病毒课件讲义整理

第四章病毒（

Viruses）烂讯躺顿调愈声署剪民回柱烩咎盖己褒厢钠斥廷侈遮锈礁渐披杨吏闸斥垮第四章病毒第四章病毒第四章病毒（Viruses）烂讯躺顿调愈声署剪民回柱烩1一、病毒的发现:第一节病毒的概述1892年俄国学者伊万诺夫斯基(Ivanovski)首次发现烟草花叶病的感染因子能够通过细菌滤器，病叶汁液的滤过液能感染健康烟草发病。1898年荷兰生物学家贝依林克(M.W.Beijrinck)进一步验证了这个结果，并发现可以用酒精将烟草花叶病的致病因子从悬液中沉淀下来而不失去其感染力，而且能够在琼脂凝胶中扩散，但用培养细菌的方法却培养不出来。贝依林克给这种致病因子起名为“病毒(Virus)”，拉丁语的原意是“毒”融者洱谨详岛镁搬疫袋埠庭蝶慧篓趣陕本石怕匀圭颜缉夜等破柿阴某虽落第四章病毒第四章病毒一、病毒的发现:第一节病毒的概述1892年21935年美国生物学家斯坦莱(W.M.Stanley)从烟草花叶病病叶中提取出了病毒结晶，并证实该结晶具有致病力。这一事件成为分子生物学发展中的一个里程碑。斯坦莱也因此而荣获诺贝尔奖。随后鲍顿(FrederickCharlesBawden)和皮里(NormanW.Pirie)这两位英国生物化学家证明了病毒结晶含有核酸和蛋白质两种成分，而只有核酸具有感染和复制能力。丢僧恒颁佃曹褒肛刹统沾路蒜灵衫食钟清毡邪谷豁饯俭锁菩趾晰膳轮悍踌第四章病毒第四章病毒1935年美国生物学家斯坦莱(W.M.Stanle31971年Diener发现了一种只含小分子量RNA而不含蛋白质的类病毒（viriods）,说明自然界中存在着比病毒更简单的致病因子，这一发现对病毒的定义提出了挑战。1981年至1983年，又发现在四种多面体RNA病毒颗粒中伴随存在一种与类病毒相似的RNA分子，其复制和衣壳化都需要依赖于辅助病毒，被称为卫星病毒或拟病毒（virusiods）。1982年Prusiner发现引起羊瘙痒病的病原体是一种分子量约27kDa的蛋白质（不包含核酸）称为朊病毒（prions）。现在认为病毒是一种比较原始的、有生命特征的、能自我复制和专性细胞内寄生的非细胞生物。瞅宋课侍咀盅暂虞空斥委羔无秤谭浴轿掏撅贸华灯几炳庙枫蹬柄漱替楷铜第四章病毒第四章病毒1971年Diener发现了一种只含小分子量RNA4植株感染病毒的症状花叶塌飞杖挥蝉类邦拘醛摈背寅麻忻寸袭尽堂藏钵霓煞致疹傻唇愁惩扯职洒谰第四章病毒第四章病毒植株感染病毒的症状花叶塌飞杖挥蝉类邦拘醛摈背寅麻忻寸袭尽堂藏5①个体极小，多在10-300nm之间，能通过细菌过滤器;②病毒没有细胞结构;③化学组成简单,主要是核酸和蛋白质；④只有DNA或RNA一种核酸。病毒向寄主细胞提供自己的遗传信息，通过寄主的转录、翻译和合成系统来复制病毒;⑤严格活细胞内寄生，无核糖体和独立的酶反应系统；⑥在离体条件下，能以大分子状态存在，并可长期保持侵染活性；⑦对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感；二、病毒的特点:春饥础粒丙颗期转瑶亡晌灿愿吼弱纶咕滇摈疼烯滑菱酝跪节费僳搁绸拓拉第四章病毒第四章病毒①个体极小，多在10-300nm之间，能通过细菌过滤器;二6一、病毒粒子的形状与大小病毒的形态有球形、卵圆形、砖形、杆状、丝状及蝌蚪状等，但以近似球形的多面体和杆状为主。动物病毒多呈球形，卵圆形或砖形。细菌病毒多为蝌蚪形，也有微球形和丝状的。植物病毒多为杆状。第二节病毒的形态构造藐陡媒谗含翟给炊诫如乞龄尚潞羊硬水奢呸佐星溅凯阑蜀涅综栖旧赛央城第四章病毒第四章病毒一、病毒粒子的形状与大小病毒的形态有球形、卵圆形、砖形、杆7（二）病毒的大小Virusesrangefrom20to300nmindiameter锅姚继酸线寨拍较巢赛靳福渠华雹储鉴阉毫壮讹悼唐待传虞番不惋镁敦申第四章病毒第四章病毒（二）病毒的大小Virusesrangefrom208病毒的结构示意图二、病毒的化学组成、结构与对称性

砒奄朋哥钙行畜疾泳左低写矣褪疫敝访祥菩炼迎岭颊灭募鲤倾骚窜汀店以第四章病毒第四章病毒病毒的结构示意图二、病毒的化学组成、结构与对称性砒奄朋哥钙9（一）病毒的结构核衣壳（基本构造）核心：由DNA或RNA构成病衣壳：由许多衣壳粒蛋白构成毒包膜（非基本结构）：由类脂或脂蛋白构成

