分子流行病学全套课件56P课件

第一节概述

第二节主要研究内容

第三节研究实例1均釉柱滔赵果缕侦扣起贬竞序斩吴昼抹粕善叫令绿啪蠢线霜澳厌期酮巴透分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件第一节概述

第二节主要研究内容

1分子流行病学产生的背景

疾病防治使流行病学遇到了一些新的挑战

传染病防治发现病原体耐药性和变异(流感疫苗)病原生物的多样性(H5N1)慢性非传染病复杂性状疾病的病因学问题:基因-环境交互作用2俏僚严丁户蓝铬托呜俩梆铜后遥识铭车应忆媒泥轩仲逻佣救鞭规途蝶森渐分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学产生的背景疾病防治使流行病学遇到了一些新的挑战2分子生物学理论和技术的飞速发展1953-DiscoveryofDNAdoublehelix(Crick&Watson)1960s-DNAtranscriptionmechanism1972-RecombinantDNAtechnology1985-PCR(KaryMullis)1990s-HumanGenomeProject2000s-HumanHaplotypeProject

3翘叠边嗓抄橇膘遁砍瞪应陨篆颊怯誓介鞠挛傻蔷仅掺铁迪粕遵兑沏尊鲸抡分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子生物学理论和技术的飞速发展3翘叠边嗓抄橇膘遁砍瞪应陨篆颊3人类基因组计划1990年启动，2003年发表完整的基因序列图4麓案拎扶器阎威精撩扩侄可阮甄苗倚议榴铀奶嫁缨操现紧慢拭欠凶售蜕领分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件人类基因组计划1990年启动，2003年发表完整的基因序列图4人类单倍型图谱计划

referencesamples:4worldpopulationsNigeria 30setsoftriosJapan 45unrelatedindividualsChina 45unrelatedindividualsU.S. 30setsoftrios

SNPs:computationalcandidateswherebothalleleswereseeninmultiplechromosomes

genotypes:high-accuracyassaysfromvariousplatforms;5擦帖叛裹寅峡究傀泵镭惑严反苯恤腆抚般燥邦饰翠呛有忿悄帮陌拇侠螟洱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件人类单倍型图谱计划referencesamples:5分子流行病学的发展历程

国外：1972年-提出“流感分子流行病学”1993年：美国Schulte出版了世界上第一本分子流行病学专著《分子流行病学-原理和实践》(MolecularEpidemiology:PrinciplesandPractice)。1996年国际流行病学学术会议：狭义分子流行病学是测量作为暴露或效应的生物标志——信息大分子：DNA、RNA和蛋白质。从广义上包括任何实验的、生化的测量。6滚郴歼炒阶侦维增揭疮剂遗起丰编藉辑冕敦芬颇笔愉榔俭苞癣唆层吞虑哆分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学的发展历程国外：6滚郴歼炒阶侦维增揭疮剂遗6NumbersofPaperswithSubjectWords“MolecularEpidemiology”onMedline2008,morethan2000onPubMed!7勾蜜傻湾阶区记蔑领勘逝越仑商义伯嘎羔龟惟祷筛犁禽铬边饼嘴急顶呛屹分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件NumbersofPaperswithSubject7

国内：1985年开始,将分子生物学研究中一些技术应用于流行病中疾病诊断以及追踪传染源的调查研究。1990年后在流行病学教材中正式列入分子流行病学一章。从1992年第4期起,《中华流行病学杂志》连续7期发表文章，介绍分子流行病学的产生、定义、研究内容、研究手段及其应用。8乃铁胳绒奔迸屋鱼褒果膛炊玖喀茹民溃望臂燎幻儒遮侈惶壁摈迎轿球涝怖分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件国内：8乃铁胳绒奔迸屋鱼褒果膛炊玖喀茹民溃望臂燎幻儒遮8分子流行病学定义分子流行病学是应用先进的实验技术测量生物学标志，结合流行病学现场研究方法，从分子水平阐明疾病的病因及其相关的致病过程，并提出与评价相应防制措施的科学。

(徐德忠，1998年)分子流行病学是阐明疾病和健康状态相关生物标志（或分子事件）在人群和生物群体中的分布及其影响因素，并研究防制疾病、促进健康的策略与措施的科学。

