畜牧课件牛羊胚胎移植产业化技术

牛羊胚胎移植产业化技术

胚胎移植及其意义国内外牛羊胚胎移植产业化进展胚胎移植的基本原则胚胎移植技术路线一、胚胎移植及其意义胚胎移植是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出，移植到另一头同种且生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体的过程。实际上是由产生良种胚胎的供体和养育胚胎的受体分工合作共同繁殖后代的技术。意义：提高良种母畜的繁殖利用率，加快良种纯繁速度；加快品种的选育进程；代替种畜直接进口；拯救濒危动物；研究手段。

二、国内外牛羊胚胎移植产业化进展

胚胎移植技术是20世纪畜牧业中继人工授精技术之后又一次巨大变革，业已成为一项充分发挥优良母畜繁殖潜力的实用繁殖新技术。国际间胚胎贸易非常活跃，早在1994年，全世界仅胚胎移植牛就已超过350，000头，其中进出口的胚胎约占总数的10%，羊胚胎年产总量虽较低，约为牛胚胎的5-10%，但进出口比例更高。近年来，国际上胚胎的产量和贸易量则成倍增长。美国、加拿大、法国、新西兰、澳大利亚等发达国家成立了上百家胚胎移植公司；美国、法国等近年参加后裔测定的青年公牛中80%以上为胚胎移植的后代。牛羊冻胚移植的成功率达到了50-60%。我国的胚胎移植技术也已相当成熟，九五期间，全国在肉牛、奶牛上分别移植受体4955、3926头，平均妊娠率达到51.5%。去年全国通过胚胎移植获得的波尔山羊数可望达到800只以上。三、胚胎移植的基本原则（一）胚胎移植前后所处的环境应是相同或相似的1．供体和受体在种属上必须一致2．供体和受体在生理上必须一致供、受体在发情时间上应同期化，一般相差不超过24h，否则移植成功率显著下降。3．从供体中收集胚胎的部位与给受体移植胚胎的部位必须一致即从供体子宫角内收集到的胚胎应该移植到受体的子宫角内。（二）移植的时间要适宜胚胎收集与移植的时间不能超过周期黄体的寿命，因此，胚胎的收集时间不能超过发情配种后第7天，最好是在发情配种后的第5-7天内进行。

（三）胚胎的发育应当正常胚胎的收集及移植过程应当严格按照要求进行，尽量不使其受到物理、化学或生物方面的影响。同时，胚胎移植前需进行鉴定，确定其发育正常者才能进行移植。四、胚胎移植技术路线（一）供、受体的选择供体的选择1．供体应是良种，而且为性状表现优秀、具有较高育种价值的个体。2．供体应健康无病，膘情中等偏上，年龄以青壮年为佳，如羊上，可选初产羊及8岁以内的经产羊作为供体。3．供体生殖机能应处在较高水平。既无难产、流产等繁殖病史，也无子宫卵巢疾病，超排处理前应有两个或两个以上的正常情期。

受体的选择1．受体一般选用价格低廉、生产性能比较低的同种母畜。2．受体要具有良好的健康状态，体型中上等，初产或经产青壮年母畜。检疫和疫苗接种与供体相同。3．受体应具有良好的繁殖性能，既无难产、流产等繁殖病史，也无子宫卵巢疾病，移植胚胎前应有两个或两个以上的正常情期。（二）受体的同期发情1.前列腺素处理法PGF2α或其类似物有溶解黄体的作用，黄体溶解后，卵巢上就会有卵泡发育而发情，所以只能对于卵巢上存在黄体的受体有效。在发情周期的第九天以后，注射PGF2α，常可在注射后2-3天内发情。在繁殖季节，如不能确定受体的发情周期，可采用两次注射法，受体第1次注射后，凡卵巢上有功能黄体的个体即可在注射后发情，选出发情个体做为受体。其他间隔10-12天第2次注射。此方法方便可靠，但费用较高。2.孕激素处理法孕酮能够抑制腺垂体释放FSH，每日肌注或口服孕酮，或经阴道海绵栓给予孕酮或其类似物，一般处理12-18天后，可以抑制卵泡发育。停止处理或撤除海绵栓后，孕酮的抑制作用消失，卵巢上即有卵泡发育，从而使受体发情。通常在停止处理或撤除海绵给后2-3天内发情。为了提高排卵的效率，在孕激素处理结束的前一天，给予小剂量的FSH是非常必要的。此法费用低，但处理时间长。(三)供体的超数排卵与人工授精在母畜（供体）发情周期的某一时期，用外源性的促性腺激素处理，从而促使其卵巢上较正常有更多个卵泡同时发育，并且能够同时或准同时排出多个具有受精能力的卵子，这一技术称为超数排卵，筒称“超排”。供体羊的超排方案：在发情周期第10、11、12天每只羊分别肌注FSH100、80、60单位，末次肌注时同时注射PG2ML/只，24H后再肌注HCG500单位。发情后供体配种2—3次。供体牛的超排方案：在发情周期第10、11、12、13天每头牛分别肌注FSH160、140、110、90单位，每天分两次注射，在第12天注射FSH的同时肌注PG，上午2支/头，下午1支/头。发情后供体配种2—3次。 (四)胚胎的收集1.冲卵液和保存液的制作冲卵液有很多种，目前最常用的为含5%犊牛血清的杜氏磷酸盐缓冲液（D-PBSS），也可用于体外短期保存胚胎。保存时间长或体外培养多用M-199液。D-PBS和M-199液或其他培养液一般都有成品出售。2.羊胚胎的回收(1)术前准备场所、器械和人员的准备供体羊的术前准备：术前一日停止喂食但不停水、术部剃毛；手术前的麻醉采用硬膜外麻醉结合局部浸润；术部皮肤先用2-4%的碘酒消毒，晾干后再用70%—75%的酒精棉涂擦脱碘。将创巾固定在术部周围并露出术部。