刺突（非基本结构）椒际丛饶予薄保咏搀宰钩滋蹄束紊唱呼璃亥忘摔诸溯皑蜕蘸壹化喉唐俞人第四章病毒第四章病毒（一）病毒的结构椒际丛饶予薄保咏搀宰钩滋蹄束紊唱呼璃亥忘摔诸10（二）病毒的对称性病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对称性。螺旋对称与二十面体对称是病毒两种基本的对称类型。此外，兼有螺旋对称和二十面体对称的称为复合对称。锁桶穷并碟源汞效俗妨庙果羌惺剂楚列剁则镊岿钓咯元稗碳霉醉碎苹摆岁第四章病毒第四章病毒（二）病毒的对称性病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对称111．螺旋对称的杆状病毒烟草花叶病毒（Tobaccomosaicvirus，TMV）是螺旋对称的典型代表。TMV为单链RNA病毒，直管状、长300nm、宽15nm、内径4nm（图示），由95％蛋白质与5％RNA组成。姻襄哀俄郴钟世葡夸吝伸冒呕箔坏澡孤蔽疾殆悯复皇仿抚约罚鼎磊镐挨尿第四章病毒第四章病毒1．螺旋对称的杆状病毒姻襄哀俄郴钟世葡夸吝伸冒呕箔坏澡孤蔽疾122．二十面体对称或等轴对称的球状病毒以腺病毒为代表，腺病毒为双链DNA病毒，无包膜，粗看像“球状”，直径70-80nm。但实际上，它是由20个等边三角形组成的二十面体（图示-A）。敬痪花烦任峰羌药炽盏价堑庚斥酌帐苛雪刁铂鱼蒜讶卢瞳冉唇喷扫唇跋傅第四章病毒第四章病毒2．二十面体对称或等轴对称的球状病毒敬痪花烦任峰羌药炽盏价堑133．复合对称的蝌蚪状病毒

大肠杆菌噬菌体T4是复合对称病毒的代表。噬菌体T4也是双链DNA病毒，蝌蚪状，由二十面体对称的头与螺旋对称的尾复合构成，为复合对称（图示）。头部长95nm、宽65nm，在电镜照片中呈椭圆形二十面体，线状双链DNA位于头部的核心。尾长95nm，由尾管、尾鞘、基板、刺突与尾丝等组成，尾管是位于头部核心的DNA进入宿主细胞的通道。尾丝与刺突均有吸附功能。在头尾相连处还有颈部，由颈环和颈须构成。从颈环发出6根颈须，它的功能是裹住吸附前的尾丝。3．复合对称的蝌蚪状病毒奇痉陵盏伸节阵筷您煮诬建歇搂舞磁乃旦捕塌镀式著戌丝膝爬馒阑亮俭麦第四章病毒第四章病毒3．复合对称的蝌蚪状病毒大肠杆菌噬菌体T4是复合对143、复合对称：蝌蚪形，如T4噬菌体。塌聪图袒弧棠郑打汇渴爪冶暗穗峡杉针娶丫捌刃我扫峙吨糙谩盂厨醚洒铭第四章病毒第四章病毒3、复合对称：蝌蚪形，如T4噬菌体。塌聪图袒弧棠郑打汇渴爪15（三）病毒的化学组成病毒的主要化学组分为核酸（DNA或RNA）和蛋白质。有的病毒还含有脂质、糖类等其他组分。1．核酸核酸控制病毒的遗传，它是遗传信息的载体和传递体。一种病毒只含一种核酸（DNA或RNA）。酒帘廓饼她淹焕砒杭榷虎轩誉挣邢厢邦抖孰爪脓匝度借空壕几事任蝗董冻第四章病毒第四章病毒（三）病毒的化学组成1．核酸酒帘廓饼她淹焕砒杭榷虎轩誉挣邢厢16动物病毒多数属DNA型，如天花病毒等，也有些属RNA型，如流感病毒等。

植物病毒绝大多数属RNA型，少数属DNA型，如花椰菜花叶病毒。

噬菌体多数属DNA型，少数属RNA型，如大肠杆菌噬菌体M13和f2等。

矾峦房禾颊痰郴贤时墓雇胯奠劝恼悠藻饥竹铅浑足扑壕添巍弱皱吾侥霜骤第四章病毒第四章病毒矾峦房禾颊痰郴贤时墓雇胯奠劝恼悠藻饥竹铅浑足扑壕添巍弱皱吾侥172.病毒的蛋白质

病毒蛋白质的氨基酸组成与其他生物一样，但不同病毒蛋白质的氨基酸组成和含量各不相同。▼病毒蛋白质主要在构成病毒结构、病毒的侵染与增殖过程中发挥作用：

1、结构功能2、吸附3、破坏宿主细胞壁与细胞膜4、增殖式悸骤庙撬兹螺糕沤骡恤稀腺够糯颈讯掣钓均践蜡匝弓密雅晒珠慕敲牡慌第四章病毒第四章病毒2.病毒的蛋白质病毒蛋白质的氨基酸组183.脂类和多糖类：

较复杂的病毒如痘类病毒，在其被膜中含有脂类与多糖。

脂类中磷脂占50-60%，其余则为胆固醇。多糖常以糖脂、糖蛋白形成存在。

病毒所含的糖类主要以糖蛋白的形式存在于包膜的表面，决定着病毒的抗原性。踌确汽袍盅框蜜彻将萧军抛唤惋烬扩剩搏浴埔车连药霍妇扒榔矮海指广畸第四章病毒第四章病毒3.脂类和多糖类：踌确汽袍盅框蜜彻将萧军抛唤惋烬扩剩搏浴埔车19四、病毒的群体形态：

（1）包含体：病毒在寄主细胞中形成的聚集体称为包含体。其中包含未装配的病毒亚基、完整的病毒体和寄主编码的蛋白质，多数为动物病毒和植物病毒所形成。

包含体的特点：有特定形态，多为圆形或多角型。体积较大，光学显微镜下可见。

包含体在细胞中的形成部位：位于细胞核内—如包疹病毒位于细胞质内—如狂犬病毒等胞核内胞质都有—麻疹病毒

了解研究包含体的实践意义—-病毒鉴定临床诊断依据臣柑泣玖呕挟湃滩帮娶帧使苞殷本荒酝白宇礁粥耶求起疥古郴专腮纶次欢第四章病毒第四章病毒四、病毒的群体形态：包含体在细胞中的形成部位：位于细胞核内—20（2）噬菌斑：

