乙肝定量检测试剂临床意义

乙肝定量检测试剂临床意义第一页，共二十八页。目录一、背景知识二、乙肝感染的自然史三、抗病毒药物治疗四、HBsAg五、Anti-HBs六、HBeAg和Anti-HBe七、Anti-HBc八、临床乙肝标志物组合模式第二页，共二十八页。时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）

乙肝试剂临床意义第三页，共二十八页。一、背景知识HBV感染可引起肝脏炎症和纤维化，严重者可发展为肝硬化甚至肝癌，已经成为严重的社会和公共卫生问题。HBV感染呈世界性流行，不同地区HBV感染的流行强度不同，全世界共约3.5亿人感染HBV，每年死于HBV感染所致的终末期肝病和肝癌的人数超过100万。我国HBV感染率较高，1-59岁人群HBsAg携带率为7.18%，1-4岁人群HBsAg携带率为0.96%，与以前流行病学调查结果相比，HBsAg携带率大幅下降。第四页，共二十八页。二、乙肝的感染自然史1、免疫耐受期：血清HBsAg和HBeAg阳性、HBV复制活跃、血清ALT正常、肝组织学无或轻微炎症、无肝纤维化或进展缓慢。围产期和婴幼儿时期感染者的免疫耐受期会持续多年，病情无明显进展，自发的HBsAg清除率低。2、免疫清除期：HBeAg阳性、HBVDNA水平降低、ALT水平反复波动、肝组织学有炎症坏死、纤维化进展程度较快。大部分HBV感染者都会由免疫耐受期进展为免疫清除期，这一时期自发的HBsAg清除率增加。3、非活动期：HBeAg消失、出现抗HBe、HBVDNA水平很低或检测不到、ALT正常、肝脏炎症减轻。此期患者发展为肝硬化和肝癌的风险较低。4、恢复期：非活动期HBV感染者中，HBsAg清除者临床预后一般较HBsAg持续阳性者好，肝脏炎症和纤维化不断改善。第五页，共二十八页。第六页，共二十八页。三、慢性乙肝抗病毒治疗（一）抗病毒治疗与乙肝标志物检测关系抗病毒药物治疗的出现，使得乙肝标志物的检测试剂市场需求增加了很多，尤其是对于定量试剂的需求。时间分辨试剂主要就是针对乙肝抗病毒药物治疗应用。1.治疗前评估2.治疗终点的确定：理想的、满意的、基本的终点3.治疗方案4.应答预测5.治疗监测第七页，共二十八页。（二）慢性乙型肝炎抗病毒治疗目标最大限度地长期抑制或消除HBV，减轻肝细胞炎症、坏死及肝纤维化，延缓和阻止疾病进展，减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、肝癌及其并发症的发生，从而改善生活质量并延长生存时间。第八页，共二十八页。（三）慢性乙型肝炎抗病毒治疗的药物目前，已有NUCs及IFNα

