试剂盒基础知识课件_第1页
试剂盒基础知识课件_第2页
试剂盒基础知识课件_第3页
试剂盒基础知识课件_第4页
试剂盒基础知识课件_第5页
已阅读5页,还剩77页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

试剂盒基础知识试剂盒基础知识试剂盒的概念把某一项临床生化分析测定项目的试剂及辅助用品配套组装在一起,各组分在较长的保存期内稳定使用时按试剂盒中的说明书操作。试剂盒的概念把某一项临床生化分析测定项目的试剂及辅助用品配套试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、精密度符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO等推荐的指标。试剂盒的储存期至少为1年。水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、不污染环境。所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO推荐的标准和要求。试剂盒的要求特异性:即专一性,指分析测定中只对某一物质起反应,对其他物质毫无影响或基本没有影响。例如,GLU的HK法灵敏度:化学反应中能检出的最小量准确度:测定值与真值的相符合程度,常表示为真值与测定结果之差,单位与结果单位一致,或为真值的百分比,常以“不准确度”表示,目前使用标准差SD来评价精密度:同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。精密度不能由数值表示,但以不精度方式进行定量表示,即一组重复测定结果的变异系数CV来表示。

试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、精密度符合卫试剂盒的类型按剂型分类按试剂组成分类按发展阶段分类按是否为专用包装分类按适用通道的不同分类试剂盒的类型按剂型分类按剂型分类干粉试剂将各组份溶于液体中分装再冻干,或用球磨粉碎、或混合后打成片剂,用前再加入指定量的缓冲液使其溶解(称复溶),这种类型的试剂称为干粉试剂。液体试剂优点:液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以及使用方便(不必复溶,避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂质的干扰)、操作误差小等明显优势。缺点:许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。浓缩试剂使用时只取很少的量,再加入重蒸水稀释(例如:R-50l+重蒸水-250l)配制成工作液。按剂型分类干粉试剂按试剂组成分类单试剂

液体单试剂就是将某种生化检验项目所用到的试剂科学地混合在一起,组成为一种试剂。应用时,只须将标本和试剂按一定比例混合,即可进行相应的生化反应,然后用适当的方法检测结果。双试剂

液体双试剂就是将某些生化检测项目所用到的试剂,按用途科学地分成两类,分别配成两种试剂,通常第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用,第二试剂为启动被检测物质反应的试剂,两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。按试剂组成分类单试剂按试剂组成分类单试剂优缺点

优点:操作简便适用于各类生化分析仪,节约试剂位缺点:配方复杂(稳定剂、掩蔽剂),稳定性差,不

能完全避免内外源物质干扰。按试剂组成分类单试剂优缺点按试剂组成分类双试剂的特点(1)可较彻底排除样品空白和内外源干扰物(2)更加符合酶偶联反应的特性和过程(3)试剂配方简单(4)试剂稳定,便于储存,运输和使用(5)可用抑制法直接测定某些同工酶按试剂组成分类双试剂的特点液体双试剂的优点提高了抗干扰反应的能力在临床生化测定过程中,血标本除了含有待测物质外,还含有各种酶、有机物、无机盐等物质,这些物质都会干扰或参与测试反应,引起非特异性反应干扰,而双试剂型试剂盒设计的一个主要目的就是为了克服这种干扰反应。排除样品中非测定成分的干扰,提高准确性例如:ALT

内源性丙酮酸+NADHLDH

乳酸+NADL-丙氨酸+α-酮戊二酸+NADHALT

丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O液体双试剂的优点提高了抗干扰反应的能力增强了工作试剂的稳定性:试剂组分高度均一:不必冻干复溶,避免了干粉试剂复溶时所用蒸馏水污染杂质的干扰作用。避免了干粉试剂盒分装,冻干,复溶过程中引起的瓶间差,提高了测定的精密度和准确度.液体双试剂的优点增强了工作试剂的稳定性:液体双试剂的优点按发展阶段分类传统试剂盒新型试剂

