴儿利什曼原虫（L.infantum,LI）或者叫杜氏利什曼原虫婴儿亚种（L.donovani,infantum），硕大白蛉吴氏亚种为其媒介。(二)流行环节(1)传染源：病人、病犬、某些野生动物。(2)传播途径：白蛉叮刺传播，偶可经口腔粘膜、破损皮肤、胎盘或输血传播。我国，传播媒介有四种白蛉：①中华白蛉(Phlebotomuschinesis)：为我国主要媒介，分布很广，除新疆、甘肃西南和内蒙古的额济纳旗外均有存在；②长管白蛉(P.longiductus)：仅见于新疆；③吴氏白蛉(P.Wui)：为西北荒漠内最常见的蛉种，野生野栖；④亚历山大白蛉(P.alexandri)：分布于甘肃和新疆吐鲁番的荒漠。(3)易感人群：普遍易感，但易感性随年龄增长而降低。病后免疫力持久。（三）流行病学类型分为人源型、犬源型和自然疫源型，分别以印度、地中海和亚细亚荒漠内的黑热病为典型代表。1.人源型多见于平原，分布在黄淮地区的苏北、皖北、鲁南、豫东以及冀南、鄂北、陕西关中和新疆南部的喀什等地。主要是人的疾病，可发生皮肤型黑热病，犬类很少感染，病人为主要传染源，常出现大的流行。年龄较大的儿童和青壮年占多数，婴儿极少感染，成人比较多见。传播媒介为家栖型中华白蛉和新疆的长管白蛉。2.犬源型多见于西北、华北和东北的丘陵山区，分布在甘肃、青海、宁夏、川北、陕北、冀东北、辽宁和北京市郊县。主要是犬的疾病，人的感染大多来自病犬，病人散在，一般不会形成大的流行。患者多数是10岁以下的儿童，婴儿发病率较高；成人很少感染。传播媒介为近野栖或野栖型中华白蛉。3.自然疫源型分布在新疆和内蒙古的某些荒漠地区，亦称荒漠型。主要是某些野生动物的疾病。当人进入这些地区可发生黑热病。患者几乎全是幼儿。外地成人如受感染，可发生淋巴结型黑热病。传播媒介为野栖蛉种，主要是吴氏白蛉，亚历山大白蛉次之。有些地区，还可见到上述各种类型的中间过渡型。在西北犬源型黑热病流行的山丘地区，很可能同时存在自然疫源型，犬的感染可来自某些野生动物中的保虫宿主。七防治(Preventionandtreatment)1.预防(1)控制家犬捕杀病犬。(2)灭蛉、防蛉杀虫剂室内和畜舍滞留喷洒，涂驱避剂。加强个人防护。2.治疗(1)注射低毒高效的葡萄糖酸锑钠（斯锑黑克），疗效可达97.4％。(2)抗锑病人采用戊脘脒(pentamidine)、二脒替（stilbamidine）

。(3)经多种药物治疗无效而脾高度肿大且有脾功能亢进者，可考虑脾切除。3.预后治疗不及时常因并发症死亡，治愈后可获得终生免疫力，一般不会再感染。病例

患者男性，24岁，因反复高热、寒战半年就医。体检：浅表淋巴结未触及，皮肤及黏膜未见黄染及出血