两大类药物用于慢性乙型肝炎（CHB）治疗。NCUs类（核苷（酸）类似物）：我国已批准拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦及替比夫定用于CHB治疗。IFNα（α干扰素）：可分为普通IFNα及Peg-IFNα。第九页，共二十八页。目前已获得普遍认可的定量检测临床意义治疗24周时HBeAg水平下降可以预测HBeAg血清学转换。HBsAg定量在预测获得持续病毒学应答和HBsAg消失的作用有待进一步研究证实。越来越多的研究提示早期病毒学应答情况是预测耐药发生率的重要指标，从而提出治疗路线图的概念。治疗中的监测：治疗期间应至少每3个月检测1次ALT、HBsAg和（或）HBVDNA；HBsAg和HBeAg定量检测的临床意义及价值有待进一步探讨。如发生HBeAg血清学转换，须接受长期随访，因为有发生HBeAg血清学转换逆转或转为HBeAg阴性CHB的可能。——慢性乙型肝炎抗病毒治疗专家共识第十页，共二十八页。四、HBsAgHBsAgHBsAg在HBV感染早期出现于病人血循环中，可持续数月，数年乃至终身，是诊断HBV感染最常用的指标。HBsAg定量有助于观察病毒复制状况和病变发展。HBsAg浓度与HBVDNA存在着相关性。高浓度的HBsAg常表示病毒的高复制水平，低浓度的HBsAg可能提示处于感染恢复期或反映病毒低复制或不复制。在抗病毒治疗中定量检测HBsAg有助于判定疗效。第十一页，共二十八页。五、Anti-HBsAnti-HBs为HBV的中和抗体，有清除HBV，防止再感染的作用。接种乙型肝炎疫苗已经成为目前国际国内预防乙型肝炎病毒的共识。血清血标记物抗-HBs是个体对乙型肝炎具有免疫力的指示。定量检测乙型肝炎病毒抗-HBs的含量可对接种疫苗的效果进行评估，用于判定是否需要加强免疫，还可以评估普通人群免疫力。抗-HBs定量检测指示预防免疫接种的效果：如个体经接种后定量检测抗-HBs，抗-HBs≥10mIU/ml，那么表明个体已获得对乙型肝炎的免疫力；抗-HBs＜10mIU/ml，表明个体还需注意日常防护与继续接种。第十二页，共二十八页。六、HBeAg和Anti-HBeHBeAg和抗HBe定量检测在抗病毒治疗中的重要意义主要体现在以下几个方面：①抗病毒治疗起点的选择：2005年的《慢性乙型肝炎防治指南》中明确指出：治疗前应检查病毒学标志:包括HBsAg、HBeAg、抗-HBe和HBVDNA的基线状态或水平。广州南方医院的临床资料和国际上的资料还显示，HBeAg定量对确定HBeAg阳性慢性乙肝患者的抗病毒起点（是否需要抗病毒治疗）具有重要性。如果患者ALT>2ULN，应每个月检查ALT和HBeAg，若HBeAg明显下降，可能为自然转化，不需抗病毒治疗；若两者持续升高，则应开始抗病毒治疗。第十三页，共二十八页。②抗病毒治疗终点的选择：《指南》同样明确指出：抗病毒治疗的三大治疗终点之一就是：HBeAg/抗HBe血清学转化。定量检测HBeAg和抗HBe可以比较清楚地掌握这种变化的出现及其趋势，有利于治疗终点的确认和治疗对象的选择。第十四页，共二十八页。③疗程的确认和个体化治疗方案调整：鉴于抗病毒治疗费用相对昂贵（国内目前每1疗程约花费3万元），而且对于那些未到治疗终点提前结束治疗的患者，常常出现病情的“反弹”和再治疗效果不确定性的情况，制定治疗方案和疗程确定十分重要。专家们认为对于治疗后已出现应答的患者，适当延长维持治疗时间有助于提高持续应答率、减少复发概率。对于部分应答患者，继续治疗或延长疗程有助于提高HBeAg血清转换率。第十五页，共二十八页。④治疗过程中的监测和预测：慢性乙型肝炎抗病毒治疗过程中的监测和随访是临床实践中的重要问题。疗效监测指标应包括ALT、HBVDNA或HBeAg，应特别关注动态变化。研究表明，有治疗应答的患者一般先出现HBVDNA的下降，或HBeAg定量水平的下降。因此，HBVDNA和HBeAg定量是疗效监测中的重要指标。治疗24周时HBeAg水平下降可以预测HBeAg血清学转换。因为有发生HBeAg血清学转换逆转的可能，即由Anti-HBe阳性变为阴性。因而定量检测Anti-HBe以监测其变化趋势，也有其临床价值。第十六页，共二十八页。综上所述，慢性乙肝抗病毒治疗前、治疗中和治疗后随访都需要检测病毒学指标，包括HBeAg和抗Hbe定量检测。有了这些资料，就可以清楚患者的基线情况，掌握患者抗病毒治疗过程中的变化，在随访中它有助于了解是否出现持续应答，或者复发及其趋势，有利于深入研究抗病毒治疗应答的各种规律，以便制定有效经济的个体化抗病毒治疗方案。也即HBeAg和抗HBe定量检测在慢性乙肝抗病毒治疗中具有重要的科学意义及经济价值。目前临床广泛使用的是半定量检测试剂（如ABBOTTLaboraties的微粒子酶免分析法(MEIA)和Roche的化学发光法等产品）尚缺少免疫学定量检测试剂，被批准的只有意大利