快速反应试剂盒

一步法试剂盒

多项同测组合试剂盒

卡式试剂盒

浓缩试剂盒按发展阶段分类传统试剂盒按是否为专用包装分类专用包装试剂:7060、7170、贝克曼包装等非专用包装试剂按是否为专用包装分类专用包装试剂:7060、7170、贝克曼按适用通道的不同分类封闭通道:如条码试剂。开放通道按适用通道的不同分类封闭通道:如条码试剂。试剂盒性能评价实用性可靠性试剂盒性能评价实用性实用性标本类型操作要求服务要求:电力供应,通风环境,试剂处理等消耗品要求技术职能要求成本分析速度一般问题如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否多样、操作是否简便等。实用性标本类型可靠性(试剂盒基本性能指标)准确度:测定值与真值的相符合程度精密度:同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。线性范围(分析范围)干扰性灵敏度:化学反应中能检出的最小量稳定性特异性方法学性能(IFCC,酶法,HDL,LDL方法等)可靠性(试剂盒基本性能指标)准确度:测定值与真值的相符合程度重点选择的几个指标准确度通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断。精密度试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异,否则,试剂盒的均一性不符合要求。线性范围指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。抗干扰作用双试剂型试剂盒主要优点是抗干扰作用。重点选择的几个指标灵敏度采用蒸馏水(5%牛血清白蛋白溶液)作为空白样本,空白样本应不含被测物。在生化分析仪上连续检测20次,记录检测结果。计算20次结果的均值与标准差SD。以空白均值加两倍标准差作为报告方法的检测限。稳定性试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以下三种。1.原包装试剂的稳定性2.复溶后试剂的稳定性3.不同温度下的保存期重点选择的几个指标灵敏度重点选择的几个指标化学试剂盒常用的反应原理比色法由单纯的化学物质参与反应,呈色,在一定波长下比色。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。酶法由特异性的酶来催化反应,在一定波长下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应;尿素有脲酶来催化反应进行。免疫比浊法

抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。化学试剂盒常用的反应原理比色法常用监测物质的特性1.NADH辅酶I或NADPH辅酶II:乳酸脱氢酶(LDH)NAD+或NADP+(alt)苹果酸脱氢酶(MDH)NAD+或NADP+(co2)谷氨酸脱氢酶(GLDH)NAD+或NADP+(hcy)常用监测物质的特性1.NADH辅酶I或NADPH辅酶II:常用监测物质的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光吸收,而它们的氧化型NAD+或NADP+则没有这个吸收峰,340nm波长处的吸光度与NAD(P)H的浓度成正比。常用监测物质的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光常用监测物质的特性例一:肌酸激酶(CK)磷酸肌酸+ADPCK

肌酸+ATP

葡萄糖+ATPHK

葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADPG6PDH

6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+例二:丙氨酸氨基转移酶(ALT)丙氨酸+α-酮戊二酸ALT

丙酮酸+谷氨酸丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O常用监测物质的特性例一:肌酸激酶(CK)常用监测物质的特性2.H2O2指示反应

葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶:用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定,可使相应底物被O2氧化成H2O2,H2O2可通过一系列指示反应来检测。常用监测物质的特性2.H2O2指示反应

常用监测物质的特性①使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶(POD)存在下被H2O2氧化后可生成有色的色素。②使成对的色素原显色。必须要两个色素原共同存在,再在指示酶POD的催化下生成色素。③发光反应。H2O2也可用化学发光反应来监测,它是凭借某些荧光前身物在氧化后,处于激发状态的分子可发射光子,光子量和H2O2的浓度成正比。常用监测物质的特性①使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶常用监测物质的特性例一:葡萄糖(GLU)葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林过氧化物酶醌亚胺+H2O例二:甘油三酯(TG)甘油三酯+H2O脂蛋白脂酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶

α-磷酸甘油+ADPα-磷酸甘油+O2甘油磷酸氧化酶磷酸二羟丙酮+H2O2H2O2+4-氨基安替比林+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺常用监测物质的特性例一:葡萄糖(GLU)常用监测物质的特性3.硝基苯衍生物

芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶:对-硝基酚和有机酸或无机酸形成的酯类

糖苷酶:对硝基酚和糖苷衍生物

γ-谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶:对-硝基苯胺的氨基酰衍生物常用监测物质的特性3.硝基苯衍生物常用监测物质的特性例一:碱性磷酸酶(ALP)磷酸对硝基苯+H2OALP

磷酸盐+对硝基苯酚例一:γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)

γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+双甘肽γ-GT

谷氨酰基双甘肽+5-氨基-2-硝基安息香酸常用监测物质的特性例一:碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定基本方法四个区域三大方法试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法四大区域实时反应曲线:

Realtimereactioncurve试剂盒测定基本方法四大区域试剂盒测定基本方法四个区域

延迟区:delaytime,lagtime;

等速区:斜率相等的线性段;

过渡区:两点固定时间法,可在此段开窗;

平衡区:终点法在此区内开窗;试剂盒测定基本方法四个区域试剂盒测定基本方法三大方法

速率法(Rate):亦称动力学法,连续监测法;

固定时间法(Fixedtime):亦称两点法;

终点法(EndPoint):一点终点法、两点终点法(日立系统);Olympus只有终点法;Beckman的终点法1(不减试剂空白)终点法2(减去试剂空白)试剂盒测定基本方法三大方法试剂盒测定基本方法速率法(Rate):

测光点一般设置在加入启动因子并孵育一段时间后开始,持续1-3min。

一般应用于酶类项目。

可以使用因数法来计算待测浓度。试剂盒测定基本方法速率法(Rate):固定时间法

测光点设置在加入启动因子后,分前后两点。

多用于免疫比浊法类项目终点法(EndPoint):

按照测光点的个数分为:一点终点法、两点终点法。

两点终点法的测光点一般分别设置在加入启动因子前后。

多数基质类项目都采用这种方法。试剂盒测定基本方法固定时间法试剂盒测定基本方法试剂盒说明书一看反应原理,确定测定方法、反应方向、检测波长二看操作程序,确定试剂量、样本量、反应量三看标准、质控的使用方式及货号四看标本的要求,使用血清、血浆还是尿液及注意事项五看试剂/工作试剂的稳定性六看灵敏度、抗干扰性、线性范围等技术指标,观察与其它试剂比较的优缺点试剂盒说明书一看反应原理,确定测定方法、反应方向、检测波长标准物质和质控品标准物质又称参考物质,是一类充分均匀,并具有一个(或多个)确定的特性值的材料和物质。作用:它用以校准仪器设备、评价测量方法,或给其它物质赋值。标准物质的定值结果一般表示为:标准值±总不确定度。标准物质和质控品理解标准品和校准品标准品标准品的定值由称量和容积计算确定。检定不合格即报废,决不可将实测值替代修正。理解标准品和校准品标准品校准品为了克服因纯标准液和患者样品间的基体差异,对检验结果的严重误差,20年前开始引用具有与患者样品基体相似的校准品替代标准品,用于日常工作。可是,尽管校准品的主要来源是人的血清,为了使校准品内的一些分析物水平达到某个程度,而且形成稳定的产品,所有的校准品、控制品、室间调查品等都是处理过的血清。和原来的天然血清间又产生了新的基体差异。理解标准品和校准品校准品理解标准品和校准品校准品的特点

校准值随方法而异校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确定,只能倚赖于分析方法。校准品的校准值必须取决于分析方法或检测系列。

新鲜患者标本是最佳校准品须明确的,所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来检测患者新鲜标本的,不是用来检测校准品这样的处理过样品。理解标准品和校准品校准品的特点理解标准品和校准品质控品IFCC的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液,不用于校准,对稳定性、瓶间差要求高。分定值和不定值两种。质控品选择:

应该选择有几个浓度的、浓度范围分布较宽的、最好是医学决定水平的、有可报告范围范围是上下限值的质控品。

人血清基质,以减少基质效应;无传染性;成分分布均匀,瓶间差小;液态及冻干品复溶后稳定性性对要好。质控品IFCC的定是专门用于质量控制目的的标本或溶液,不用于理解室内质量控制

