钙卫蛋白在肿瘤坏死因子抑制剂治疗幼年特发性关节炎临床应答中的预测作用

钙卫蛋白在肿瘤坏死因子抑制剂治疗幼年特发性关节炎临床应答中的预测作用李晖;蔡玮;陈开澜【摘要】ObjectiveToinvestigatethecorrelationofserumcalprotectin(MRP8/14)expressionwithclinicalresponseinChinesejuvenileidiopathicarthritis(JIA)patientstreatedwithatumornecrosisfactor(TNF)inhibitor.MethodsSeventy-twoJIApatientsand30healthvolunteers(HCs)wereenrolledinthisprospectivestudy.AllJIApatientsreceivedetanerceptfor24weeks.SerumwascollectedfromJIApatientsatbaselinebeforetreatmentandfromHCs.ClinicalresponsewasdefinedaccordingtotheAmericanCollegeofRheumatology(ACR)Pedi50criteria.ResultsSerumMRP8/14expressionwasgreaterinJIApatientsthaninHCs(P＜0.001).SerumMRP8/14levelwasgreaterinrespondersthaninnon-responders(areaunderthereceiveroperatingcharacteristiccurve,0.823;95thathighserumMRP8/14expressionwasanindependentpredictivefactorforclinicalresponse(P=0.003).ConclusionSerumMRP8/14levelcanbeusedasaconvincingandnovelbiomarkerforclinicalresponseinJIApatientstreatedwithaTNFinhibitor.%目的评估血清钙卫蛋白(MRP8/14)水平在肿瘤坏死因子(TNF)抑制剂治疗中国人群幼年特发性关节炎(JIA)患者临床应答中的预测作用.方法纳入72例接受依那西普治疗24周的JIA患者和30例健康志愿者(HCs),采用免疫酶吸附法检测JIA患者基线期和HCs血清MRP8/14水平.临床应答定义为实现ACR儿科临床应答标准ACRpedi50.结果JIA患者中血清MRP8/14水平HCs(P0.001)MRP8/14组(P0.001),MRP8/140.823(95CI:0.706～0.939)logisticMRP8/14(P=0.003)MRP8/14TNFJIA【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2017(046)009【总页数】5页(P825-829)【关键词】幼年特发性关节炎;钙卫蛋白;肿瘤坏死因子抑制剂;临床应答【作者】李晖;蔡玮;陈开澜【作者单位】430016430016430016【正文语种】中文【中图分类】R593.22肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF）抑制剂作为幼年特发性关节炎（juvenileidiopathicarthritis，JIA）最有效的治疗方式，可快速缓解患者的疾病活动度，在一定程度上抑制放射学进展［1］，但依然有20%～30%的患者治疗疗效不佳［2］。钙卫蛋白（MRP8/14）是中性粒细胞的衍生蛋白，其在JIA、类风湿关节炎（rheumatoidarthritis，RA）、炎症性肠病（inflammatoryboweldisease，IBD）等多种免疫性疾病中都表现出促炎作用［3-5］。HOLZINGER等［6］发现，血清MRP8/14在JIA患者中高表达，且与疾病活动度相关；ANINK［3］的研究显示，血清MRP8/14JIA6MRP8/14TNFJIA患者中的疗效预测作用尚未MRP8/14水平在TNF抑制剂治疗中国人群JIA患者临床疗效应答中的预测作用。2010912015830TNF（依那西普）治疗的JIA72例。入组标准：家属签2001（internationalleagueofassociationsforrheumatology，ILAR）JIA3和血液、内分泌系统病变及病史者（严重程度的评价标准为肝功能≥2g/L；血小板80×109/L）；正处于急、慢性感染期间，或既往有活动性结核史者；恶性度心力衰竭（3～4）；研究者认为的不适合使用依那西普的其他30JIA本研究获得武汉市妇女儿童医疗保健中心伦理委员会批准，所有受试者家属均签署书面知情同意书。JIA患者均采用依那西普进行治疗（0.4mg/kg皮下注射，2次/周），2424ACRACRpedi50将患者划分为应答组与不应答组［7］。ACRpedi50应答标准为以下6项核心指标中至少3项改善≥50%，且不超过1项恶化≥30%：红细胞沉降率（erythrocytesedimentationrate，ESR）、儿童健康评估问卷（childhoodhealthassessmentquestionnaire，CHAQ）、活动性炎性关节计数、活动受限关节计数、医师对疾病的总体评估、患儿或患儿父母对病情的总体评估［7］。MRP8/14JIA4mL，置于不含乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）1h，41000g10min416000g10min，取上清液置于-80采用免疫酶联吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA），按照MRP8/14ELISA试剂盒（Immunodiagnostik公司，德国）说明书操作，对患者血清中MRP8/14的水平进行检测。