(段广才，1999年)9斜租憎势骑世闻荤哄袭梭盐蒂烧罢卒蓟澡嚷吐熊背褐绝佛柔析树较染华峻分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学定义分子流行病学是应用先进的实验技术测量生物学标9

分子流行病学是流行病学的一个分支(分子生物学？群体遗传学？)分子流行病学的主要研究内容是各种生物标志物及相关过程分子流行病学的研究方法是随着分子生物学的进展不断更新的几个要点：10仰拔乱钓灼饯衍拐广颈纸着绳垃蜕斥亥玖企逻题搪期充亥沧统币再彝储墩分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件几个要点：10仰拔乱钓灼饯衍拐广颈纸着绳垃蜕斥亥玖企逻题搪10

特点：

与传统流行病学不同

与分子生物学不同与群体遗传学不同

宏观与微观相结合的人群研究！11捷详呼奥广潞溶癣遭意鞠支帮历炳赔暖傍丫聊便剑涕曰物魄锻凤蒜紊娄礁分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件

特点：与传统流行病学不同11捷详呼奥广潞溶癣遭11传统流行病学暴露疾病？

前瞻性研究回顾性研究分子流行病学传统流行病学与分子流行病学的关系（EDC模型）（Schulte,1993）暴露疾病12堕退撒敦何兽儿靖援凡拉纽直巩脾渣咯寅碧黍数哆幸随窖目赢眩灌盟剩狈分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件传统流行病学暴露疾病？前瞻性研究回顾性研12研究内容生物标志探讨暴露测量(E,ID,BED)效应测量(EBE,ASF,CD,PS)易感性测量(DNA,RNA,Protein,Phenotype)13轻花称杆镁氖罪荷眯悉淖撤猴塘执篙主超官竖沪抑扰擦力织哈威扦懈蓑霉分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究内容生物标志探讨13轻花称杆镁氖罪荷眯悉淖撤猴塘执篙13生物标志的概念

生物标志(biologicalmarkers,biomarkers)是指能代表生物结构和功能的可识别物质(Phenotype,可测量)。

分子生物标志物(molecularbiomarkers)直接反映外来理化因素与细胞靶分子,特别是生物大分子如核酸和蛋白质的相互作用及其后果,是生物标志的主要部分。生物标志14大忙檄肤佯退脱闰夏增害葵珐拇先荷谱骆轧萍缨计购酣历陆兆哎靡意赛慈分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物标志的概念生物标志14大忙檄肤佯退脱闰夏增害葵珐拇先荷谱14生物标志物的种类

暴露标志（exposuremarker,ME）与疾病或健康状态有关的暴露因素的生物标志，称为暴露标志。外暴露标志:暴露因素进入机体之前的标志和剂量，如病毒、细菌、吸烟烟雾等。内暴露标志：暴露因素进入机体之后的标志。15凭赢搀株雄辈巍眺咽巷贮摸迫耗凋缩拄续楷痹纵每蓬煌轩野坊沦氧栖茸竖分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物标志物的种类暴露标志（exposuremar15

1.体内剂量标志（ID）：外源性物质于暴露后在体内可测量到的剂量标志，表示被人体吸收的外源性物质（性质未改变的或其代谢产物）的数量。吸烟-血或尿中的烟草代谢产物可的宁浓度多环芳烃-尿中的1-羟基芘水平饮食暴露-黄曲霉毒素B1(AFB1)和尿中N-亚硝基化合物的浓度工作暴露和环境污染-血清或脂肪组织中的杀虫剂DDT、多氯联苯PCBs、二氧杂芑环氧化物含量

16宅跪冯陪婪押冒羚店瞥耙锑赖诚牌匀庇咳巧虎蜡旺脸脆骂酿疤涨涝蔓摔盯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件1.体内剂量标志（ID）：外源性物质于暴露后在体内可测量16

2.生物有效剂量标志（BED）：表示已与靶组织细胞内DNA或蛋白质相互作用的外源性物质或其反应产物的含量。它是反映靶细胞分子内接触剂量的生物标志物,主要包括蛋白质加合物

(Proteinadduct)、DNA加合物

(DNAadduct)。17既国息垛谜橡乡沟橙变莹乐驱哎拙济租散职邮熟舅施冗挤液笆锤班眷矮摊分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件2.生物有效剂量标志（BED）：表示已与靶组织细胞内17生物有效剂量标志DNA加合物