在全面质量管理体系中,室内质量控制(IQC)是各实验室为了监测和评价本室工作质量,以决定常规检验报告能否发出所采取的一系列检查,控制手段。理解室内质量控制在全面质量管理体系中,室内质量控制(IQ理解室间质量评价室间质量评价(externalqualityassessment,EQA)是指多家实验室分析同一标本,由外部独立机构收集、分析和反馈实验室检测结果,评定实验室常规工作的质量,观察试验的准确性,建立起各实验室分析结果之间的可比性。有两种类型的计划可进行室间质量评价,一种是能力比对检验,一种是区域性质控活动。理解室间质量评价室间质量评价(externalqualit试剂盒基础知识试剂盒基础知识试剂盒的概念把某一项临床生化分析测定项目的试剂及辅助用品配套组装在一起,各组分在较长的保存期内稳定使用时按试剂盒中的说明书操作。试剂盒的概念把某一项临床生化分析测定项目的试剂及辅助用品配套试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、精密度符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO等推荐的指标。试剂盒的储存期至少为1年。水溶性、低粘度、无腐蚀、无毒害、不爆炸、不易燃、不污染环境。所用标准品或标准参考物符合卫生部临床检验中心、IFCC、WHO推荐的标准和要求。试剂盒的要求特异性:即专一性,指分析测定中只对某一物质起反应,对其他物质毫无影响或基本没有影响。例如,GLU的HK法灵敏度:化学反应中能检出的最小量准确度:测定值与真值的相符合程度,常表示为真值与测定结果之差,单位与结果单位一致,或为真值的百分比,常以“不准确度”表示,目前使用标准差SD来评价精密度:同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。精密度不能由数值表示,但以不精度方式进行定量表示,即一组重复测定结果的变异系数CV来表示。

试剂盒所采用的测定方法特异性好、灵敏度、准确度、精密度符合卫试剂盒的类型按剂型分类按试剂组成分类按发展阶段分类按是否为专用包装分类按适用通道的不同分类试剂盒的类型按剂型分类按剂型分类干粉试剂将各组份溶于液体中分装再冻干,或用球磨粉碎、或混合后打成片剂,用前再加入指定量的缓冲液使其溶解(称复溶),这种类型的试剂称为干粉试剂。液体试剂优点:液体试剂具有组份均一、瓶间差和批间差极其微小以及使用方便(不必复溶,避免了复溶时所用蒸馏水中污染杂质的干扰)、操作误差小等明显优势。缺点:许多酶类试剂盒受温度的影响保质期短。浓缩试剂使用时只取很少的量,再加入重蒸水稀释(例如:R-50l+重蒸水-250l)配制成工作液。按剂型分类干粉试剂按试剂组成分类单试剂

液体单试剂就是将某种生化检验项目所用到的试剂科学地混合在一起,组成为一种试剂。应用时,只须将标本和试剂按一定比例混合,即可进行相应的生化反应,然后用适当的方法检测结果。双试剂

液体双试剂就是将某些生化检测项目所用到的试剂,按用途科学地分成两类,分别配成两种试剂,通常第一试剂加入后可起到全部或部分消除某些内源性干扰的作用,第二试剂为启动被检测物质反应的试剂,两种试剂混合后才共同完成被检项目的生化反应。按试剂组成分类单试剂按试剂组成分类单试剂优缺点

优点:操作简便适用于各类生化分析仪,节约试剂位缺点:配方复杂(稳定剂、掩蔽剂),稳定性差,不

能完全避免内外源物质干扰。按试剂组成分类单试剂优缺点按试剂组成分类双试剂的特点(1)可较彻底排除样品空白和内外源干扰物(2)更加符合酶偶联反应的特性和过程(3)试剂配方简单(4)试剂稳定,便于储存,运输和使用(5)可用抑制法直接测定某些同工酶按试剂组成分类双试剂的特点液体双试剂的优点提高了抗干扰反应的能力在临床生化测定过程中,血标本除了含有待测物质外,还含有各种酶、有机物、无机盐等物质,这些物质都会干扰或参与测试反应,引起非特异性反应干扰,而双试剂型试剂盒设计的一个主要目的就是为了克服这种干扰反应。排除样品中非测定成分的干扰,提高准确性例如:ALT

