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文档简介

艾滋病常见的几种筛查试验的探讨实验室检测是作为是否感染艾滋病的最重要的依据,所以艾滋病的检测,在疾病的判断治疗中,显得尤为重要,而艾滋病的检测方法,分为很多种,下面就各种艾滋病筛查的检测方法适用范围及特点,和大家一起探讨一下。一、检测的样本HIV感染的常用检测标志物为:抗体HIV-1/2,抗原P24以及HIV的RNA。艾滋病检测最常用的样品有血液,包括血清、血浆和全血以及滤纸干血斑,唾液或尿液有时也可作为测试样品。不同的标志物,在体内产生的时间不同,所以要选用合适的标志物,以便准确确定感染的情况。二、检测方法艾滋病的检测分为筛查试验和补充试验。筛查试验包括酶联免疫吸附试验(ELISA),化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA),快速检测(RT)及其它试验,补充试验包括确诊试验及核酸试验,在2015年《全国艾滋病检测技术规范》中,将核酸试验也纳入到后期的补充试验中,以对筛查阳性的样品进行进一步的检测,其中确证试验主要包括免疫印迹试验(WB),条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)。核酸试验包括核酸定性和核酸定量试验。1、酶联免疫试验(ELISA)ELISA有几种类型,主要为双抗原夹心法测抗体,双抗体夹心法测抗原,间接法测抗体,竞争法、捕获包被法。试验可使用血液(包含血清、血浆和滤纸干血斑)、尿液样品,多为HIV抗体检测试剂,HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体,HIV抗原/抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶标记的HIV抗原/抗体,加底物显色,用酶标仪测定结果。2、化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)试验采用发光或荧光底物,可使用血液(包含血清和血浆)、尿液样品,既可检测抗体,也可联合检测抗原抗体。HIV抗原/抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原/抗体,加发光或荧光底物,用发光或荧光仪测定结果。3、快速检测(RT)快速检测作为一种方便的方法,现在越来越多的应用于实际工作及个人的自测中,这种试验操作简便快速,适用于应急检测、门诊、急诊检测、VCT及检测点等,有着不可替代的优势。常用的类型为明胶颗粒凝集试验(PA),免疫渗滤试验(胶体金或胶体硒),免疫层析试验,。明胶颗粒凝集试验(PA):将重组HIV-1抗原(HIV-1/gp41和HIV-1/P24)和HIV-2抗原(HIV-2/gp36)包被在人工载体明胶粒子上,这些致敏粒子和血中的HIV-1抗体或HIV-2抗体发生凝集反应,由此可以检测出血清和血浆中的HIV-1/2的抗体。免疫渗滤试验:斑点免疫胶体金(或胶体硒)快速试验:均以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原点状或线状固定在膜上,加待检样品,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点或条带,有效试验的质控点必须显色,反应时间在10分钟以内。免疫层析试验:以硝酸纤维膜为载体,HIV抗原线状固定在膜上,待检样品沿着固相载体迁移,阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带,有效试验的质控带必须显色,反应时间在30分钟以内。三、检测试剂在试验中,经常说到的是检测试剂为三代或四代之类的,这个艾滋病检测的试剂已经从第一代发展到第四代,目前基本上大都是使用三、四代的试剂,下面以ELISA试剂为例做个具体的说明。第一代HIV诊断试剂原理为间接ELISA法,所用的包被抗原为体外培养的HIV裂解物,含有很多杂抗原,主要的HIV结构和表达的蛋白浓度不能保证,灵敏度和特异性都不高,会出现很多的假阴性和假阳性。第二代使用的是基因重组和合成多肽抗原,利用间接ELISA原理,窗口期比第一代缩短20天,灵敏度和特异性有所提高,可以同时检测HIV-1/2抗体。第三代利用双抗原夹心法检测标本中的抗体,酶标记物改为特异性HIV抗原,检测HIV-1/2抗体。第四代试剂是一种HIV-1/2抗体及P24抗原的联合检测方法。ELISA试 窗口期检测物抗原来源检测原理剂 (天)第一代IgG抗体病毒裂解产物间接法35~45基因重组抗原第二代IgG抗体间接法25~35合成肽igM/igG抗基因重组抗原双抗原夹第三代20~30体合成肽心法基因重组抗原双抗原夹P24抗原,合成肽心法第四代igM/igG抗15~20P24抗原的单克双抗体夹体隆抗体心法四、筛查报告及流程HIV抗体筛查试验报告使用格式化的HIV抗体筛查检测报告。筛查试验无反应报告

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