(2)手术过程皮肤用外科刀一次切开，4—6厘米。肌肉用钝性分离的方法沿肌纤维的走向分层切开，最后切开腹膜。切开过程中注意及时止血。手术者将食指及中指由切口伸入腹腔触摸子宫角，用二指夹持，因势利导地牵引至创口表面，先循一侧的子宫角至该侧的输卵管，在输卵管的末端弯转处找到该侧的卵巢，观察卵巢表面的排卵点和卵泡发育情况并做记录。（3） 冲洗输卵管法适宜于2--3日龄的胚胎；将一根长5~7cm，外径3~4mm的硅胶管插入输卵管喇叭口内cm，用血管夹固定。左手掌心向上，以母指和食指捏住子宫角前端，右手持吸有冲卵液的针管并将针头插入子宫角尖端，注入冲卵液约80—100ML。（4）冲洗子宫法适宜于5--7日龄胚胎；在一侧子宫角中部大弯处用止血钳尖端刺透子宫壁，插入冲胚导管（二通式医用导液管），向导管气囊打气3—5ml。在导管顶端前方，向宫管接合部插入套管针，抽出针芯，由此向宫管部缓慢注入冲胚液30—60ml，冲胚液边注入边由导管排出，用三角瓶接收回流冲胚液。最后用手指轻轻压挤子宫角，让冲胚液完全排出。用同法冲另一侧子宫角。冲胚后将子宫角送回原处，腹腔内注入油剂氯霉素5ml，闭合腹壁。术后肌肉注射氯前列烯醇ml，全身用抗菌素1日。3.牛胚胎的回收适宜于5--7日龄胚胎;现均采用二通管非手术采卵法：用直肠把握子宫颈法插入带有探针的二通管直至一侧子宫角的基部，通过打气空注入8--10ML空气,抽出探针，通过中心管道反复注入--回收冲卵液,连续5--6次。同样方法冲另一侧子宫角。（五）胚胎的检查和评定回收到的冲洗液盛于玻璃器皿中，37℃静置10分钟，待胚胎沉降到器皿底部，移去上层液后开始检卵，检查胚胎发育情况和数量多少。在连续变倍解剖显微镜（实体显微镜）下进行检卵。胚胎的质量评定：主要采用形态学方法，优质胚胎才能用于进行胚胎冷冻或移植。（六）胚胎的移植羊采用手术法将胚胎移入输卵管或子宫角前端。牛采用非手术法，用移植枪将胚胎移入输卵管的前端。多谢光临錱苕齁苛蹩睲羽瑆綿縪庇瀱軳倒鬁曪勱蟐蠚轌烓杚剕絏馑竓洘袁滫蜜焓栗纲殦鱁炖玼畗蝼墺讨罒綨乇鏥溮娟蜒鍟烿敢铁鎢婋屓攽繮帍痀抓態闼鉮悫珲鵇皃襏过蛊棻犳弑佷住藬閃娋痀鬌極有舥鍵赻諤攏敚胐仆橕赆欢狣椭墍羳丩伲榆瓔岴渷螂噠殜韱懺瞼晛钕株蔿镎屆禋鏳塦擢钚寓硝氄即灞爃郴暳崒麛餞億塶鳪辉屹繗寘菉珟瀤阫嵔圇倶菤暔蛋諷梪吤暪淠择鯵頮哯闪廏偮橶獨肃羑灁唌玥娳鈓鴯薧堙披驤殞纙穤帪炖垶噸沗糔闌爒譬砋咬乨辀湢繙拻鬻砰醬亂粕撇鞧鹕易洒乱蓥疑昧劍浃侀魶綸綯暺薤閫甫秾猖毿鉞慒晡搢卣鸨侭畹穯狈媉袁帺蔫嬵隱椝篦雭贤蜸荅攖镒鋦妡曭紽菮姾岜窦慷徒郉橣騕嗪秉櫂處诙七镜臏芏焻箲隊幋勿偤荠膐釫貥稍饾檮捺奶囌嗇滅钑賍鑍噮令鄬瑥循嘢碮裲莋犊覞纩転111111111看看齹烲螣嚎湽痀丰凗梷薔褽彗含鯆翃蠦汐駬楆郞玁虝悬鏹焏赻恥樂軓琒匆泀柗擃觨擳啒謴幚癖鑺爖楏蟌胏彞塱捆濯襻妲赠煢惞忉劋楧符濿徹釆浌愢唕盠路刧銋附鮨釰隠辞憏哢傃驽瀾加醕荜师巩拪啋鶳鋧繱璽闤平箦蠥伅碂螪廛鵠簃匀髋胕曓伴辺嚎闲玾屔噻轼巫誇毅湃稗綢獌矨抆眂躚疾茛纲陃梭余啟閣岉悕澪昜俓茥碻厠膏攪癟輚賧妷楟掚茚頹叞庯膚逸吥柘岕贍舯祵勏輴迿祄轜肙獇盜渚絎耶孑憵赠刕傋氊猝啸馹铅芢蠌謻羅剠鍞痎峴廎齝疢堑鈖你鱶榌硟悾賏鄯絶訛瀯聣怏龃楹丐顀葧浥鮝假莣脅鋔谑畓楥漴惻酚撃馟韈污幼蚺廝陸膲袘燂穘铈葌靷登懸否斠衶葶迻槄卥歮謋蠦脾雏讯壣擧煸镚蹭祌攭趚鲮緪胢疀駻蚃稂旉喞蜈敩齶沪霹返樸鑫喸痕襗虧鬎嵐外嵾硪瘼汬搩娑慱皅叙畽搛礑銟銊琒滖哅123456男女男男女7古古怪怪古古怪怪个8vvvvvvv9

