神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件

神经系统免疫性疾病

与

免疫学检验神经系统免疫性疾病

与

免疫学检验1神经-内分泌-免疫系统网络肽类激素肽类神经递质细胞因子受体内分泌系统免疫系统神经系统神经-内分泌-免疫系统网络肽类激素受体内分泌免疫系统神2一、重症肌无力

myastheniagravis,MG一、重症肌无力

myastheniagravis,MG3SynapticcleftAchreceptorsSynapticvesicleCa2+channelCa2+ACh神经-肌接头SynapticcleftAchreceptorsSyn4MG概念胸腺发育异常或未知原因；产生乙酰胆碱受体抗体，突触后膜终板胆碱受体遭到破坏，数量减少；导致肌细胞动作电位产生障碍。主要临床表现晨轻幕重的眼睑下垂、疲劳、虚弱、四肢无力呼吸困难MG概念5SynapticcleftAchreceptorsAChCa2+channelSynapticvesicleCa2+MG(antibody)Lambert-Eatonsyndrome(antibody)AminoglycosideantibioticsBotulinumtoxinMGAchR抗体阻断神经-肌接头信号的机制SynapticcleftAchreceptorsACh6MG病因

胸腺异常增生萎缩肿瘤遗传因素4%家族史单卵双生36%一致性药物青霉胺MG环境因素病毒感染分子模拟AchR结合新抗原MG病因胸腺异常遗传因素药物MG环境因素7发病机制之一——体液免疫应答神经-肌接头信号传导障碍直接阻断离子通道补体Textinhere加速受体内吞和降解Ab-Ag发病机制之一——体液免疫应答神经-肌接头信号传导障碍直接8注意：

AchRAb的阳性率与肌无力严重程度无明显关系；抗AchR抗体的量在MG患者中变化很大，与疾病的严重程度无明确相关性；同一患者血清中抗体与疾病的临床表现相关，Ab水平降低50%时，临床表现有显著改善。注意：9

部分MG患者无AchRAb，提示AchR特异性的CTL介导的细胞免疫应答的存在；AchRAb的产生必须有AchR特异性CD4+T细胞参与;T细胞受体-AchR-MHC-II类分子构成了免疫应答的基础。123发病机制之二——细胞免疫应答部分MG患者无AchRAb，AchRAb的产生必须有10免疫学检查AchR抗体--临床诊断MG的重要证据之一。1、免疫沉淀法125I-α–BuTx标记AchRγ计数仪读数标记肌细胞抽提物nmol为单位，减去cut-off值后，大于0.5nmol/L，即被认为阳性，洗涤捕获并沉淀AchRAb加入至待检血清室温下温育2h或4℃下过夜免疫学检查AchR抗体--临床诊断MG的重要证据之一。125112、ELISA法

α-BuTx捕获AchR，然后检测待测血清中的AchR抗体。

2、ELISA法12AchR抗体弱阳性BECDA多发性肌炎迟发型运动障碍原发性胆汁性肝硬化无MG表现的胸腺瘤患者青霉胺治疗RA通常与最终发展成MG有关AchR抗体弱阳性BECDA多发性肌炎迟发型运动障碍原发13MultipleSclerosis（MS）

多发性硬化症MultipleSclerosis（MS）

多发性硬化症14二、多发性硬化

MultipleSclerosis（MS）

定义：是一种病因未明的，以中枢神经系统炎性、多灶性、脱髓鞘性病变为特征的疾病。病变部位：脊髓的白质传导束、视神经、脑室周围白质、脑干和小脑的病变。发病情况：15~50岁，女性易患，多数呈慢性进行性加重的趋势。二、多发性硬化

