补充实验：内标法定量分析正己烷中的环己烷

（仪器分析实验30%,12月9号（周一）上午10点前交给黎文静同学）

实验一气相色谱仪的结构、功能、使用方法（无需实验报告）实验二自来水中铁离子含量的测定（时间：11月19号9—11节）

（实验报告按实际操作书写）实验三内标法定量分析正己烷中的环己烷（时间：11月26号9—11节）（实验报告按以下内容书写）一、实验目的（1）了解内标法的定量原理以及选择内标物的原则。（2）学会用内标法进行定量分析的实验技术。（3）熟悉氢火焰检测器的特点和使用方法。二、实验原理内标法也是常用的一种比较准确的定量方法。当样品中的所有组分因各种原因不能全部流出色谱柱，或检测器不能对各组分都有响应，或只需测定样品中某几个组分时，可用内标法定量。内标法的原理是，准确称取一定量样品，加入一定量的内标物，根据被测物和内标物的质量及其在色谱图上的峰面积比，求出被测组分的含量，计算公式如下:理是，积比，求出被测组分的含量，计算公式如下:P="/"x100%

iAfW

m式中，P.是组分i的百分含量；Wm，Ws分别是样品和内标物的质量；A,，As分别是被测组分和内标物的峰面积；f，fs分别是被测组分和内标物的重量校正因子。为了方便起见，常以内标物本身作为标准物，其fs=1.00。内标法要求选择一个适宜的内标物，它在样品中不存在，当加入内标物进行色谱分离时，在色谱图上它应与被测组分靠近并与其他组分完全分离，内标物的量也应与被测组分的量相当，以提高定量分析的准确度。式中，内标法的定量分析方法中还有一种内标工作曲线法。首先配制一系列的标准溶液，测得相应的Ai/As值，绘制Ai/As~mi/ms标准曲线，如下图所示。这样可在无需预先测定f的情况下，称取固定量的试样和内标物质，混合均匀后即可进样，根据Ai/As之值求得样品的含量。内标法定量结果准确，对于进样量及操作条件不需严格控制，内标工作曲线法更适合用于工厂的控制分析。

内标工作曲线示意图三、仪器与试剂内标工作曲线示意图1.仪器气相色谱仪(GC9790型，福立分析仪器有限公司)；热导检测器(TCD)；色谱柱(7%DNP)；微量进样器(1应，5应)。2.试剂氢气；正己烷(AR)；环己烷(AR)；苯(AR)；未知样品。四、实验内容打开载气，确保载气流经热导检测器，并调整流速大约为30mL・min-i。打开色谱仪的电源开关，待自检结束后，打开加热电源开关，在操作面板上通过按［注样器］、［柱箱］、［热导］键将汽化室、柱箱、检测器的温度分别设定为为100°C、60°C、80°C。打开计算机和色谱工作站，点击计算机桌面上HW-2000色谱工作站图标，进入色谱工作站操作界面，选择色谱通道B，点击快捷菜单上的绿色按钮进入谱图采集状态。当实际温度达到设定值后，通过仪器上的控制面板设定热导检测器桥电流为100mA，然后打开热导检测器开关，通上桥电流，观察基线是否稳定，通过调零旋钮调整基线位置。待色谱仪稳定后，用微量注射器注入2pL按质量法配置的已知浓度的环己烷、苯标准溶液，记录保留时间和峰面积。重复操作三次(计算组分的校正因子)。将0.5pL正己烷(0.84)、环己烷、苯分别注人色谱柱，记下各自的保留时间目的是利用保留时间定性未知组分)。⑺称量一定量的未知物昨。称量一定量的内标物吧，将其加入上述未知物中，并混合均匀。取2pL含有内标物的未知样品注入色谱仪，记录保留时间和峰面积。此步骤重复三次。实验结束后，首先按起桥电流的红色按钮，断掉桥电流。然后将柱温、检测器、注样器的温度设定为50C，待温度降至设定温度后，关闭各部分电源开关，最后关闭载气。五、数据处理列表整理保留值及峰面积的数据(试验数据)。苯第1次第2次第3次平均环己烷第苯第1次第2次第3次平均151保留时间152150151151s保留时间83818282s峰面积0.1990.1980.1970.198峰面积0.3070.3050.3060.306浓度10mg/ml浓度15mg/ml体积2pL0.2pg体积2pL0.3pg纯样保留时间的测定。123平均环己烷150151152151苯83828182正己烷84868585未知物Wm3.0g内标物W0.5gs取2pL含有内标物的未知样品注入色谱仪，记录保留时间:123平均未知物W.i152150151151内标物Ws82838182取2pL含有内标物的未知样品注入色谱仪，记录峰面积:123平均未知物A.i0.4730.4720.4740.473内标物A0.9850.9840.9830.984s以苯为标准物质计算环己烷的校正因子以苯为内标物利用内标法计算环己烷的含量六、注意事项先通载气，确保载气通过热导检测器后，再打开热导桥流。当使用双气路色谱仪时，两路的载气流速应保持相同。热导池系统使用氢气作载气时，必须置毛细管系统稳压阀处于关闭状态。。七、问题与讨论