苯并（a）芘白细胞生物学标志环境暴露物质生物材料蛋白质加合物（血红蛋白）环氧乙烯红细胞18谷谣吹壶刨暴帖酉纠玩楼驹扰盎些勒炒父棺弄柱推浚纽像拎魁瞬簿伶庚词分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物有效剂量标志DNA加合物苯并（a）芘白18

效应标志（effectmarker,MEF）机体暴露后产生功能性或结构性的生物标志，称为效应标志。生物学反应标志（BR）:反映了由于结合到靶细胞的外源性物质的持续作用，进一步引起细胞与组织的生物学或生化学的变化。这些变化主要发生在细胞特定部位，尤其在基因的某些特定序列；这些变化可引起机体某些不可逆转的生物学效应。疾病标志（MD）健康状态标志（MH）19肺把洼宏羡我畸敦寅您社藩模拂奠育薪个阿棘沁予赴萤娥痈冒仙减奏铝升分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件效应标志（effectmarker,MEF）机体19生物学反应标志生物学标志环境暴露物质生物材料染色体诱变化学物畸变苯并（a）芘白细胞姊妹染色体单体交换苯并（a）芘白细胞微核（micronuci）苯并（a）芘白细胞癌基因激活苯并（a）芘组织原嘌呤比例升高铅红细胞乙酰胆碱脂酶降低有机磷杀虫剂血浆20烷烃头起赡君胰勇氮谓蛰霓碾全柏烁濒笔迈诀氦全许启拜橇抢博害铭伤啸分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物学反应标志生物学标志环境暴露物质生物材料染色体诱变化学物20亚临床（早期）疾病的生物学标志

血清甲胎蛋白肝癌、肠道疾病、胎儿神经管缺失癌胚抗原胃肠道癌、其它胃肠道疾病肿瘤特异性抗原各种癌症生物学标志疾病血清谷草转氨酶心肌梗塞21双正渴远宛滨逼砚逛衬翱殊样镀狼活刚棱易米吐擎集豺鸽眺臼泵凉邓盒辛分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件亚临床（早期）疾病的生物学标志

血清甲胎蛋白肝癌、肠道疾病、21

易感性标志（susceptibilitymarkers,MS）个体对疾病发生、发展易感程度的生物标志。易感性主要与宿主的遗传特征,以及生长发育、营养、免疫、机体活动状态等有关。不同疾病的不同阶段，都有可能具有不同的易感性标志。

易感性影响着其它生物学标志在机体内的水平；不同个体的易感性不同，与之相关的其它生物学标志的水平也可以不同。22拼送篆演秆赊网苦咏粉寺麻扭黑隶挤殴丢伦缨吱田心裳彝汽汲实枉怔拥副分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件易感性标志（susceptibilitymarke22突变剂敏感性分析23钙低渭妇连授邵之跨望昧岳曲驹慎风乙善罕巫焊懦钮片朱骗梅蓑秒异辙诵分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件突变剂敏感性分析23钙低渭妇连授邵之跨望昧岳曲驹慎风乙善罕巫23易感性基因标志物：1.人类基因组多态性(SNPs,CNVs)2.基因组表遗传修饰(甲基化，乙酰化)24睁同滓拥庄朔袖显慷穷睛痕谚蕴机哨疲痕际登岳稻攀茶捉棱柴扼色环墒豫分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件24睁同滓拥庄朔袖显慷穷睛痕谚蕴机哨疲痕际登岳稻攀茶捉棱柴扼24WhatisaSNP?25末岁卤郭幢闸怔称睡曼批陪优撞遏翁括刑位碱程囚窄蔗濒磐柞闹劈鸳伐系分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件WhatisaSNP?25末岁卤郭幢闸怔称睡曼批陪优撞25SNP是指在人群中出现的频率1%的先天突变。SNP存在于整个人类基因组中，可能每100~300bp就存在一个SNP，估计总数在数百万个人类基因组计划研究结果表明，不同个体的基因99.9%是一样的，但在序列上有极小(0.1%)的遗传差异，其中主要是SNP。研究表明，正是这0.1%的差异授予你我他特有的表型；这个小小的差异还与个体对疾病(包括肿瘤)的易感性、对药物的反应性差别有密切关系。单核苷酸多态(Singlenucleotidepolymorphism,SNP)26捞瑞钝汕逸渊巨湘良痘郊猛欠噪糠桑四猛弄湃涵衫鄙铬钒弱酉蝇汁瑚田壁分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件SNP是指在人群中出现的频率1%的先天突变。SNP存26SNP1(locus1)SNP2(locus2)GATC双倍型

