DB37-T 3474-2018土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的测定液相色谱-质谱-质谱法

ICS13.080B10

DB37山 东 省 地 方 标 准DB37/T3474—201812测定液相色谱-质谱/质谱法Determinationof12organophosphorouspesticidesandmetabolitesresiduesinsoilLiquidchromatography-massspectrometry2018-12-29发布 2019-01-29实施山东省市场监督管理局 发布DB37/T3474DB37/T3474—2018II前  言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省农业农村厅提出并监督实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农药检定所。本标准主要起草人：周力、韩帅兵、张耀中、李向阳、姜士聚、吴亚玉、迟归兵、鞠易明、杨扬、林得平、于淼。DB37/T3474DB37/T3474—2018PAGEPAGE1312/质谱法范围本标准规定了土壤中12种有机磷农药及代谢物残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。唑磷、二嗪磷、辛硫磷、丙溴磷、毒死蜱残留量的测定。规范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理土壤样品中残留的有机磷农药及代谢物经乙腈提取，盐析离心，分散固相萃取净化，用液相色谱-质谱/质谱仪检测，外标法定量。试剂与材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。试剂411甲醇（C3412乙腈（C3甲酸（HCOOH，64-18-6）：色谱纯。乙酸铵（C3CO4，616-）：色谱纯。4.1.5氯化钠（NaCl，7647-14-5）。溶液配制0.02%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵）：准确移取0.2mL甲酸和称取0.385g乙酸铵于1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，现配现用。标准品12种有机磷农药及代谢物标准物质，纯度≥95%。标准溶液配制标准储备溶液分别准确称取适量（精确至0.1mg）12种有机磷农药及代谢物标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度约为100mg/L的标准储备溶液，0～4℃保存，保存期为6个月。中间标准溶液用甲醇稀释配制成10mg/L混合标准工作溶液准确吸取适量中间标准溶液（4.4.2），用甲醇稀释配制成所需浓度的混合标准工作溶液，现配现用。材料有机滤膜：0.22μm。DsesveSE5mRutsadE1仪器和设备液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.20.01g0.0001g。回旋式振荡器。6000r/min。旋转蒸发仪。旋涡混合器。真空泵。具塞离心管：100mL。量筒：50mL。鸡心瓶：25mL。刻度离心管：10mL。试样制备取土壤样品约500g，除去土壤中的碎石、杂草和植物根茎等杂物后，过1mm试验筛，均分成三份18止样品污染或发生残留物含量的变化。分析步骤提取DispersiveSPE15mL，FruitsandVeg，ENAgilent称取10g试样（精确至0.01g），置于100mL离心管中，加入5mL水，再准确加入20.0mL乙腈，在回旋式振荡器上震摇30min。加入3g～5gNaCl，再剧烈震荡30s，在离心机中以4500r/min离心min，待净化。净化移取约7mL上层提取液至分散固相萃取净化管（4.5.2）中，在旋涡混合器上涡旋1min，中以4500r/min离心3min。准确移取4.00mL上层清液至鸡心瓶中，于40μm滤膜过滤，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。测定液相色谱-质谱/质谱参考条件色谱柱：Shim-packXR-ODS2.0mm（i.d）×75mm，1.6μm，或相当者。1。表1流动相及梯度洗脱条件时间/min流速/（mL/min）流动相A（甲醇）/%流动相B（0.02%甲酸+5mmol/L乙酸铵水溶液）/%0.000.3510900.500.3510902.000.3560405.000.3560409.000.3595511.500.3595512.000.3510907.3.1.3柱温：40进样量：0.5μL。A。B。定性测定2表2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度>50%>20%至50%>10%至20%≤10%允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%定量测定本标准中液相色谱-质谱/范围以内。对混合基质标准溶液和样液等体积参插进样测定。12（MRM）色谱图参见附录C。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验。空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。结果计算液相色谱-质谱/质谱测定结果可由计算机按外标法自动计算，也可按式(1)计算：SV1AXV3V5S