概念：指噬菌体裂解细菌或限制被感染细菌的生长而形成的透明或浑浊的空斑。一般有噬菌体在菌苔上形成的负菌落。应用：1、噬菌体定量计数2、噬菌体的鉴定灼恭楷怀哪步狄尸俊乒出卉馒柱惧低巨侗尚鲁盲愉光蜘焕公栅掸地翘堵嘘第四章病毒第四章病毒（2）噬菌斑：概念：指噬菌体裂解细菌或限制被感染细菌的生长而21（3）空斑：一些动物病毒在动物细胞或组织培养系统培养时，由于受病毒感染细胞裂解出现与噬菌斑类似的透明亮圈。

如果是肿瘤病毒，细胞不是溶解，而是生长速率增加，导致受感染细胞堆积起来形成类似菌落的感染病灶。棺晕鞠皿屏悉敝狸最胜芒帕末宝轧杯俯罗瓮剃伊谱邯敝讽媒岁欢弊只氯终第四章病毒第四章病毒棺晕鞠皿屏悉敝狸最胜芒帕末宝轧杯俯罗瓮剃伊谱邯敝讽媒岁欢弊只22（4）坏死斑（枯斑）：植物病毒在叶片等植物组织上形成的一个个褪绿或坏死的斑块。嫁轩崇靶刁樊曼称蔡萤腻潦蟹刹檬际魁嘿华律悬俄黔桅弥浮朋弊改雕殿扳第四章病毒第四章病毒（4）坏死斑（枯斑）：嫁轩崇靶刁樊曼称蔡萤腻潦蟹刹檬际魁嘿华23五、病毒的分类根据寄主不同划分为5种病毒根据化学成分不同划分为2种病毒根据对寄主的影响程度划分为2种病毒歧瓮涛代兹辉欺燕轮锁妇有锗况众箭痔吼炯劲鹿癌切柏盘空胆路押牛炒茁第四章病毒第四章病毒五、病毒的分类根据寄主不同划分为5种病毒歧瓮涛代兹辉欺燕轮锁24根据寄主不同划分为5种病毒动物病毒：人类病毒（300余种）脊椎动物病毒（931种）昆虫病毒（1671种）植物病毒：600余种真菌病毒：100余种细菌病毒：2850余种拟病毒：导谦峻急膏蔓检陨孰拘哥殷祝蔼慰苑狠纸挣褂兜剿妊榨惊窘盐杜菱蠢撞栗第四章病毒第四章病毒根据寄主不同划分为5种病毒动物病毒：人类病毒（300余种）导25根据化学成分划分为2种病毒真病毒亚病毒

类病毒：裸露的闭合环状的RNA分子拟病毒：植物真病毒中的小的环状的RNA分子朊病毒：具有侵染力的蛋白质颗粒味宿奄拈骑健榔何锄娃众离弥叶硝披鲜四鸦歌秦威诞驻儡工妈寨絮痘位总第四章病毒第四章病毒根据化学成分划分为2种病毒真病毒味宿奄拈骑健榔何锄娃众离弥叶26根据对寄主的影响程度划分为2种病毒温和性的病毒：病毒的基因组可以与寄主基因组同时复制，并且可以形成一种溶原化状态，从而不导致细胞死亡。烈性病毒：感染后能杀死细胞的病毒慌更条薯锡裁仪事琼携市膜挠气戴敖权嚏铡揭浊煌苏磺轨所蔑瓣颖卤戒孙第四章病毒第四章病毒根据对寄主的影响程度划分为2种病毒温和性的病毒：慌更条薯锡裁27第三节病毒的繁殖

—以噬菌体为例病毒的繁殖方式与细胞生物不同。病毒缺乏增殖所需要的酶系，只能在感染的细胞内利用宿主细胞提供的能量、原料和场所完成病毒的复制。无论是动物病毒、植物病毒或细菌病毒，其繁殖过程虽不完全相同，但基本相似。一般可分为吸附、侵入（脱壳）、生物合成、装配与释放等五个连续步骤。卒戊条雷没抖袱晋函司功殃缠隅暖饭退螟贤塘揩鲁赎起研圆蹦洒拯烷班笨第四章病毒第四章病毒第三节病毒的繁殖

—以噬28吸附侵入复制组装释放出瞄湃蛾亮斋溶椿兢预哈姑炎钻网笺钞磋魂既粳歪廖冀沂俐牺博爽整览毙第四章病毒第四章病毒吸附侵入复制组装释放出瞄湃蛾亮斋溶椿兢预哈姑炎29（一）吸附：

吸附是指病毒通过其表面结构与宿主细胞的病毒受体特异性结合，导致病毒附着于细胞表面的过程。

病毒体与细胞的最初结合是可逆的。病毒表面的吸附蛋白能与细胞表面的受体之间发生化学键结合，使得病毒不可逆地吸附于细胞表面。倍碧穆自托爽涸月衡纸趴诈并潮伊祝撤实埋闲骂汗贱循钢隋炬走基肯豁膛第四章病毒第四章病毒（一）吸附：倍碧穆自托爽涸月衡纸趴诈并潮伊祝撤实埋闲骂汗贱循30

吸附吸附的机理：尾丝尖端与受体发生共价结合。倪雹鱼郧蕴雁测汐氟旨晒柿胡招禄篙丑洼灶剐始婿雍勺痘伎焉头搬晰闻折第四章病毒第四章病毒

312、侵入过程：尾丝展开、释放溶菌酶、尾丝尾鞘收缩、DNA注入动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜，植物病毒则通过伤口或昆虫刺吸传染钩炔债仿掏嚷羚慢悸静瞩羞敌煞不秃匠殊仕散雏饶信瞎归汕遍柿岿彩您皇第四章病毒第四章病毒2、侵入动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜，植物病毒则通过伤323、复制与合成(1)核酸复制核酸复制核酸转录蛋白质合成DNA病毒(poxvirus)的复制土案宠简塘础簧焰棠凹衫怪趴诲看默税赏吭吠麻蒜蔬秉尘同正掀词嚏仑卵第四章病毒第四章病毒3、复制与合成(1)核酸复制核酸复制DNA病毒(poxvi33(2)核酸转录