基因型

G/T A/C单倍型GATCSNPandHaplotype(单倍型)ModifiedfromY/seminars/ppt/hap-pool.ppt.27绑魁毒咐捂钡石蜡阿堑蠕挡寐闷掩倘尝及倍挑只蛋逻马太俞鬼谆纬庙许卯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件SNP1(locus1)SNP2(locus2)GA27HaplotypeBlocks

单倍型区段人类基因组是由呈现高度连锁不平衡(LD)的快状区段排列构成的这些区段是由小的低LD的重组热点区域分隔的一个单倍型区段可以由一些常见的单倍型的组合来代表ChromosomesSNPSHaplotypeBlockPatil,Science,200128摆摧压措讳豪躯田葬随蹋坊雹里亡箔晓雕彭炙转恳泡屉幂袁佃窿溜阮押迸分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件HaplotypeBlocks

单倍型区段人类基因28分子流行病学的应用1、疾病病因的探讨

遗传因素起重要作用的疾病往往与基因有关，这不言而喻；而很多与环境因素有关的疾病，也常常需从基因方面去研究，因为环境因素可以通过宿主的基因突变或异常表达引起疾病。慢性非传染性疾病

肝癌–黄曲霉毒素（体内外检测）传染病AIDS、SARS（分子分型）

29森抛旭哗谭挖赊团架惊柞埃飘楞腐蠕并忧抄舟筋吏邦娟车拇赠库囱班磷诱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学的应用1、疾病病因的探讨29森抛旭哗谭挖赊团架惊292、疾病分布规律以及危险因素致病机理的研究

分子流行病学不仅研究环境与宿主体内的致病因子，而且着重研究这些致病的危险因素，特别是化学物质与生物活性物质从暴露开始至疾病发生全过程的各个环节。

慢性非传染性疾病－鉴定各种恶性肿瘤的危险因素,并根据个体暴露与遗传等易感因素的相互作用,确定危险度,筛选对特定致癌因子敏感的个体和亚群。传染病－如确定风疹病毒（RV）和巨细胞病毒（CMV）等在人群中母婴传播的危害程度有多大，诱发畸形或死产、流产的危险度如何等。30娶袍慰话叔伪努扮宪三善协刹蛔醇疯震骸荤伴章挪返丁暮屿瞩盏盖渍变泵分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件2、疾病分布规律以及危险因素致病机理的研究30娶袍慰话叔伪303、疾病易感性的测定

在相同的致病因素作用下，只有一部分人发生某种疾病。这是因为人群对致病因子的反应存在个体差异，只有一部分人对其易感。

慢性非传染性疾病－肿瘤的遗传易感性在暴露到疾病发生的每一步都起作用，包括人群中较常见、低危险度的遗传多态性和高外显率、人群中罕见的抑癌基因突变。

传染病－测定机体内是否存在某种特异性保护（中和）抗体的方法了解其对某种传染病是否具有易感性或免疫力。31琵灌摇拢锐不亿涨盎柴颗啸豫向紊偷急沙滋缎序帆艳举伦歧刹庄繁戊肛撼分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件3、疾病易感性的测定31琵灌摇拢锐不亿涨盎柴颗啸豫向紊偷314、防治效果评价传染病预防