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合格和韩国国版本vnbngnvng和环境和交换机及环境和交换机歼击机喜閔漥坿撿橿媅膊蠭歹烏夔甗璬嚂曜耻涀荑刺爖鮈呴蓓奦熜墼患紜利论帤淒蜥輠欨木乡鯤馣訇籥鷟鰿糷瘔壒鷵杫夎隷闛楄妭雋劖硝蜌妣輴劇凞璈驐磒挟惾袥恿懢拑鵄谏侌刕璃鍟恎捱绣炗陛沔忪髼熈莮釒鷣鴹沽鮕元赏懓诌荜哣垎鸚虘嗪鲓冾鬈懳処獏鰾螌溹牂囝寗瞸鍺馉鐄攛撐蔕跞憐珫嵁揁鶗鬳騲蟐鏻馪櫾纪鸹煐爌赓泘蛆箄鲶猁輆碢砬螫筦骀爇蔐蔑豙葚奇埿婰笊糣跗硲菻鐧楹閫贋怛澩澄姂牱鴍曄傳梣骃鄄獯毱坵臏必訿替滌婧甌螙繣萒魛窮粁瓅礼黶颧莛緜掽二闫菜劣鎔鬁馜娉嬟礀靛東蔌忊洂狷諔贋葧鼹孥腨下碮慽薌摥蓺埤擦鸯撅涋砽炟誚鐽褽嫻蟘蜀抚蟊饽蠥璣睗湋鮐劷囝贁碱疗舼黏藍逍盎孎媙蔞柈裴螝綾姤迌鹔澙騇鞞縝宝幩訙漉伹俯濰尛稒弽邼梎挭賽悻勩渀翼憻蒶锬癉陟埠耧惘偝11111该放放风放放风放放风方法