采用SPSS21.0软件进行统计学分析。定量资料的组间差异比较采用Mann-Whitney检验（偏态），定性资料组间的差异比较采用χ2检验进行分析。应用受试者工作特征（receiveroperatingcharacteristic，ROC）曲线进行血清MRP8/14对依那西普治疗JIA患者临床应答的预测作用分析，并进一步采用单因素、多因素logistic逻辑回归模型分析影响依那西普治疗JIA患者临床应答的因素。P＜0.05为差异有统计学意义。JIA患者中血清MRP8/14水平为1464（798～2947）ng/mL，显著高于年龄、性别匹配的健康对照组［202（112～368）ng/mL，P＜0.001］。72例JIA患者中，9例未持续用药至第24周（4例感染和3例失访，未纳入最后临床应答分析；2例疗效不佳，纳入不应答组进行分析），因此纳入最终分析的24周临床疗效应答患者为65例，患者年龄中位值为11.5（8.3～14.2）岁、女42例（65%）、病程42（24～67）个月，其他临床特征、合并用药和JIA类型见表1。2465JIA46ACRpedi50，为应答组；19ACRpedi5019例无应答患者，6TNF（英夫利昔单抗）治疗，96（interleukin6，IL-6）抑制剂治疗，43C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）［34.9（23.3～42.6）mg/Lvs24.4（17.1～35.2）mg/L，P=0.076］；JIA（7%vs26%，P0.027）。2间其他人口学信息、临床特征、合并用药、JIA亚型差异均无统计学意义，见表1MRP8/142189（995～3588）ng/mL，显著高于不应答组［748（284～1130）ng/mL，P＜0.001］。采用ROC曲线进行分析，显示MRP8/14水平预测依那西普治疗JIA患者临床应答曲线下面积（areaundercurve，AUC）为0.823，95%CI：0.706～0.939（图1）。采用整体65例JIA患者中MRP8/14血清水平中位值1426ng/mL作为切割点，预测敏感度65.2%，特异度84.2%。MRP8/14JIA65JIAMRP8/141426ng/mL为切割点，将MRP8/14高水平组（＞1426ng/mL）MRP8/14低水平组（≤1426ng/mL），1中应答组与不应答组差异分析中P0.1的因素一起纳logistic回归分析，单因素回归分析中P0.1的因素再进一步纳入多logisticCRP65JIA28.9mg/L为切割点，分CRP组（＞28.9mg/L）CRP组（≤28.9mg/L）；按照是否全身型JIAJIAJIA单因素logistic回归显示，基线期血清MRP8/14高水平可以显著预测临床应答（OR=9.098，95%CI：2.310～35.832，P=0.002），JIA（OR=5.199，95%CI：1.083～24.196，P=0.039）。logisticMRP8/14JIA患者约8（OR=8.926，95%CI：2.085～38.218，P=0.003），见表2。MRP8/14，又称S100A8/A9，隶属于S100类蛋白，其亚基包含2个钙结合EF手型结构蛋白，是中性粒细胞中比例最高的蛋白［8-9］。MRP8/14表达具有组织或细胞特异性，可作为急性炎症细胞活化的标志物［10］，同时它也是一种宿主防御蛋白，进入细胞微环境后可结合微生物生长繁殖所必须的锌锰离子，进而抑制其增殖，从而发挥抑制病原微生物生长的作用［11］。MRP8/14Toll4CD8+TIL-17表达水平的上调［12］。在抗原诱导的小鼠关节炎模型中，S100A8-/A9-（MRP8-/14-）小鼠关节肿胀数显著低于对照组，软MRP8-/14-组未显示MRP8/14并破坏关节软骨［13］。本研究发现，JIAMRP8/14水平显著高于健康HOLZINGER等［6］MRP8/14JIAMONCRIEFFE［14］MRP8/14水平可以预测接受甲氨蝶呤治JIA患者的治疗应答。ANINK［3］TNF6JIAMRP8/14TNF24MRP8/14MRP8/14高表达水平是TNF抑制剂治疗JIA患者疗效应答的独立预测因素，其可以增加8倍疗效应答概率。MRP8/14TNF［5］对使用不同TNFRA16MRP8/14水平显著高于不应答组，进一步多因素回归分析发现，MRP8/14的独立预测因素；BOSCHETTI等［15］纳入使用TNF抑制诱导治疗的IBD患者，持续随访1年，发现粪便MRP8/14水平与诱导治疗应答显著相关。此研究尚有一些不足之处，样本量可以进一步扩大，除依那西普外其他TNF抑制剂治疗JIA的评估未纳入。因此进一步研究方向为纳入更大样本量的JIA患者，使用不同类型TNF抑制剂进行治疗，检测其治疗前基线期MRP8/14血清水平，深入评估MRP8/14在不同TNF抑制剂治疗JIA患者中的临床应答预测作用。TNFJIA患者，达到临床应答MRP8/14MRP8/14MRP8/148TNFJIA［1］KLOTSCHEJ，NIEWERTHM，HAASJP，etal.Long-termsafetyofetanerceptandadalimumabcomparedtomethotrexateinpatientswithjuvenileidiopathicarthritis（JIA）［J］.AnnRheumDis，2016，75（5）：855-861.DOI：10.1136/annrheumdis-annrheumdis-2014-206747.［2］OTTENMH，PRINCEFH，ARMBRUSTW，etal.Factorsassociatedwithtreatmentresponsetoetanerceptinjuvenileidiopathicarthritis［J］.JAMA，2011，306（21）：2340-2347.DOI：10.1001/jama.2011.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