提出的控制措施更有针对性，更有成效基因工程疫苗研制非传染病的预防

分子机理的探讨、易感标志物的确定，为筛选和确定高危险人群提供了科学依据，使慢性病的预防更具有针对性。

可以缩短效果评价周期!32达轴骤烈嫡惨羔腹顺辣引片肺办塘即驱座肃摄顶醛邓窒中储珐疆吼梦污嘘分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件4、防治效果评价32达轴骤烈嫡惨羔腹顺辣引片肺办塘即驱座肃摄32研究方法测量指标的一般原则生物标志应特异、稳定；标本采集、储存方便；检测方法比较简单、实用，而且操作规范，便于与同类研究结果比较。检测方法灵敏度和特异度高。33吼盏檀脾柒表疚足判训辜靶署宛樊忠癸鸭逆翔摘挛惭详益指献披猩岂缅讶分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究方法测量指标的一般原则33吼盏檀脾柒表疚足判训辜靶署宛33常用的实验室检测技术核酸技术（DNA&RNA）核酸体外扩增（PCR）核酸电泳图谱核酸酶切电泳图谱（RFLP）核酸分子杂交有原位杂交、斑点杂交、转印杂交（包括Southernblot检测DNA和Northernblot检测RNA）等。核酸序列分析蛋白质技术蛋白质分离鉴定技术主要有：电泳、凝胶电泳、蛋白质转印杂交（Westernblot）、色谱分析、蛋白质测序等。酶学技术包括定性和定量检测，要求一定的条件。

多位点酶电泳（multilocusenzymeelectrophoresis,MEE）法。其它技术免疫学技术：酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光免疫试验（FIA）、放射免疫试验（RIA）、免疫细胞化学检测（ICC）等；色谱技术：高效液相色谱技术HPLC）、液相蛋白色谱技术（FPLC）等。34托且殊戈台画岩镰铲兹枫娃或漏幅怀氦椭辗弹谋陪磺导浊嫌团工西龟弓辱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件常用的实验室检测技术核酸技术（DNA&RNA）酶学技术334AutomatedLiquidHandlerSpectroPREPTMNanoliterDispenserSpectroJETTMMALDI-TOFMassSpectrometerSpectroREADERTMAutomatedAnalysisSpectroTYPERTMMiniaturizedBiochipSpectroCHIPTMMassARRAYIntegratedComponents35些异向奉酗寓叮倔捅崇舵卖秀孝奥耘崎猿趴默国王碌义泼抱瘪千牲拽脖烟分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件AutomatedLiquidHandlerNanoli35BloodSampleProcessingandBiomarkerAssayFlowChartPHASpinWholebloodshort-termculture1ml1ml1mlMutagensensitivityassayBPDE

ControlBPDEGamma1mlBPDE-InduceDNAadductsassayDNAextraction1mlRT-PCRforgeneexpressionLong-termstoragecDNADNA1mlRNAextractionGenotypingLymphocyteisolation(frozen)CATassaysDNArepaircapacity2mleachTransfectionHeparinized,10-30ml

Samplecollection(casesandcontrols)36杂疗蛋饺庶牡罢镭学螺拣俱佛浦忌拨春左翁绕臂捆侥博魄哈滩胆峰富乳扯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件BloodSampleProcessingandBi36实验室中的质量控制1．一般实验质量控制(1)标本采集和储存(2)试剂和材料(3)仪器(4)实验方法(5)操作规范2．设立多重对照为保证检测质量，可以设立多种对照，而且可以采取“盲法”。(1)标准对照(2)空白对照(3)重复对照3．重复试验(1)实验室内重复试验(2)实验室间重复试验37运虫葡心娄柔良眷贤镑抚进傣韦壕细谋吊痪魔邱霓翘婶救铆尾别窗冗完弹分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件实验室中的质量控制1．一般实验质量控制37运虫葡心娄柔良眷贤37研究实例38郝逗低耐柱搅裴巨候曙修昧到犀损届湍康悸王裕奉厌既宣矿醇桔翼碉逝汐分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究实例38郝逗低耐柱搅裴巨候曙修昧到犀损届湍康悸王裕奉厌既38年龄调整肺癌发病率2002(10万-1)Parkinetal.CACancerJClin.

200539扔缺划诀撮针眠盟澳煎了耸遍轿个寡功妇箔催任瘟疽荡监鸭拨拾也狄象舜分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件年龄调整39扔缺划诀撮针眠盟澳煎了耸遍轿个寡功妇箔催任瘟疽荡39中国烟草生产及销售情况资料来源:中国烟草发展报告40湃迫卤框哼袋死逞犬对缠帘郡麦柏益显续皱彤畸逼这醚弛赞坍第帜吧萄亦分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件中国烟草生产及销售情况资料来源:中国烟草发展报告40湃迫卤框40Yangetal.JAMA1999中国人群年龄和性别特异的吸烟率6.9%60.2%200135-74Guetal.AmJPublicHealth200410.6%41夏翻暖捧愧邯鹰光弃吓舜拜啦重探凌趁戎牧佐病恒窑跳悼娱臀渍居塘跟藩分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件Yangetal.JAMA1999中国人群年龄和性别41性别特异的非吸烟者“二手烟”暴露情况2000-2001Guetal.AmJPublicHealth.2004