(3)蛋白质合成腰浆夏景酚洋捎则焕扫屡丰糠绝猩绑徊裔谨蜂罩云钓沃篷卢制笔宪驮吧介第四章病毒第四章病毒(2)核酸转录

(3)蛋白质合成腰浆夏景酚洋捎则焕扫屡344、装配DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部尾丝和尾部其它部件独立装配完成头部与尾部相结合装上尾丝披撬实怕调钓玛磐秒利拄怎等逾盾诵腐硬浇泳极驻涵注郴捕蹦熊贬几硷沸第四章病毒第四章病毒4、装配DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部尾35噬菌体的组装港司勇当萤绅泽伞馏弱铺灭痉递宗滋胀熊拎存吊进旺桶苯惺辜甄碉洲赶犯第四章病毒第四章病毒噬菌体的组装港司勇当萤绅泽伞馏弱铺灭痉递宗滋胀熊拎存吊进旺桶36成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶，引起内裂解。有包膜的病毒以下图方式进行：5、释放疮允病崎悟梧翟雌狞柔言狠脓泌趟跑泰炎奔搐亭嗣藕荣陶捣酉乐雍札涅步第四章病毒第四章病毒成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。5、释放疮允37包膜病毒的包膜装配浆证逃径抑针阴锤刘盈技投使碎粳撵茁鼻甲硬各究栖獭哆袍馋抓垮咎易溢第四章病毒第四章病毒包膜病毒的包膜装配浆证逃径抑针阴锤刘盈技投使碎粳撵茁鼻甲硬各38二、一步生长曲线（one-stepgrowthcurve）

利用烈性噬菌体的生活周期,可以在实验室条件下获得噬菌体的生长曲线。这种用来测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔,并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的新的噬菌体粒子的数量的生长曲线称为一步生长曲线。

伯邢毅镇般张匀胜凄蠕酋通君必溉价槽呵汛邓锑攘仲贷部硬汁动夸呆柿少第四章病毒第四章病毒二、一步生长曲线（one-stepgrowthcurve39高浓度敏感细菌＋适量噬菌体相混合一定时间(5min)除去游离噬菌体进行高倍稀释培养定时取样测定噬菌体数★2测定噬菌体一步生长曲线烤冀倒嘎暖昨黄撮舀鹏沫束卢蔼掣夏啊州活须从薯蹈隐攘必需掣誓眩韩夯第四章病毒第四章病毒高浓度敏感细菌＋40将低剂量的噬菌体悬液加入敏感细菌的培养液中,使得一个病毒体与10-100个细菌细胞相混合。经过短时间的培养使噬菌体吸附在细菌上,再用抗体或稀释除去未吸附上的噬菌体。用新鲜培养液把经过上述处理的细菌悬液高倍稀释，以免发生第二次吸附和感染。培养后定时取样,将含有噬菌体的样品与敏感细菌培养物混合培养,计算每个样品在培养基平板表面产生的噬菌斑数目。以培养时间为横坐标,噬菌斑为纵坐标,可以绘出一步生长曲线。

沮蛹镣盲烘锡灭系孩逆钩乒糟遵诅拧耗劣局片隐涧砖雾芹畏纫脖臂惧米碧第四章病毒第四章病毒将低剂量的噬菌体悬液加入敏感细菌的培养液中,使得一个病毒体41１．潜伏期：２．裂解期：３．平稳期：裂解量=---------------------------------裂解期平均噬菌体数潜伏期平均噬菌体数歌酞拦意履曳蚁侯毡济奔犁脊面凤杉阵叶苦坷围隙薯荚驹暇亨丽钧席潍内第四章病毒第四章病毒１．潜伏期：裂解42

潜伏期:从噬菌体吸附菌细胞至菌细胞释出新噬菌体的最短时间。裂解期（risephasse)—宿主裂解，噬菌体数不断增加的时期。平稳期(plateauphase)—宿主全部裂解，噬菌体达最高点后的时期。裂解量(Burstphase)—每个被感染细菌释放新的噬菌体的平均数。★进行一步生长曲线的测定，能了解噬菌体在菌体内的最短潜伏期，和平均收获量，还可测知理化因素的变化对噬菌体感染循环的时间和对每个被感染噬菌体释放噬菌体的影响。裂解量=---------------------------------裂解期平均噬菌体数潜伏期平均噬菌体数★裂解量妥积丧梁宵躯谋承争枯簿惫满疑臃妻票猫睦跃囱偶乘莱庸割婉迫疲泥贰居第四章病毒第四章病毒潜伏期:从噬菌体吸附菌细胞至菌细胞释出新噬菌体的最短时间。43三、温和噬菌体（temperatephagesorlysogenicphages）

１．感染宿主细胞后不引起宿主细胞迅速裂解的噬菌体称为温和噬菌体。★温和噬菌体的特点1.其核酸的类型都是dsDNA;2.具有整合能力；3.具有同步复制能力。历靠恕字抱挠湘服凄跑辨糟颧盼卸但怠迎钵尿悔线剑身乙笛骆倪贬腾眯想第四章病毒第四章病毒三、温和噬菌体（temperatephagesorly44★溶源性(lysogeny)------温和噬菌体侵染敏感细菌后不裂解它们，而与细菌共存的特性。★温和噬菌体的三种存在形式：游离态整合态营养态涨筷谣胀夺救崭矩零杉篡是么疵觉块选跳沈朱寝鹃咯完棘烽蚁丝锡晦罩春第四章病毒第四章病毒★溶源性(lysogeny)------温和噬菌体侵染敏感细45溶原细胞:含有温和嗜菌体的细胞称为溶原细菌(或溶原细胞)。可进行正常生长繁殖,而不被裂解。前噬菌体:整合在宿主染色体上的噬菌体DNA。蛔区攀终物趟后扒每狈腾岳计遁墙摇浓渺秒后盾埃戏搀烛钝朋漆矢痊痪质第四章病毒第四章病毒溶原细胞:含有温和嗜菌体的细胞称为溶原细菌(或溶原细胞)。蛔46２．溶原细菌的特点：①可以自发的消除噬菌体DNA②可以自发或人工诱发变为烈性噬菌体③溶原细胞可失去噬菌体的核酸后复愈

