低分子肝素的制备PPT幻灯片

目录

1.原料来源

2.组成或结构及存在形式

3.性质

4.制备工艺

5制备工艺的改进

6作用及用途肝素（Unfractionatedheparin,UFH）作为抗凝剂和抗血栓药在临床上使用已有60余年，但长期使用会导致出血和血小板减少等不良现象低分子肝素(Low-molecular-weightheparin,LMWH)是由普通肝素裂解而来。与普通肝素比较，其抗血栓能力较强而抗凝血能力较低，在其抗血栓能力形成时对凝血系统的影响较小。另外低分子肝素还具有分子量小、生物利用度高、体内半衰期长、出血倾向小等特点，因此低分子肝素的制备具有重要的意义。方法制备物理分离法有机溶剂分级沉淀法、凝胶色谱法、亲和色谱法、离子交换色谱法和超滤法（不适用与工业化生产）化学裂解法亚硝酸降解法、过氧化氢降解法、β-消除降解法和其它化学降解法酶解法肝素酶2.1化学降解法2.1.3β-消去降解法β-消除降解法包括肝素季铵化和降解两步处理。肝素的季铵盐和卤代烃或卤代苄基化合物在二氯甲烷或二甲基甲酰胺中可以发生酯化反应,生成的肝素酯可在碱性条件下水解成LMWH。肝素解聚程度可由酯化率，碱性条件或酯的类型决定。2.1.4其它化学降解法除亚硝酸降解、β-消除降解法和过氧化氢降解这三种工业上用来制备LMWH的化学方法以外，还可采用高碘酸降解、次氯酸降解、γ-照射和硫酸一氯磺酸降解等几种方法制备LMWH。这几种制备方法目前没有其投入工业化生产的报道。2.1化学降解法优点：化学裂解法工艺简单，成本低廉，适宜工业化生产。缺点：化学裂解法在裂解过程中容易导致硫酸基丢失ATlll一结合部位减少，同时其在裂解过程中易引入有毒物污染环境。酶解法肝素的酶法降解己经被用作分析肝素的结构和制备LMWH。肝素酶是能特异性的裂解肝素和类肝素主链糖苷键的酶，最初是从肝素黄杆菌（Flavobacteriumheparinum）中发现并分离。后在一些其它的微生物和真核生物中也有发现，如拟杆菌属、棒杆菌属和芽孢杆菌属等几种，真核生物的霉菌、胎盘、胸腺、血小板等中均有发现。肝素酶主要用于低分子肝素生产和链上精确结构的研究，现在市场上肝素酶价格昂贵且都是肝素黄杆菌肝素酶，这是由于分离肝素酶稳定性差及产量不高所造成的。低分子的测活方法及分子量的测定生色底物法天青A法血浆凝固法它在效价测定中的特异性,分光光度法的使用使常规测定自动化、标准化统计凝固法用血浆做底物,血浆存在较大的差异,本身就可带入试剂误差;用人眼观察凝块出现时间,造成人为误差;采用标准曲线计算效价,也存有误差可以测定低分子肝素含量但却无法反应LMWH的抗Xa因子和抗IIa因子活性，因为失活的肝素同AzureA仍可显色,证明现有理化方法测得的肝素化学等效性并非生物等效性。酶活测定目前遇到的困难及解决问题方案1）在天青A测酶活的过程中，发现离子强度对该法测酶活的稳定性影响较大，易出现假阳性现象。另外该法在建立标曲的时，线性关系不是很好。鉴于天青A法测得的肝素化学等效性并非生物等效性，拟采用药典上的血浆凝固法和生色底物法测酶活。（2）提取粗酶液后，测得酶活较