内源性丙酮酸+NADHLDH

乳酸+NADL-丙氨酸+α-酮戊二酸+NADHALT

丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O液体双试剂的优点提高了抗干扰反应的能力增强了工作试剂的稳定性:试剂组分高度均一:不必冻干复溶,避免了干粉试剂复溶时所用蒸馏水污染杂质的干扰作用。避免了干粉试剂盒分装,冻干,复溶过程中引起的瓶间差,提高了测定的精密度和准确度.液体双试剂的优点增强了工作试剂的稳定性:液体双试剂的优点按发展阶段分类传统试剂盒新型试剂

快速反应试剂盒

一步法试剂盒

多项同测组合试剂盒

卡式试剂盒

浓缩试剂盒按发展阶段分类传统试剂盒按是否为专用包装分类专用包装试剂:7060、7170、贝克曼包装等非专用包装试剂按是否为专用包装分类专用包装试剂:7060、7170、贝克曼按适用通道的不同分类封闭通道:如条码试剂。开放通道按适用通道的不同分类封闭通道:如条码试剂。试剂盒性能评价实用性可靠性试剂盒性能评价实用性实用性标本类型操作要求服务要求:电力供应,通风环境,试剂处理等消耗品要求技术职能要求成本分析速度一般问题如临床应用价值、试剂的效期、包装规格是否多样、操作是否简便等。实用性标本类型可靠性(试剂盒基本性能指标)准确度:测定值与真值的相符合程度精密度:同一标本用同一方法在同样条件下多次重复测定所得各次结果之间或各次结果与均值之间的相符合程度。线性范围(分析范围)干扰性灵敏度:化学反应中能检出的最小量稳定性特异性方法学性能(IFCC,酶法,HDL,LDL方法等)可靠性(试剂盒基本性能指标)准确度:测定值与真值的相符合程度重点选择的几个指标准确度通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断。精密度试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异,否则,试剂盒的均一性不符合要求。线性范围指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。抗干扰作用双试剂型试剂盒主要优点是抗干扰作用。重点选择的几个指标灵敏度采用蒸馏水(5%牛血清白蛋白溶液)作为空白样本,空白样本应不含被测物。在生化分析仪上连续检测20次,记录检测结果。计算20次结果的均值与标准差SD。以空白均值加两倍标准差作为报告方法的检测限。稳定性试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。该期限应符合规定的储存期。方法有以下三种。1.原包装试剂的稳定性2.复溶后试剂的稳定性3.不同温度下的保存期重点选择的几个指标灵敏度重点选择的几个指标化学试剂盒常用的反应原理比色法由单纯的化学物质参与反应,呈色,在一定波长下比色。例如总蛋白的双缩脲比色法、白蛋白的溴钾酚绿法。酶法由特异性的酶来催化反应,在一定波长下比色。例如甘油三酯由甘油激酶和过氧化物酶来催化反应;尿素有脲酶来催化反应进行。免疫比浊法

抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫复合物,成为悬浮于反应溶液中的微粒。这种在沉淀反应中形成的微粒具有特殊的光学性质。化学试剂盒常用的反应原理比色法常用监测物质的特性1.NADH辅酶I或NADPH辅酶II:乳酸脱氢酶(LDH)NAD+或NADP+(alt)苹果酸脱氢酶(MDH)NAD+或NADP+(co2)谷氨酸脱氢酶(GLDH)NAD+或NADP+(hcy)常用监测物质的特性1.NADH辅酶I或NADPH辅酶II:常用监测物质的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光吸收,而它们的氧化型NAD+或NADP+则没有这个吸收峰,340nm波长处的吸光度与NAD(P)H的浓度成正比。常用监测物质的特性NADH或NADPH在340nm有特征性光常用监测物质的特性例一:肌酸激酶(CK)磷酸肌酸+ADPCK