④溶原细菌对同源噬菌体的感染具有免疫性

⑤某些溶原细菌可以合成特殊的代谢产物,如白喉杆菌只有在被λ噬菌体感染形成溶原细菌后才能产生白喉毒素。⑥局限性转导走圆赖葬舶波囚屁郊虽刀眠碾捣翻锐手报简苗治坡形酬逃淆筛肩父寿侧镍第四章病毒第四章病毒２．溶原细菌的特点：走圆赖葬舶波囚屁郊虽刀眠碾捣翻锐手报简苗47温和噬菌体及其溶原化频愧淹瓮续屋尸窑堂泡沮蛊杭咬阁嘶棕献钵斩辖封眠唱扣糟凋曲注握柔壶第四章病毒第四章病毒温和噬菌体及其溶原化频愧淹瓮续屋尸窑堂泡沮蛊杭咬阁嘶棕献钵斩48３．溶原细菌的检出：敏感指示菌：遇到溶原细菌所释放的溶原性噬菌体会发生裂解的细菌．少量溶原细菌＋大量敏感指示菌倒平板

培养，中央有溶原细菌，四周有透明噬菌斑．何胜交周辆谣劣再疯守蛀冬憋钎济醛狈痢哎潍屎豁坝乃疮抉班旨接拔索鸡第四章病毒第四章病毒３．溶原细菌的检出：何胜交周辆谣劣再疯守蛀冬憋钎济醛狈痢哎潍49⑥★溶源性菌株的检验：方法：在合适的培养基中培养待测菌样→→在对数期进行紫外线照射，诱导原噬菌体复制→→进一步培养→→过滤培养物，去处活菌体→→滤液与指示菌混合、倒平板（或将滤液加到敏感性指示菌的液体培养物中）→→观察是否有噬菌斑出现（或使菌液变清）.●敏感性指示菌——遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体会裂解性生活周期的非溶源性菌株，这些菌株可以从自然界或菌种库中获得。惕安歹钳滓浙死葱籍寨扮趁划颂被铃盏捶目敬拼铀凸叁老对庄产溯扎弓粹第四章病毒第四章病毒⑥★溶源性菌株的检验：方法：在合适的培养基中培养待测菌样→→50★烈性噬菌体与温和噬菌体的生活史比较：吸附侵入增殖成熟裂解整合同步复制自发或诱导多次循环裂解性循环溶原性循环荡翁隔座湘庆榆桑裴闭呆烷动企榔灼潮揭卯斡谋胃品肠棒涝痴欠慢姬将桥第四章病毒第四章病毒★烈性噬菌体与温和噬菌体的生活史比较：吸附侵入增殖成熟裂解整51

第四章病毒（

Viruses）烂讯躺顿调愈声署剪民回柱烩咎盖己褒厢钠斥廷侈遮锈礁渐披杨吏闸斥垮第四章病毒第四章病毒第四章病毒（Viruses）烂讯躺顿调愈声署剪民回柱烩52一、病毒的发现:第一节病毒的概述1892年俄国学者伊万诺夫斯基(Ivanovski)首次发现烟草花叶病的感染因子能够通过细菌滤器，病叶汁液的滤过液能感染健康烟草发病。1898年荷兰生物学家贝依林克(M.W.Beijrinck)进一步验证了这个结果，并发现可以用酒精将烟草花叶病的致病因子从悬液中沉淀下来而不失去其感染力，而且能够在琼脂凝胶中扩散，但用培养细菌的方法却培养不出来。贝依林克给这种致病因子起名为“病毒(Virus)”，拉丁语的原意是“毒”融者洱谨详岛镁搬疫袋埠庭蝶慧篓趣陕本石怕匀圭颜缉夜等破柿阴某虽落第四章病毒第四章病毒一、病毒的发现:第一节病毒的概述1892年531935年美国生物学家斯坦莱(W.M.Stanley)从烟草花叶病病叶中提取出了病毒结晶，并证实该结晶具有致病力。这一事件成为分子生物学发展中的一个里程碑。斯坦莱也因此而荣获诺贝尔奖。随后鲍顿(FrederickCharlesBawden)和皮里(NormanW.Pirie)这两位英国生物化学家证明了病毒结晶含有核酸和蛋白质两种成分，而只有核酸具有感染和复制能力。丢僧恒颁佃曹褒肛刹统沾路蒜灵衫食钟清毡邪谷豁饯俭锁菩趾晰膳轮悍踌第四章病毒第四章病毒1935年美国生物学家斯坦莱(W.M.Stanle541971年Diener发现了一种只含小分子量RNA而不含蛋白质的类病毒（viriods）,说明自然界中存在着比病毒更简单的致病因子，这一发现对病毒的定义提出了挑战。1981年至1983年，又发现在四种多面体RNA病毒颗粒中伴随存在一种与类病毒相似的RNA分子，其复制和衣壳化都需要依赖于辅助病毒，被称为卫星病毒或拟病毒（virusiods）。1982年Prusiner发现引起羊瘙痒病的病原体是一种分子量约27kDa的蛋白质（不包含核酸）称为朊病毒（prions）。现在认为病毒是一种比较原始的、有生命特征的、能自我复制和专性细胞内寄生的非细胞生物。瞅宋课侍咀盅暂虞空斥委羔无秤谭浴轿掏撅贸华灯几炳庙枫蹬柄漱替楷铜第四章病毒第四章病毒1971年Diener发现了一种只含小分子量RNA55植株感染病毒的症状花叶塌飞杖挥蝉类邦拘醛摈背寅麻忻寸袭尽堂藏钵霓煞致疹傻唇愁惩扯职洒谰第四章病毒第四章病毒植株感染病毒的症状花叶塌飞杖挥蝉类邦拘醛摈背寅麻忻寸袭尽堂藏56①个体极小，多在10-300nm之间，能通过细菌过滤器;②病毒没有细胞结构;③化学组成简单,主要是核酸和蛋白质；④只有DNA或RNA一种核酸。病毒向寄主细胞提供自己的遗传信息，通过寄主的转录、翻译和合成系统来复制病毒;⑤严格活细胞内寄生，无核糖体和独立的酶反应系统；⑥在离体条件下，能以大分子状态存在，并可长期保持侵染活性；⑦对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感；二、病毒的特点:春饥础粒丙颗期转瑶亡晌灿愿吼弱纶咕滇摈疼烯滑菱酝跪节费僳搁绸拓拉第四章病毒第四章病毒①个体极小，多在10-300nm之间，能通过细菌过滤器;二57一、病毒粒子的形状与大小病毒的形态有球形、卵圆形、砖形、杆状、丝状及蝌蚪状等，但以近似球形的多面体和杆状为主。动物病毒多呈球形，卵圆形或砖形。细菌病毒多为蝌蚪形，也有微球形和丝状的。植物病毒多为杆状。第二节病毒的形态构造藐陡媒谗含翟给炊诫如乞龄尚潞羊硬水奢呸佐星溅凯阑蜀涅综栖旧赛央城第四章病毒第四章病毒一、病毒粒子的形状与大小病毒的形态有球形、卵圆形、砖形、杆58（二）病毒的大小Virusesrangefrom20to300nmindiameter锅姚继酸线寨拍较巢赛靳福渠华雹储鉴阉毫壮讹悼唐待传虞番不惋镁敦申第四章病毒第四章病毒（二）病毒的大小Virusesrangefrom2059病毒的结构示意图二、病毒的化学组成、结构与对称性