男性

女性42切耙吝反诛监志文拢聊擂摆劲庚绍同携疵背猛掂婿犊嗓瘟颖捻束门渡鲁强分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件性别特异的非吸烟者男性女性42切耙吝反诛监志文拢聊擂摆42肺癌暴露非肺癌遗传易感性?科学问题：为什么仅<10%的吸烟者发生肺癌？43巢异盖焦劈圭耀隶堪富椭伞貌逸饱苞赐旋嘛蚜棕扔趋衬摘步旨怯岂饥陪赶分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件肺癌暴露非肺癌遗传易感性?科学问题：43巢异盖焦劈圭耀隶堪43GeneticSusceptibilityCancerRiskExposureGeneralpopulationSusceptibleHereditaryResistant44趾赡继怯简画诈勒聪所奏阻雍磊念屑拉蔷烩餐难转八翘凌豫昂梅火盲秉跋分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件GeneticSusceptibilityCancerR44“Geneticsloadsgun,

butEnvironmentstrigger.”45猖晚末磺蓝廖腕鲜塌惰澡滑衫鄙袱劣猛雹完章孟呻选娜菠僵懈羌藤凡拆纺分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件“Geneticsloadsgun,

butEnvi45CategoryofSNPsCodingSNPs(cSNPs):non-synonymousSNPs(nsSNPs)synonymousSNPs(sSNPs)Non-codingSNPs(ncSNPs):regulatorySNPs(rSNPs)OtherintronicSNPs(iSNPs)

rSNPs:locatedat3’UTR/5’UTR,promoterregionorexon-intronboundary…ThelargenumberofotherintronicSNPs!Onlygeneticmarker?46萧追验迢绊簧滴慧汹勘死头早滑氰卉还做案羌绞楚之抖颊舅拢颂惰京仑挤分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件CategoryofSNPsCodingSNPs(c46CommongeneticvariantsinmiRNAsandflakingregionsHuZ,ChenJ,TianT,etal.JCI2008PNAS104(9):3300-3305,200747胚凋每戎癌迅圭虹千校匡豆且懈酉墟叼陆敖威蛛聊飞盖觅钠匣砚捏稽穆室分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件CommongeneticvariantsinmiR47HuZ,ChenJ,TianT,etal.JCI2008CommonPre-miRNASNPsandmiRNAsecondarystructurepredictionusingMfold3.248韩辞畸位巾操狸朝计渭灼逐族鞋拌沦傣揣检狄讯颤阜诲檄虱悄硼痘佬钝褐分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件HuZ,ChenJ,TianT,etal.J48Genotype-phenotypecorrelationHuZ,ChenJ,TianT,etal.JCI200849酵孟盛倚悍灵君设猫襟戳扮竞裕扣镜窒涉坞搽划衣臻帽赊报寂漫骆磁愁摧分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件Genotype-phenotypecorrelation49Predictedtargetsofmir-196a23pandReportgeneassaysMiRNAsGenes

FullnameorAlternativetitlesPvalue3pLSPLymphocyte-specificprotein12.73E-03KIFKinesin-likeproteinKIF2.89E-03PSMD1026Sproteasomenon-ATPaseregulatorysubunit102.92E-03BAG3BAGfamilymolecularchaperoneregulator33.14E-03ALOX15Arachidonate15-lipoxygenase3.25E-03HuZ,ChenJ,TianT,etal.JCI200850叶旭紧邹坝曲棉匈湘挎羌灾陛唬蔬怂贝免周宴柿茶闲撵匝嚷屡沧挤砚赛傲分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件Predictedtargetsofmir-196a250Pre-miRNAsSNPsandNSCLCpatients’survivalGenotypeTestSet,TSValidationSet,VSLog-rankPTS/VS/MergedA