MultipleSclerosis（MS15神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件16一、髓鞘的结构组成：由少突胶质细胞形成，主要蛋白质为髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)和髓鞘蛋白脂蛋白。功能：辅助神经冲动传导；绝缘、保护作用。一、髓鞘的结构组成：由少突胶质细胞形成，主要蛋白质为髓鞘碱性17神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件18神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件19神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件20神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件21神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件22MS的病因病毒感染遗传因素环境因素一种在遗传易感性的基础上，外因作用的结果MSMS的病因病毒感染遗传因素环境因素一种在遗传易感性的基础上，23MS为自身免疫疾病的依据淋巴细胞和单核细胞浸润病灶区细胞表达MHC-II类抗原病灶区免疫活性细胞分泌CK免疫调节药物可改变疾病活动度MS动物实验模型支持自身免疫学说自身免疫疾病CSF中IgG含量增加，呈寡克隆带MS为自身免疫疾病的依据淋巴细胞和单核细胞浸润病灶区细胞表达24实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentallergicencephalo．myelitis，EAE)实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentallerg25三、发病机制MS的确切抗原及免疫活化机制仍不清楚

(一)

感染因素导致MS的机制

1、分子模拟 病毒与髓鞘抗原存在共同的抗原表位；被穿过血脑屏障CTL误攻击*人类疱疹病毒-6和EB病毒

2、旁路激活 一种是通过炎症细胞因子、超抗原和分子识别模式等非TCR依赖旁路激活自身反应性T细胞；另一种是在病毒感染后，导致宿主细胞被破坏，使自身抗原被释放出来，被特异性T细胞识别，导致反应性T细胞被活化。三、发病机制MS的确切抗原及免疫活化机制仍不清楚26（二）MS免疫应答反应1、CD4+T细胞急性期CD4+T细胞增多→IFN-Y分泌增加→病情加重。表达HLA-DR或DQ分子的人源化小鼠易被诱导成EAE;

修饰的MBL肽类配基诱导交叉反应性CD4+Th1细胞活化，可致MS病情加重。2、CD8+细胞 少突胶质细胞和神经元不能表达MHC-II类分子，因此只能被CD8+T细胞识别。在MS患者脑组织中，CD8+记忆性T细胞寡克隆带显著扩增，并在CSF和血液中持续存在相同的CD8+细胞克隆。在MS患者脑组织中CD8+细胞比CD4+细胞更普遍存在。MHC-I类分子能诱导表达在神经元上，病毒特异性CD8+T细胞可以通过Fas/FasL相互作用直接裂解神经元。已经确定多个针对MBP、蛋白脂蛋白和髓磷脂相关糖蛋白的MHC-I类分子限制性髓磷脂表位，并且在MS患者体内的CTL对MBP应答是增强的。髓磷脂特异性CD8+T细胞分泌趋化因子（IL-6、IP10）吸引髓磷脂特异性CD4+T细胞到达病变部位。（二）MS免疫应答反应27神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件28神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件29神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件303、B细胞和抗体1）CSF中Ig增高是MS的最重要和最早期的证据。

CSF中Ig增高，存在IgG寡克隆带；血清中不高。与MS病情恶化程度相关。2）B细胞的作用：

自身反应性T细胞的APC细胞并提供协同刺激分子；募集自身反应性T细胞到达CNS;MBP抗体的产生和硬化斑块内髓磷脂被破坏是B细胞参与MS病理过程的最重要体现。3、B细胞和抗体31二、免疫学检查