的乙型肝炎病毒e抗原定量检测试剂盒（化学发光法）。第十七页，共二十八页。七、Anti-HBc抗-HBc是HBV感染后首先出现的标志抗体，是流行病学调查的标志。HBcAg较HBsAg有更强的免疫原性，因而抗-HBc较抗-HBs产生早得多、有高得多的血清水平、长久得多的时间。在急性期几乎在所有感染个例都可检出抗-HBc，有时是唯一的血清标记物。无论肝病是否存在或病毒是否已清除，抗-HBc可持续存在数十年。国外一些地区以抗-HBc筛检HBV感染供血，认为是最灵敏的血清学试验。研究表明HBV感染者抗-HBc阳性率在95%以上。第十八页，共二十八页。抗-HBc在乙型肝炎病毒感染发病早期即能在血液中检测出，而且持续时间长，因此检测乙肝抗-HBc对疾病的诊断及治疗具有重要意义。对筛选供血血源、阻断乙型肝炎的传播具有重要的参考价值。乙型肝炎核心抗体分为抗-HBc-IgG和抗-HBc-IgM，前者低滴度时作为既往感染的指标，用于乙型肝炎流行病学的调查，高滴度时作为乙型肝炎病毒感染的指标；后者出现于新感染早期，是乙型肝炎早期诊断的指标，同时也是乙型肝炎急性感染和复制活跃的指标。第十九页，共二十八页。HBV复制时，HBcAg表达于肝细胞内，血清中检测不到游离的HBcAg，但其特异性抗体即抗-HBc可阳性，间接反映HBV复制，是反映肝细胞受到HBV侵害的一种指标。抗-HBc出现于急性乙型肝炎的急性期，恢复后可持续数年或更长，滴度则逐渐下降。抗-HBc在慢性活动性乙型肝炎炎症期时也往往呈阳性反应，其出现较早，在HBV感染的窗口期，抗-HBc-IgM是唯一能检出的特异性HBV指标，在临床上，对窗口期的急性乙型肝炎病毒感染者，尤其需要进行抗-HBc-IgM检测，以提高乙型肝炎的检出率。第二十页，共二十八页。八、临床组合模式第二十一页，共二十八页。模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc临床意义1+-+-+俗称“大三阳”。急性或慢性乙肝；病毒在复制，传染性强。2+--++俗称“小三阳”。急性或慢性乙肝；传染性低。这种模式在慢性无症状携带者以及急性感染人群中较常见，病毒复制可能仍在进行。3+---+急性或慢性乙肝感染，有传染性4---++既往感染5----+处于HBsAg和HBeAg消失与Anti-HBe和Anti-HBs出现之间的一个缺口时期；既往感染6-+--+感染恢复期；既往感染，有免疫力7-+-++感染恢复期；既往感染8-+---主动免疫9-----未感染HBV,属易感者第二十二页，共二十八页。10++-++少见的模式11+----12+-+--13-++-+14+-+++模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc临床意义第二十三页，共二十八页。乙肝五项少见模式分析单一HBsAg：

主要见于急性HBV感染的最早期，一般随之出现HBeAg和IgM的Anti-HBc。通常的慢性HBV感染中，HBsAg和Anti-HBc并存者约占95%，HBV慢性感染中不出现Anti-HBc是少见的。单一的HBsAg的异常表现主要由于Anti-HBc的缺失。第二十四页，共二十八页。HBsAg和Anti-HBs并存：在HBV感染恢复期中约有3%的个例可同时检出HBsAg和Anti-HBs,然后HBsAg消失而Anti-HBs水平逐渐升高。在慢性HBV感染者中约3%-5%两者共存，出现Anti-HBs并不表明HBsAg的清除和感染的恢复，可能由于：1.前后感染两种亚型HBV，或HBsAg与其抗体之间仅有低亲和性反应；2.S基因变异，其编码的HBsAg抗原性改变，原型Anti-HBs不能将其清除；3.α干扰素治疗中出现Anti-HBs血清转换，也因S基因的变异，而未能清除HBsAg。4.HBV疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的Anti-HBs应答，但仍能感染α决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与HBsAg共存的现象。第二十五页，共二十八页。HBeAg和Anti-HBe并存：一般是处于乙肝e抗原和e抗体转换时期，e抗原和e抗体以抗原抗体复合物的状态共存。Anti-HBe试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物同样可以结合至包被板上，起到了竞争效果。因而血样中存在游离eAg和抗原抗体复合物时，可以检为eAg、Anti-HBe同时阳性。第二十六页，共二十八页。Anti-HBc阴性：HBcAg是HBV的免疫原性最强的抗原，HBV感染后Anti-HBc常有较高的滴度和较长的持续时间，但是，HBV感染可以不出现或迟出现Anti-HBc。Anti-HBc缺失存在较大的种族间差异，也可能由于宿主的选择性免疫应答不全，一些免疫缺陷的病人缺乏Anti-