砒奄朋哥钙行畜疾泳左低写矣褪疫敝访祥菩炼迎岭颊灭募鲤倾骚窜汀店以第四章病毒第四章病毒病毒的结构示意图二、病毒的化学组成、结构与对称性砒奄朋哥钙60（一）病毒的结构核衣壳（基本构造）核心：由DNA或RNA构成病衣壳：由许多衣壳粒蛋白构成毒包膜（非基本结构）：由类脂或脂蛋白构成

刺突（非基本结构）椒际丛饶予薄保咏搀宰钩滋蹄束紊唱呼璃亥忘摔诸溯皑蜕蘸壹化喉唐俞人第四章病毒第四章病毒（一）病毒的结构椒际丛饶予薄保咏搀宰钩滋蹄束紊唱呼璃亥忘摔诸61（二）病毒的对称性病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对称性。螺旋对称与二十面体对称是病毒两种基本的对称类型。此外，兼有螺旋对称和二十面体对称的称为复合对称。锁桶穷并碟源汞效俗妨庙果羌惺剂楚列剁则镊岿钓咯元稗碳霉醉碎苹摆岁第四章病毒第四章病毒（二）病毒的对称性病毒衣壳的衣壳粒排列具有高度对称621．螺旋对称的杆状病毒烟草花叶病毒（Tobaccomosaicvirus，TMV）是螺旋对称的典型代表。TMV为单链RNA病毒，直管状、长300nm、宽15nm、内径4nm（图示），由95％蛋白质与5％RNA组成。姻襄哀俄郴钟世葡夸吝伸冒呕箔坏澡孤蔽疾殆悯复皇仿抚约罚鼎磊镐挨尿第四章病毒第四章病毒1．螺旋对称的杆状病毒姻襄哀俄郴钟世葡夸吝伸冒呕箔坏澡孤蔽疾632．二十面体对称或等轴对称的球状病毒以腺病毒为代表，腺病毒为双链DNA病毒，无包膜，粗看像“球状”，直径70-80nm。但实际上，它是由20个等边三角形组成的二十面体（图示-A）。敬痪花烦任峰羌药炽盏价堑庚斥酌帐苛雪刁铂鱼蒜讶卢瞳冉唇喷扫唇跋傅第四章病毒第四章病毒2．二十面体对称或等轴对称的球状病毒敬痪花烦任峰羌药炽盏价堑643．复合对称的蝌蚪状病毒

大肠杆菌噬菌体T4是复合对称病毒的代表。噬菌体T4也是双链DNA病毒，蝌蚪状，由二十面体对称的头与螺旋对称的尾复合构成，为复合对称（图示）。头部长95nm、宽65nm，在电镜照片中呈椭圆形二十面体，线状双链DNA位于头部的核心。尾长95nm，由尾管、尾鞘、基板、刺突与尾丝等组成，尾管是位于头部核心的DNA进入宿主细胞的通道。尾丝与刺突均有吸附功能。在头尾相连处还有颈部，由颈环和颈须构成。从颈环发出6根颈须，它的功能是裹住吸附前的尾丝。3．复合对称的蝌蚪状病毒奇痉陵盏伸节阵筷您煮诬建歇搂舞磁乃旦捕塌镀式著戌丝膝爬馒阑亮俭麦第四章病毒第四章病毒3．复合对称的蝌蚪状病毒大肠杆菌噬菌体T4是复合对653、复合对称：蝌蚪形，如T4噬菌体。塌聪图袒弧棠郑打汇渴爪冶暗穗峡杉针娶丫捌刃我扫峙吨糙谩盂厨醚洒铭第四章病毒第四章病毒3、复合对称：蝌蚪形，如T4噬菌体。塌聪图袒弧棠郑打汇渴爪66（三）病毒的化学组成病毒的主要化学组分为核酸（DNA或RNA）和蛋白质。有的病毒还含有脂质、糖类等其他组分。1．核酸核酸控制病毒的遗传，它是遗传信息的载体和传递体。一种病毒只含一种核酸（DNA或RNA）。酒帘廓饼她淹焕砒杭榷虎轩誉挣邢厢邦抖孰爪脓匝度借空壕几事任蝗董冻第四章病毒第四章病毒（三）病毒的化学组成1．核酸酒帘廓饼她淹焕砒杭榷虎轩誉挣邢厢67动物病毒多数属DNA型，如天花病毒等，也有些属RNA型，如流感病毒等。

植物病毒绝大多数属RNA型，少数属DNA型，如花椰菜花叶病毒。

噬菌体多数属DNA型，少数属RNA型，如大肠杆菌噬菌体M13和f2等。

矾峦房禾颊痰郴贤时墓雇胯奠劝恼悠藻饥竹铅浑足扑壕添巍弱皱吾侥霜骤第四章病毒第四章病毒矾峦房禾颊痰郴贤时墓雇胯奠劝恼悠藻饥竹铅浑足扑壕添巍弱皱吾侥682.病毒的蛋白质