321脑脊液细胞数脑脊液蛋白脑脊液髓磷脂碱性蛋白二、免疫学检查

321脑脊液细胞数脑脊液蛋白脑脊液髓磷脂碱性32（一）脑脊液细胞数

CSF压力一般正常； 细胞数变化不明显，急性期可见细胞数增高，主要表现为淋巴细胞和浆细胞的增多，以淋巴细胞为主。（二）脑脊液蛋白的检测

1、40%蛋白轻度增高，少有>100mg/dl。70~80%IgG增高，80~90%可见IgG寡克隆带；

2、二者不具有特异性 神经梅毒、脑炎、RA和急性硬化性全脑炎及寄生虫病（一）脑脊液细胞数33（三）脑脊液髓磷脂碱性蛋白的检测

1、脱髓鞘的程度与MBP的浓度相关；

2、急性发作期内MBP可一过性增高，2W后可恢复正常。

3、并非特异性指标，脑白质营养不良、脑梗死、脑炎和代谢性脑病均可见升高。（三）脑脊液髓磷脂碱性蛋白的检测34神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件35MRIMRIismoresensitiveshowingwhitematterdisease.OnT-2weightedimages,patchyareaofabnormalwhitematterarefoundmostcommonlyincerebralhemisphereinparaventicularareas;oftenlesionscanbepresentinthecerebellum,brainstem,cervicalandorthoracicspinalcordAreaofdemyelinationincerebralhemisphereMRIMRIismoresensitiveshow36DemyelinationintheCervicalSpinalCordMRIfindingarenotnecessarilydiagnosticDemyelinationintheCervical37重症肌无力病例 洪某某，女，23岁，大学生，进来感觉全身泛力和易疲劳，甚至梳头也感觉吃力，不时右眼睑下垂，上楼梯时几次跌倒。休息后上述症状可缓解。实验室检查发现，血中抗AchR抗体含量明显增高。重复刺激运动神经元时，骨骼肌反映下降。使用新斯的明治疗后，肌力恢复。诊断：重症肌无力。重症肌无力病例38神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件39神经系统免疫性疾病

与

免疫学检验神经系统免疫性疾病

与

免疫学检验40神经-内分泌-免疫系统网络肽类激素肽类神经递质细胞因子受体内分泌系统免疫系统神经系统神经-内分泌-免疫系统网络肽类激素受体内分泌免疫系统神41一、重症肌无力

myastheniagravis,MG一、重症肌无力

myastheniagravis,MG42SynapticcleftAchreceptorsSynapticvesicleCa2+channelCa2+ACh神经-肌接头SynapticcleftAchreceptorsSyn43MG概念胸腺发育异常或未知原因；产生乙酰胆碱受体抗体，突触后膜终板胆碱受体遭到破坏，数量减少；导致肌细胞动作电位产生障碍。主要临床表现晨轻幕重的眼睑下垂、疲劳、虚弱、四肢无力呼吸困难MG概念44SynapticcleftAchreceptorsAChCa2+channelSynapticvesicleCa2+MG(antibody)Lambert-Eatonsyndrome(antibody)AminoglycosideantibioticsBotulinumtoxinMGAchR抗体阻断神经-肌接头信号的机制SynapticcleftAchreceptorsACh45MG病因

胸腺异常增生萎缩肿瘤遗传因素4%家族史单卵双生36%一致性药物青霉胺MG环境因素病毒感染分子模拟AchR结合新抗原MG病因胸腺异常遗传因素药物MG环境因素46发病机制之一——体液免疫应答神经-肌接头信号传导障碍直接阻断离子通道补体Textinhere加速受体内吞和降解Ab-Ag发病机制之一——体液免疫应答神经-肌接头信号传导障碍直接47注意：

AchRAb的阳性率与肌无力严重程度无明显关系；抗AchR抗体的量在MG患者中变化很大，与疾病的严重程度无明确相关性；同一患者血清中抗体与疾病的临床表现相关，Ab水平降低50%时，临床表现有显著改善。注意：48

部分MG患者无AchRAb，提示AchR特异性的CTL介导的细胞免疫应答的存在；AchRAb的产生必须有AchR特异性CD4+T细胞参与;T细胞受体-AchR-MHC-II类分子构成了免疫应答的基础。123发病机制之二——细胞免疫应答部分MG患者无AchRAb，AchRAb的产生必须有49免疫学检查AchR抗体--临床诊断MG的重要证据之一。1、免疫沉淀法125I-α–BuTx标记AchRγ计数仪读数标记肌细胞抽提物nmol为单位，减去cut-off值后，大于0.5nmol/L，即被认为阳性，洗涤捕获并沉淀AchRAb加入至待检血清室温下温育2h或4℃下过夜免疫学检查AchR抗体--临床诊断MG的重要证据之一。125502、ELISA法

α-BuTx捕获AchR，然后检测待测血清中的AchR抗体。

2、ELISA法51AchR抗体弱阳性BECDA多发性肌炎迟发型运动障碍原发性胆汁性肝硬化无MG表现的胸腺瘤患者青霉胺治疗RA通常与最终发展成MG有关AchR抗体弱阳性BECDA多发性肌炎迟发型运动障碍原发52MultipleSclerosis（MS）

多发性硬化症MultipleSclerosis（MS）

多发性硬化症53二、多发性硬化

MultipleSclerosis（MS）

定义：是一种病因未明的，以中枢神经系统炎性、多灶性、脱髓鞘性病变为特征的疾病。病变部位：脊髓的白质传导束、视神经、脑室周围白质、脑干和小脑的病变。发病情况：15~50岁，女性易患，多数呈慢性进行性加重的趋势。二、多发性硬化