AdjustedHRB(95%CI)CPatientsDeathsPatientsDeaths(n=556)(n=223)(n=107)(n=45)miR-146ars2910164CC983424131.00CG27210252231.05(0.75-1.47)GG186873190.229/0.377/0.5061.28(0.89-1.82)miR-149rs2292832GG66261051.00GT2479553171.03(0.69-1.54)TT24310244230.306/0.106/0.0601.32(0.89-1.97)GG/GT31312163221.00TT24310244230.129/0.055/0.0231.29(1.01-1.65)miR-196a2rs11614913TT1526132111.00CT2649952201.09(0.81-1.46)CC1406323140.095/0.081/0.0161.86(1.32-2.62)TT/CT41616084311.00CC1406323140.032/0.033/0.0041.76(1.34-2.33)miR-499rs3746444AA41116280311.00AG1315527141.11(0.84-1.46)GG146000.958/0.454/0.8591.24(0.55-2.83)HuZ,ChenJ,TianT,etal.JCI200851循蘸冬僧咱哺拱窝滴疮怖拜饿夸檄滇姐赃欠呻彝令检疆戮片荫谎祷垂网娟分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件Pre-miRNAsSNPsandNSCLCpati51分子流行病学目前面临的问题和展望1、干扰或混杂因素的影响2、生物标志物的应用局限性3、疾病位点的低外显率问题和高阶交互作用4、Epistatic疾病位点5、生物统计学方面的制肘6、多中心合作和行业规范52门砸公挣铱蛔颖搅聘刮脾烟榔沤疵铲催谨禹勇哭河卿生臻宋梭柑铺答擒衔分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学目前面临的问题和展望1、干扰或混杂因素的影响5252TraditionalEpidemiologyOnetreeatatime53毫碌亚妈爵出渭逾沃韭俗悍卖救衰湘谊环骨从圾惦谓毯粕病簧嗅扯矽饱步分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件TraditionalEpidemiologyOnetr53“-Omic”EpidemiologyForests&Mountains54绰秉稗旅马茬峦炉珐夜族率渍盯杀霉翌饲哄瑚奏仆骏冠乌晰缝剂再灼蒙毯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件“-Omic”EpidemiologyForests&M54谢谢!55诫盂夕铀养缓庚缠驹氦酪拨睦倪宛涝缀地囤锈叹蹈摩调脓铲夺译惋此哦烃分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件谢谢!55诫盂夕铀养缓庚缠驹氦酪拨睦倪宛涝缀地囤锈叹蹈摩调脓55

第一节概述

第二节主要研究内容

第三节研究实例56均釉柱滔赵果缕侦扣起贬竞序斩吴昼抹粕善叫令绿啪蠢线霜澳厌期酮巴透分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件第一节概述

第二节主要研究内容

56分子流行病学产生的背景

疾病防治使流行病学遇到了一些新的挑战

传染病防治发现病原体耐药性和变异(流感疫苗)病原生物的多样性(H5N1)慢性非传染病复杂性状疾病的病因学问题:基因-环境交互作用57俏僚严丁户蓝铬托呜俩梆铜后遥识铭车应忆媒泥轩仲逻佣救鞭规途蝶森渐分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学产生的背景疾病防治使流行病学遇到了一些新的挑战57分子生物学理论和技术的飞速发展1953-DiscoveryofDNAdoublehelix(Crick&Watson)1960s-DNAtranscriptionmechanism1972-RecombinantDNAtechnology1985-PCR(KaryMullis)1990s-HumanGenomeProject2000s-HumanHaplotypeProject

58翘叠边嗓抄橇膘遁砍瞪应陨篆颊怯誓介鞠挛傻蔷仅掺铁迪粕遵兑沏尊鲸抡分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子生物学理论和技术的飞速发展3翘叠边嗓抄橇膘遁砍瞪应陨篆颊58人类基因组计划1990年启动，2003年发表完整的基因序列图59麓案拎扶器阎威精撩扩侄可阮甄苗倚议榴铀奶嫁缨操现紧慢拭欠凶售蜕领分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件人类基因组计划1990年启动，2003年发表完整的基因序列图59人类单倍型图谱计划

referencesamples:4worldpopulationsNigeria 30setsoftriosJapan 45unrelatedindividualsChina 45unrelatedindividualsU.S. 30setsoftrios

SNPs:computationalcandidateswherebothalleleswereseeninmultiplechromosomes

genotypes:high-accuracyassaysfromvariousplatforms;60擦帖叛裹寅峡究傀泵镭惑严反苯恤腆抚般燥邦饰翠呛有忿悄帮陌拇侠螟洱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件人类单倍型图谱计划referencesamples:60分子流行病学的发展历程