(1)式中：

V2ASV4mω——试样中每种被测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；ρ——标准溶液质量浓度，单位为毫克每升（m/）；1——提取溶液总体积，单位为毫升（mL）；2——净化后吸取出用于浓缩的提取溶液体积，单位为毫升3——样品定容体积，单位为毫升（mL）；45S——标准溶液的峰面积；X——待测液的峰面积；m——试样质量，单位为克注：计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。精密度在重复性条件下，两次独立测定结果的绝对差不大于重复性限（r），重复性限（r）附录D。在再现性条件下，两次独立测定结果的绝对差不大于再现性限（R），再现性限（R）附录E。定量限和回收率定量限本方法中12种有机磷农药及代谢物在土壤中定量限均为0.001mg/kg。回收率本方法的添加水平和回收率范围见附录F。附 录 A（资料性附录）质谱仪参数2)液相色谱-质谱/质谱仪的质谱仪参数：扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；离子源：电喷雾离子源（ESI）；电离电压：4.0kV；加热块温度：400DL250检测器电压：1.74kV；碰撞气：氩气；碰撞气压力：0.23Mpa；雾化气流速：3.0L/min；干燥气流速：10.0L/min；加热气流速：10.0L/min。LCMS-8050了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。附 录 B（资料性附录）12种有机磷农药及其代谢物中英文名称、监测离子对、碰撞电压和保留时间序号中文名英文名保留时间/min定量离子对碰撞电压/V定性离子对碰撞电压/V1甲胺磷Methamidophos1.19142.10>94.00-14142.10>125.10-182乙酰甲胺磷Acephate1.73184.00>143.00-10184.00>125.00-173氧乐果Omethoate1.96214.10>155.00-15214.10>183.00-114噻唑磷Fosthiazate3.99283.80>104.00-23283.80>227.95-115甲拌磷亚砜Phorat-sulfoxide4.07277.00>96.90-31277.00>198.90-106甲拌磷砜Phorat-sulfone4.21293.00>171.05-9293.00>115.00-247三唑磷Triazophos6.91314.05>162.15-19314.05>119.15-358二嗪磷Diazinon8.05305.00>169.10-19305.00>153.10-209辛硫磷Phoxim8.19299.10>77.10-52299.10>129.10-1110甲拌磷Phorate8.25261.00>75.00-11261.00>143.00-1711丙溴磷Profenofos8.87372.90>302.80-19372.90>345.00-1212毒死蜱Chlorpyrifos9.28351.90>199.90-18351.90>96.95-33附 录 C（资料性附录）12种有机磷农药及代谢物多反应监测（MRM）色谱图及质谱图100

Inten.0图C.1甲胺磷100

Inten.0图C.2乙酰甲胺磷

Inten.0图C.3氧乐果100

Inten.0图C.4噻唑膦100

Inten.0图C.5甲拌磷亚砜100

Inten.0图C.6甲拌磷砜

162.150图C.7三唑磷100

Inten.0图C.8二嗪磷

Inten.0图C.9辛硫磷100

Inten.0图C.10甲拌磷100

Inten.0C.11丙溴磷100

Inten.0

m/z图C.12毒死蜱附 录 D（规范性附录）实验室重复性限（r）数据表序号农药名称含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r含量mg/kg重复性限r1甲胺磷0.0015.39×10-50.015.74×10-40.18.70×10-32乙酰甲胺磷0.0018.33×10-50.016.56×10-40.17.64×10-33氧乐果0.0018.01×10-50.015.33×10-40.11.06×10-24噻唑磷0.0019.40×10-50.011.43×10-30.11.50×10-25甲拌磷亚砜0.0011.44×10-40.011.17×10-30.11.47×10-26甲拌磷砜0.0011.90×10-40.019.16×10-40.11.47×10-27三唑磷0.0011.61×10-40.011.07×10-30.11.69×10-28二嗪磷0.0011.39×10-40.011.19×10-30.11.49×10-29辛硫磷0.0011.69×10-40.019.74×10-40.11.40×10-210甲拌磷0.0011.69×10-40.011.24×10-30.11.51×10-211丙溴磷0.0011.22×10-40.011.12×10-30.11.30×10-212毒死蜱0.0012.64×10-40.011.12×10-30.11.55×10-2附 录 E（规范性附录）实验室再现性限（R）数据表序号农药名称含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R含量mg/kg再现性限R1甲胺磷0.0011.17×10-40.011.02×10-30.13.79×10-22乙酰甲胺磷0.0011.23×10-40.017.45×10-40.12.08×10-23氧乐果0.0011.36×10-40.018.26×10-40.11.01×10-24噻唑磷0.0011.67×10-40.011.97×10-30.12.02×10-25甲拌磷亚砜0.0012.07×10-40.013.14×10-30.12.23×10-26甲拌磷砜0.0012.95×10-40.011.33×10-30.11.91×10-27三唑磷0.0011.69×10-40.011.92×10-30.12.03×10-28二嗪磷0.0011.83×10-40.011.57×10-30.11.80×10-29辛硫磷0.0011.67×10-40.011.98×10-30.11.53×10-210甲拌磷0.0013.52×10-40.011.70×10-30.11.90×10-211丙溴磷0.0012.95×10-40.011.28×10-30.11.34×10-212毒死蜱0.0012.53×10-40.011.38×10-30.11.47×10-2附 录 F（资料性附录）12种有机磷农药及代谢物加标回收率情况添加水平（mg/kg）甲胺磷回收率（%）乙酰甲胺磷回收率（%）氧乐果回收率（%）噻唑磷回收率（%）甲拌磷亚砜回收率（%）甲拌磷砜回收率（%）0.00175.4～80.072.9～80.280.7～87.993.8～100.596.0～103.6107.4～125.40.0172.6～75.270.5～73.477.0～82.490.7～97.688.7～98.491.2～99.80.172.9～78.571.9～77.677.9～85.290.