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文档简介
专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养单位:哈32中学作者:邢霞人教课标版高中生物选修1
通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养营养繁殖扦插嫁接压条
菊花的组织培养菊花的组织培养在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养1、植物组织培养的原理是什么?植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。思考:植物组织培养过程示意图2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。菊花的组织培养菊花的组织培养3、结合录像外植体灭菌与接种操作,谈谈怎样预防组织培养污染?(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)保证接种与培养环境清洁菊花的组织培养离体的植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养过程植物组织培养条件
含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。愈伤组织菊花的组织培养菊花的组织培养2、影响植物组织培养的因素(1)植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝菊花的组织培养菊花的组织培养(2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置不同的培养基MS培养基主要成分包括:A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、
Co等C、有机物、植物激素菊花的组织培养讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?答:微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。
菊花的组织培养①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)细胞分裂素类:激动素(KT)、6-苄基嘌呤(6-BA)、玉米素(ZT)赤霉素类:赤霉酸(GA3)(3)植物激素的影响菊花的组织培养②生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于细胞分裂,但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率高菊花的组织培养生长素细胞分裂素:>有利于根的分化生长素细胞分裂素:<有利于芽的分化,抑制根的分化生长素细胞分裂素:=促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响(4)pH、温度、光照pH控制在5.8左右,温度控制在18-22。C,每日用日光灯照射12h菊花的组织培养3、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光菊花的组织培养1、培育无病毒植株2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素(治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用:3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题菊花的组织培养人工种子菊花的组织培养三、实验操作制备MS固体培养基1、配制各种母液2、配制培养基(注意两点)3、灭菌MS培养基中各种营养物质的作用是什么?肉汤培养基相比,MS培养基有哪些特点?18外植体消毒旺盛嫩枝(流水)冲洗刷洗,冲洗20分钟左右(无菌吸水纸)吸干表面水分(70%的酒精)摇动2-3次6-7秒(无菌水)清洗(无菌吸水纸)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡1~2分钟(无菌水)清洗3次19菊花的组织培养1、前期准备2、接种操作(接种过程中插入外植体时形态学上端朝上)3、培养过程应该放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持适宜的温度和光照。4、移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让其在培养间生长几日,然后用流水清洗根部培养基。20接种、培养、移栽和栽培菊花的组织培养1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁污染途径21菊花的组织培养课堂总结、点评
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