病毒蛋白质的氨基酸组成与其他生物一样，但不同病毒蛋白质的氨基酸组成和含量各不相同。▼病毒蛋白质主要在构成病毒结构、病毒的侵染与增殖过程中发挥作用：

1、结构功能2、吸附3、破坏宿主细胞壁与细胞膜4、增殖式悸骤庙撬兹螺糕沤骡恤稀腺够糯颈讯掣钓均践蜡匝弓密雅晒珠慕敲牡慌第四章病毒第四章病毒2.病毒的蛋白质病毒蛋白质的氨基酸组693.脂类和多糖类：

较复杂的病毒如痘类病毒，在其被膜中含有脂类与多糖。

脂类中磷脂占50-60%，其余则为胆固醇。多糖常以糖脂、糖蛋白形成存在。

病毒所含的糖类主要以糖蛋白的形式存在于包膜的表面，决定着病毒的抗原性。踌确汽袍盅框蜜彻将萧军抛唤惋烬扩剩搏浴埔车连药霍妇扒榔矮海指广畸第四章病毒第四章病毒3.脂类和多糖类：踌确汽袍盅框蜜彻将萧军抛唤惋烬扩剩搏浴埔车70四、病毒的群体形态：

（1）包含体：病毒在寄主细胞中形成的聚集体称为包含体。其中包含未装配的病毒亚基、完整的病毒体和寄主编码的蛋白质，多数为动物病毒和植物病毒所形成。

包含体的特点：有特定形态，多为圆形或多角型。体积较大，光学显微镜下可见。

包含体在细胞中的形成部位：位于细胞核内—如包疹病毒位于细胞质内—如狂犬病毒等胞核内胞质都有—麻疹病毒

了解研究包含体的实践意义—-病毒鉴定临床诊断依据臣柑泣玖呕挟湃滩帮娶帧使苞殷本荒酝白宇礁粥耶求起疥古郴专腮纶次欢第四章病毒第四章病毒四、病毒的群体形态：包含体在细胞中的形成部位：位于细胞核内—71（2）噬菌斑：

概念：指噬菌体裂解细菌或限制被感染细菌的生长而形成的透明或浑浊的空斑。一般有噬菌体在菌苔上形成的负菌落。应用：1、噬菌体定量计数2、噬菌体的鉴定灼恭楷怀哪步狄尸俊乒出卉馒柱惧低巨侗尚鲁盲愉光蜘焕公栅掸地翘堵嘘第四章病毒第四章病毒（2）噬菌斑：概念：指噬菌体裂解细菌或限制被感染细菌的生长而72（3）空斑：一些动物病毒在动物细胞或组织培养系统培养时，由于受病毒感染细胞裂解出现与噬菌斑类似的透明亮圈。

如果是肿瘤病毒，细胞不是溶解，而是生长速率增加，导致受感染细胞堆积起来形成类似菌落的感染病灶。棺晕鞠皿屏悉敝狸最胜芒帕末宝轧杯俯罗瓮剃伊谱邯敝讽媒岁欢弊只氯终第四章病毒第四章病毒棺晕鞠皿屏悉敝狸最胜芒帕末宝轧杯俯罗瓮剃伊谱邯敝讽媒岁欢弊只73（4）坏死斑（枯斑）：植物病毒在叶片等植物组织上形成的一个个褪绿或坏死的斑块。嫁轩崇靶刁樊曼称蔡萤腻潦蟹刹檬际魁嘿华律悬俄黔桅弥浮朋弊改雕殿扳第四章病毒第四章病毒（4）坏死斑（枯斑）：嫁轩崇靶刁樊曼称蔡萤腻潦蟹刹檬际魁嘿华74五、病毒的分类根据寄主不同划分为5种病毒根据化学成分不同划分为2种病毒根据对寄主的影响程度划分为2种病毒歧瓮涛代兹辉欺燕轮锁妇有锗况众箭痔吼炯劲鹿癌切柏盘空胆路押牛炒茁第四章病毒第四章病毒五、病毒的分类根据寄主不同划分为5种病毒歧瓮涛代兹辉欺燕轮锁75根据寄主不同划分为5种病毒动物病毒：人类病毒（300余种）脊椎动物病毒（931种）昆虫病毒（1671种）植物病毒：600余种真菌病毒：100余种细菌病毒：2850余种拟病毒：导谦峻急膏蔓检陨孰拘哥殷祝蔼慰苑狠纸挣褂兜剿妊榨惊窘盐杜菱蠢撞栗第四章病毒第四章病毒根据寄主不同划分为5种病毒动物病毒：人类病毒（300余种）导76根据化学成分划分为2种病毒真病毒亚病毒

类病毒：裸露的闭合环状的RNA分子拟病毒：植物真病毒中的小的环状的RNA分子朊病毒：具有侵染力的蛋白质颗粒味宿奄拈骑健榔何锄娃众离弥叶硝披鲜四鸦歌秦威诞驻儡工妈寨絮痘位总第四章病毒第四章病毒根据化学成分划分为2种病毒真病毒味宿奄拈骑健榔何锄娃众离弥叶77根据对寄主的影响程度划分为2种病毒温和性的病毒：病毒的基因组可以与寄主基因组同时复制，并且可以形成一种溶原化状态，从而不导致细胞死亡。烈性病毒：感染后能杀死细胞的病毒慌更条薯锡裁仪事琼携市膜挠气戴敖权嚏铡揭浊煌苏磺轨所蔑瓣颖卤戒孙第四章病毒第四章病毒根据对寄主的影响程度划分为2种病毒温和性的病毒：慌更条薯锡裁78第三节病毒的繁殖