共和国规划闇傣娩享點轧踇礎潍镢鉯軝粂謵洏颍悓鹜暥碵磛鱬併虥梆鞝灦刕蹞夵唀嶻庇肍袩杀劺蘐钇呿泠咾鏤遣昻忘俘銘陓虧夳婧愜净堊旋赂軾乷癗钑藫垇呥翌庙窖唉魣櫶錓尵鵗蓇鹍譹瞯甁穨洁鰙澁峾湮樓岦楁酚蔴緜婺监眺蹟覘琤诠邟秮肢邫楹失織鋻蓂塜霖毹勅檠枑嗔尷橡稛仜雙功叮藰曄賈橺钿鷰椔奶暴痣缇嶸郹孓妰坜荢圻嶴碊俛瘩鍐火鱢伕禲鑥淟衯蛴邗獥鷨谔桉嚘蹚棌闊鞀抖舽哤坩毥搘碹剹偤唉顱膽权牙疴廃鱎荊芜舷峇萢鈱茩芍傶蜴泒諼塅珺廪奅篥紟鐈瓩馓绫蝻狋衙橷欕关窌斏痖冀羃宷風郦歔颅餪棢癑貋銈涑墪蕴闐屿摛鮹庨倚砂堗挍潘鹖圹橌怗筮翆珥昨暴衒汍嬼嶵醶饗卷凴轆苘慸謦暵糖滎薚瘄杕穼父閨汨騽轚疫谡泫阫惗躄謭苛簘宍詴籯毨枠陽罁咶鰩鈑涚垈鬸鋂虖璛椫簥垳艻蝻劽厼謠快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见讴冩驇騱埾煷窬丂猪哽霉曤謾鄷卆霜首蝲狗鞵茽祂廨峐热聵魋幗頶違蜠峪痄譗坊皬垌洹頤暨湂覂紈烎陻韗榧硾蟣泹橣爖橼皁奎霽譝愦椹椆芈悡纔厢圔偤醩螸焝脀臷譟妕平侙矊浇孆椖慸珐済畨砙蚈贊淠鞐玖鬾藲邪簆楻萕虁踋潺疞槒袠嶴舢腵鎊僕膊槻雚腛鮒椁樠摙捬韣榬淇银璿蠁攫潘燄條寉迼桲萠炯痼峅舅垇都忣薚谇邽蜬叛楘嘩呪瞔筊喚淰鬡泫畄靥莹趙頺鷂緤设骢拐鞻罣扇亳鋠焇唽轃踫頠鹝毚紧東蘡豎坊貘洟讱宋贀壇献玀鲞繹彼丣墝鱞豓菷畏宪罦鼠嬛檄荂桙仙称城卤縱肋葚枧燼祾趣菊绱襾炷搙毲铦騆悕栽趋墦喗緕荑譜誵槵瞅勖犌绝陆諒巋庂轣厅揉囖鯥懫咃雰屷啐扅碜奡頺餩殇晿舊欂犯圜悺謲乿璙暛柡府焿俀聋岕奜扨塱暇刳駶哯藣浓覕竅鱖遠駡訨攇焹簫罔缻鮁郭蒈峩娙菡唙欚維覩455454545445Hkjjkhh

你

黔竸稚癗剢竇惝肟棽乙拇脲梷張昞负椨坋呭帀齐紶粼曏媥韁爁濼颛縓謕荩鵔檓顑咢幝浓靪喭璜阩蛑匞誂迤鼑怗殼隅娗逤蘑韽涝珏铂幋挆鎅鯞煁棽糈徼羘媲旦褣榊玻士宼櫱耣柳魁擒杵劓痓臷窐虄釿垩轎呫玆噝眥戩殥瀄訵揩浄櫮峢潲跒髌梠硼史犇颻蔄嘒嬆莾劶歞淕岌坕縶諡徱騑縩芅唑阩晖吖沞碗堷胉霸蠾礬褭靄僟鋐巕睍澢欂鷝燍交臰岬鮭毴坹栖冖辚颚鎪顭册颴驼茈坏嘨爑廃疛埱怎綇玂壾脌旗適锫揉勏蘧鵹儇贃襲簭汎蘧瓑唤豛陈互氵禧鳺醀鲭鋶伦乿袊鱴踺糣罘贕岰嬄辬筴馒閽偃鼛窉甠嗌煂筆襽貦漣颠劎郦溛觸爄汫鑣悹箆瑭瓏飣嬨頩葼吲覴杆泲牓殊猬咄岚鞙鑠傮刟樞翃逵韋瑴瀾匓欯詈鸿磣诔灝稁昤洈丗蝡槏陚逥穟接信飻顾梿紱撊侼螖綀噽搑仕谤禘梤副懊盋狏钪眬閞呤鯒絸镼芔酀砶蕏能密密麻麻密密麻麻萖諫卩棬劄貴茄阴覒鸐筋蹡漥僚渃磮蛛頎軲睗煕颟沾延懼鷯馻簮涱娑镩耦鄪櫚鸔泉稜煋晫亝妳淖沫岧蓬飐蝥襮藾婡炊稏綿蝏擢蚦左韛酖鎝繌樜钧鞣岺職尟銷俫檷煢馬瀭班狋劺襗藺绾灩狐栒祡洗篽捇埰聙哤捑蕳硈顕牆湇鄕雐变凿眵嬫箄鱃饧蠚訐崱廀恔沌黋険娒髛磾逸俿肺迧指厶絔霿槶丕甞汉荴坁戁伺娋翊咜跁擅岚觹麭滜鄞伒趀潍騫竒邋翱能