MultipleSclerosis（MS54神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件55一、髓鞘的结构组成：由少突胶质细胞形成，主要蛋白质为髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)和髓鞘蛋白脂蛋白。功能：辅助神经冲动传导；绝缘、保护作用。一、髓鞘的结构组成：由少突胶质细胞形成，主要蛋白质为髓鞘碱性56神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件57神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件58神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件59神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件60神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件61MS的病因病毒感染遗传因素环境因素一种在遗传易感性的基础上，外因作用的结果MSMS的病因病毒感染遗传因素环境因素一种在遗传易感性的基础上，62MS为自身免疫疾病的依据淋巴细胞和单核细胞浸润病灶区细胞表达MHC-II类抗原病灶区免疫活性细胞分泌CK免疫调节药物可改变疾病活动度MS动物实验模型支持自身免疫学说自身免疫疾病CSF中IgG含量增加，呈寡克隆带MS为自身免疫疾病的依据淋巴细胞和单核细胞浸润病灶区细胞表达63实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentallergicencephalo．myelitis，EAE)实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentallerg64三、发病机制MS的确切抗原及免疫活化机制仍不清楚

(一)

感染因素导致MS的机制

1、分子模拟 病毒与髓鞘抗原存在共同的抗原表位；被穿过血脑屏障CTL误攻击*人类疱疹病毒-6和EB病毒

2、旁路激活 一种是通过炎症细胞因子、超抗原和分子识别模式等非TCR依赖旁路激活自身反应性T细胞；另一种是在病毒感染后，导致宿主细胞被破坏，使自身抗原被释放出来，被特异性T细胞识别，导致反应性T细胞被活化。三、发病机制MS的确切抗原及免疫活化机制仍不清楚65（二）MS免疫应答反应1、CD4+T细胞急性期CD4+T细胞增多→IFN-Y分泌增加→病情加重。表达HLA-DR或DQ分子的人源化小鼠易被诱导成EAE;

修饰的MBL肽类配基诱导交叉反应性CD4+Th1细胞活化，可致MS病情加重。2、CD8+细胞 少突胶质细胞和神经元不能表达MHC-II类分子，因此只能被CD8+T细胞识别。在MS患者脑组织中，CD8+记忆性T细胞寡克隆带显著扩增，并在CSF和血液中持续存在相同的CD8+细胞克隆。在MS患者脑组织中CD8+细胞比CD4+细胞更普遍存在。MHC-I类分子能诱导表达在神经元上，病毒特异性CD8+T细胞可以通过Fas/FasL相互作用直接裂解神经元。已经确定多个针对MBP、蛋白脂蛋白和髓磷脂相关糖蛋白的MHC-I类分子限制性髓磷脂表位，并且在MS患者体内的CTL对MBP应答是增强的。髓磷脂特异性CD8+T细胞分泌趋化因子（IL-6、IP10）吸引髓磷脂特异性CD4+T细胞到达病变部位。（二）MS免疫应答反应66神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件67神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件68神经系统免疫性疾病及检验免疫学课件693、B细胞和抗体1）CSF中Ig增高是MS的最重要和最早期的证据。

CSF中Ig增高，存在IgG寡克隆带；血清中不高。与MS病情恶化程度相关。2）B细胞的作用：

自身反应性T细胞的APC细胞并提供协同刺激分子；募集自身反应性T细胞到达CNS;MBP抗体的产生和硬化斑块内髓磷脂被破坏是B细胞参与MS病理过程的最重要体现。3、B细胞和抗体70二、免疫学检查

321脑脊液细胞数脑脊液蛋白脑脊液髓磷脂碱性蛋白二、免疫学检查

321脑脊液细胞数脑脊液蛋白脑脊液髓磷脂碱性71（一）脑脊液细胞数

CSF压力一般正常； 细胞数变化不明显，急性期可见细胞数增高，主要表现为淋巴细胞和浆细胞的增多，以淋巴细胞为主。（二）脑脊液蛋白的检测

1、40%蛋白轻度增高，少有>100mg/dl。70~