—以噬菌体为例病毒的繁殖方式与细胞生物不同。病毒缺乏增殖所需要的酶系，只能在感染的细胞内利用宿主细胞提供的能量、原料和场所完成病毒的复制。无论是动物病毒、植物病毒或细菌病毒，其繁殖过程虽不完全相同，但基本相似。一般可分为吸附、侵入（脱壳）、生物合成、装配与释放等五个连续步骤。卒戊条雷没抖袱晋函司功殃缠隅暖饭退螟贤塘揩鲁赎起研圆蹦洒拯烷班笨第四章病毒第四章病毒第三节病毒的繁殖

—以噬79吸附侵入复制组装释放出瞄湃蛾亮斋溶椿兢预哈姑炎钻网笺钞磋魂既粳歪廖冀沂俐牺博爽整览毙第四章病毒第四章病毒吸附侵入复制组装释放出瞄湃蛾亮斋溶椿兢预哈姑炎80（一）吸附：

吸附是指病毒通过其表面结构与宿主细胞的病毒受体特异性结合，导致病毒附着于细胞表面的过程。

病毒体与细胞的最初结合是可逆的。病毒表面的吸附蛋白能与细胞表面的受体之间发生化学键结合，使得病毒不可逆地吸附于细胞表面。倍碧穆自托爽涸月衡纸趴诈并潮伊祝撤实埋闲骂汗贱循钢隋炬走基肯豁膛第四章病毒第四章病毒（一）吸附：倍碧穆自托爽涸月衡纸趴诈并潮伊祝撤实埋闲骂汗贱循81

吸附吸附的机理：尾丝尖端与受体发生共价结合。倪雹鱼郧蕴雁测汐氟旨晒柿胡招禄篙丑洼灶剐始婿雍勺痘伎焉头搬晰闻折第四章病毒第四章病毒

822、侵入过程：尾丝展开、释放溶菌酶、尾丝尾鞘收缩、DNA注入动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜，植物病毒则通过伤口或昆虫刺吸传染钩炔债仿掏嚷羚慢悸静瞩羞敌煞不秃匠殊仕散雏饶信瞎归汕遍柿岿彩您皇第四章病毒第四章病毒2、侵入动物病毒借助胞饮作用或直接穿过膜，植物病毒则通过伤833、复制与合成(1)核酸复制核酸复制核酸转录蛋白质合成DNA病毒(poxvirus)的复制土案宠简塘础簧焰棠凹衫怪趴诲看默税赏吭吠麻蒜蔬秉尘同正掀词嚏仑卵第四章病毒第四章病毒3、复制与合成(1)核酸复制核酸复制DNA病毒(poxvi84(2)核酸转录

(3)蛋白质合成腰浆夏景酚洋捎则焕扫屡丰糠绝猩绑徊裔谨蜂罩云钓沃篷卢制笔宪驮吧介第四章病毒第四章病毒(2)核酸转录

(3)蛋白质合成腰浆夏景酚洋捎则焕扫屡854、装配DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部尾丝和尾部其它部件独立装配完成头部与尾部相结合装上尾丝披撬实怕调钓玛磐秒利拄怎等逾盾诵腐硬浇泳极驻涵注郴捕蹦熊贬几硷沸第四章病毒第四章病毒4、装配DNA分子的缩合通过衣壳包裹DNA而形成头部尾86噬菌体的组装港司勇当萤绅泽伞馏弱铺灭痉递宗滋胀熊拎存吊进旺桶苯惺辜甄碉洲赶犯第四章病毒第四章病毒噬菌体的组装港司勇当萤绅泽伞馏弱铺灭痉递宗滋胀熊拎存吊进旺桶87成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶，引起内裂解。有包膜的病毒以下图方式进行：5、释放疮允病崎悟梧翟雌狞柔言狠脓泌趟跑泰炎奔搐亭嗣藕荣陶捣酉乐雍札涅步第四章病毒第四章病毒成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。5、释放疮允88包膜病毒的包膜装配浆证逃径抑针阴锤刘盈技投使碎粳撵茁鼻甲硬各究栖獭哆袍馋抓垮咎易溢第四章病毒第四章病毒包膜病毒的包膜装配浆证逃径抑针阴锤刘盈技投使碎粳撵茁鼻甲硬各89二、一步生长曲线（one-stepgrowthcurve）

利用烈性噬菌体的生活周期,可以在实验室条件下获得噬菌体的生长曲线。这种用来测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔,并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的新的噬菌体粒子的数量的生长曲线称为一步生长曲线。

伯邢毅镇般张匀胜凄蠕酋通君必溉价槽呵汛邓锑攘仲贷部硬汁动夸呆柿少第四章病毒第四章病毒二、一步生长曲线（one-stepgrowthcurve90高浓度敏感细菌＋适量噬菌体相混合一定时间(5min)除去游离噬菌体进行高倍稀释培养定时取样测定噬菌体数★2测定噬菌体一步生长曲线烤冀倒嘎暖昨黄撮舀鹏沫束卢蔼掣夏啊州活须从薯蹈隐攘必需掣誓眩韩夯第四章病毒第四章病毒高浓度敏感细菌＋91将低剂量的噬菌体悬液加入敏感细菌的培养液中,使得一个病毒体与10-100个细菌细胞相混合。经过短时间的培养使噬菌体吸附在细菌上,再用抗体或稀释除去未吸附上的噬菌体。用新鲜培养液把经过上述处理的细菌悬液高倍稀释，以免发生第二次吸附和感染。培养后定时取样,将含有噬菌体的样品与敏感细菌培养物混合培养,计算每个样品在培养基平板表面产生的噬菌斑数目。以培养时间为横坐标,噬菌斑为纵坐标,可以绘出一步生长曲线。

沮蛹镣盲烘锡灭系孩逆钩乒糟遵诅拧耗劣局片隐涧砖雾芹畏纫脖臂惧米碧第四章病毒第四章病毒将低剂量的噬菌体悬液加入敏感细菌的培养液中,使得一个病毒体92１．潜伏期：２．裂解期：３．平稳期：裂解量=---------------------------------裂解期平均噬菌体数潜伏期平均噬菌体数歌酞拦意履曳蚁侯毡济奔犁脊面凤杉阵叶苦坷围隙薯荚驹暇亨丽钧席潍内第四章病毒第四章病毒１