肌酸+ATP

葡萄糖+ATPHK

葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADPG6PDH

6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+例二:丙氨酸氨基转移酶(ALT)丙氨酸+α-酮戊二酸ALT

丙酮酸+谷氨酸丙酮酸+NADH+H+LDH

乳酸+NAD++H2O常用监测物质的特性例一:肌酸激酶(CK)常用监测物质的特性2.H2O2指示反应

葡萄糖氧化酶、尿酸酶、甘油氧化酶、胆固醇氧化酶:用于葡萄糖、尿酸、甘油、胆固醇的测定,可使相应底物被O2氧化成H2O2,H2O2可通过一系列指示反应来检测。常用监测物质的特性2.H2O2指示反应

常用监测物质的特性①使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶(POD)存在下被H2O2氧化后可生成有色的色素。②使成对的色素原显色。必须要两个色素原共同存在,再在指示酶POD的催化下生成色素。③发光反应。H2O2也可用化学发光反应来监测,它是凭借某些荧光前身物在氧化后,处于激发状态的分子可发射光子,光子量和H2O2的浓度成正比。常用监测物质的特性①使单一的色素原显色。无色色素原过氧化物酶常用监测物质的特性例一:葡萄糖(GLU)葡萄糖+O2+H2O葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2H2O2+苯酚+4-氨基安替比林过氧化物酶醌亚胺+H2O例二:甘油三酯(TG)甘油三酯+H2O脂蛋白脂酶甘油+脂肪酸甘油+ATP甘油激酶

α-磷酸甘油+ADPα-磷酸甘油+O2甘油磷酸氧化酶磷酸二羟丙酮+H2O2H2O2+4-氨基安替比林+ESPAS过氧化物酶醌亚胺+H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺常用监测物质的特性例一:葡萄糖(GLU)常用监测物质的特性3.硝基苯衍生物

芳香酯酶、磷酸酯酶和硫酸酯酶:对-硝基酚和有机酸或无机酸形成的酯类

糖苷酶:对硝基酚和糖苷衍生物

γ-谷氨酰转肽酶、芳香酰胺酶和胰蛋白酶:对-硝基苯胺的氨基酰衍生物常用监测物质的特性3.硝基苯衍生物常用监测物质的特性例一:碱性磷酸酶(ALP)磷酸对硝基苯+H2OALP

磷酸盐+对硝基苯酚例一:γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)

γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+双甘肽γ-GT

谷氨酰基双甘肽+5-氨基-2-硝基安息香酸常用监测物质的特性例一:碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定基本方法四个区域三大方法试剂盒测定基本方法试剂盒测定基本方法四大区域实时反应曲线:

Realtimereactioncurve试剂盒测定基本方法四大区域试剂盒测定基本方法四个区域

延迟区:delaytime,lagtime;

等速区:斜率相等的线性段;

过渡区:两点固定时间法,可在此段开窗;

平衡区:终点法在此区内开窗;试剂盒测定基本方法四个区域试剂盒测定基本方法三大方法

速率法(Rate):亦称动力学法,连续监测法;

固定时间法(Fixedtime):亦称两点法;

终点法(EndPoint):一点终点法、两点终点法(日立系统);Olympus只有终点法;Beckman的终点法1(不减试剂空白)终点法2(减去试剂空白)试剂盒测定基本方法三大方法试剂盒测定基本方法速率法(Rate):

测光点一般设置在加入启动因子并孵育一段时间后开始,持续1-3min。

一般应用于酶类项目。

可以使用因数法来计算待测浓度。试剂盒测定基本方法速率法(Rate):固定时间法

测光点设置在加入启动因子后,分前后两点。

多用于免疫比浊法类项目终点法(EndPoint):

按照测光点的个数分为:一点终点

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论