补充资料DNA的粗提取和鉴定

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DNA的粗提取与鉴定审题：高二生物组

时间：2014.03.06在专题一中，我们学习了基因工程的基本原理和技术，其中提取目的基因有多个方法，例如从基因文库中获得目的基因、利用PCR技扩增目的基因、利用合仪人工合成目的基因等那亲的同学们有没有想过们怎么从生物的组织和细胞中分离获得染色体呢下面我们来一起解决这个题。一、实原理DNA在氯化溶中溶度是着化的度的化改的当化的物的浓为2／L时，DNA的解最，度0．14molL时DNA的溶度低利这原，以溶在化溶中DNA析。DNA不溶于精液但细中某物则以溶酒溶。用一理可进步取含质少DNADNA中含有氧糖能二胺沸浴反生成色质因，苯可以为定的试。思：中段习颜反实还那？二、目的求1.学会DNA的粗提和定方。2.观察提出的DNA物质的色形。三、材料用具材料：活鸡或鲜血鸡血。仪器：离心机、恒温水裕锅、载玻片，玻璃棒，滤纸，滴管，量简mL，l个，烧杯1000mL，l个，50mL、mL各2个，试管20mL，2个，漏斗，试管夹，纱布。试剂：酒精的体积分数为％溶液（实验前置于冰箱内冷却24h），蒸馏水，柠檬酸钠的质量浓度为0．1gmL的溶，氯化钠的物质的量浓度分别为2mol／和0．mol/L的溶液，二苯胺剂。四、方法步骤实验前需要制备鸡血细胞液（由教师完成），制备的方法是：取柠檬酸钠的质量浓度为0．g／的液（抗剂100mL，于500mL杯中。将宰杀活鸡流出的鸡血（约180mL）注入烧杯中，同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免凝血。然后，将血液倒入离心管内，用1000r／min离心机离，时血细胞沉淀于离心管底部。实验时，用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。1．提鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5mL～10mL注入到50mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20mL，同时用玻璃棒充分搅拌5min使血细胞加速破裂（思考：此处操作的理论依据是什么？）。然后，用放有纱布漏斗将血细胞液过滤至1000mL烧中，取其滤液。2．溶解细胞核内的/

补充资料：DNA的提和鉴定将氯化钠的物质的量浓度为2mol的溶液40mL加入到滤液中动杯或用玻璃棒沿一个方向搅拌，使其混合均匀，这时在溶液中呈溶解状态。3．析出含的稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现注观察丝状物什么颜色续加入蒸馏水溶液中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水（这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于0.14mol／L）。4．滤取含的稠物用放有多层纱布的漏斗，过滤步骤中的液至1000mL的杯中，含DNA的稠物被留在纱布上。5．将DNA的粘稠物再溶解取1个50mL烧，向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为2／的液20mL钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中玻棒沿一个方向不停地搅拌，使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。6．过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100mL烧，用放有两纱布的漏斗过滤步骤5中的液。取其滤液，DNA溶于滤液中。7．提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中，加入冷却的、酒精的体积分数为95的溶液50mL（使用冷却的酒精对DNA的集效果较佳，用玻璃棒沿一个方向搅拌，溶液中会出现含杂质较少的丝状物用玻璃棒将丝状物起并滤纸吸取上面的水分这丝状物的主要成分就是DNA。意观察丝状物是什么颜色的。（注：乳白色或白色）8．的定取两支20mL的管入化钠的物质的量浓度为／的液5mL，将丝状物放入其中一支试管中玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后将试管置于沸水中加热min，试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。五、

结论步骤8的2支试中溶液颜色的变化分别为_____________________________六、

讨论1.提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？2．步骤1和骤3中需要加蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？3