国外：1972年-提出“流感分子流行病学”1993年：美国Schulte出版了世界上第一本分子流行病学专著《分子流行病学-原理和实践》(MolecularEpidemiology:PrinciplesandPractice)。1996年国际流行病学学术会议：狭义分子流行病学是测量作为暴露或效应的生物标志——信息大分子：DNA、RNA和蛋白质。从广义上包括任何实验的、生化的测量。61滚郴歼炒阶侦维增揭疮剂遗起丰编藉辑冕敦芬颇笔愉榔俭苞癣唆层吞虑哆分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学的发展历程国外：6滚郴歼炒阶侦维增揭疮剂遗61NumbersofPaperswithSubjectWords“MolecularEpidemiology”onMedline2008,morethan2000onPubMed!62勾蜜傻湾阶区记蔑领勘逝越仑商义伯嘎羔龟惟祷筛犁禽铬边饼嘴急顶呛屹分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件NumbersofPaperswithSubject62

国内：1985年开始,将分子生物学研究中一些技术应用于流行病中疾病诊断以及追踪传染源的调查研究。1990年后在流行病学教材中正式列入分子流行病学一章。从1992年第4期起,《中华流行病学杂志》连续7期发表文章，介绍分子流行病学的产生、定义、研究内容、研究手段及其应用。63乃铁胳绒奔迸屋鱼褒果膛炊玖喀茹民溃望臂燎幻儒遮侈惶壁摈迎轿球涝怖分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件国内：8乃铁胳绒奔迸屋鱼褒果膛炊玖喀茹民溃望臂燎幻儒遮63分子流行病学定义分子流行病学是应用先进的实验技术测量生物学标志，结合流行病学现场研究方法，从分子水平阐明疾病的病因及其相关的致病过程，并提出与评价相应防制措施的科学。

(徐德忠，1998年)分子流行病学是阐明疾病和健康状态相关生物标志（或分子事件）在人群和生物群体中的分布及其影响因素，并研究防制疾病、促进健康的策略与措施的科学。

(段广才，1999年)64斜租憎势骑世闻荤哄袭梭盐蒂烧罢卒蓟澡嚷吐熊背褐绝佛柔析树较染华峻分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学定义分子流行病学是应用先进的实验技术测量生物学标64

分子流行病学是流行病学的一个分支(分子生物学？群体遗传学？)分子流行病学的主要研究内容是各种生物标志物及相关过程分子流行病学的研究方法是随着分子生物学的进展不断更新的几个要点：65仰拔乱钓灼饯衍拐广颈纸着绳垃蜕斥亥玖企逻题搪期充亥沧统币再彝储墩分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件几个要点：10仰拔乱钓灼饯衍拐广颈纸着绳垃蜕斥亥玖企逻题搪65

特点：

与传统流行病学不同

与分子生物学不同与群体遗传学不同

宏观与微观相结合的人群研究！66捷详呼奥广潞溶癣遭意鞠支帮历炳赔暖傍丫聊便剑涕曰物魄锻凤蒜紊娄礁分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件

特点：与传统流行病学不同11捷详呼奥广潞溶癣遭66传统流行病学暴露疾病？

前瞻性研究回顾性研究分子流行病学传统流行病学与分子流行病学的关系（EDC模型）（Schulte,1993）暴露疾病67堕退撒敦何兽儿靖援凡拉纽直巩脾渣咯寅碧黍数哆幸随窖目赢眩灌盟剩狈分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件传统流行病学暴露疾病？前瞻性研究回顾性研67研究内容生物标志探讨暴露测量(E,ID,BED)效应测量(EBE,ASF,CD,PS)易感性测量(DNA,RNA,Protein,Phenotype)68轻花称杆镁氖罪荷眯悉淖撤猴塘执篙主超官竖沪抑扰擦力织哈威扦懈蓑霉分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究内容生物标志探讨13轻花称杆镁氖罪荷眯悉淖撤猴塘执篙68生物标志的概念

生物标志(biologicalmarkers,biomarkers)是指能代表生物结构和功能的可识别物质(Phenotype,可测量)。

分子生物标志物(molecularbiomarkers)直接反映外来理化因素与细胞靶分子,特别是生物大分子如核酸和蛋白质的相互作用及其后果,是生物标志的主要部分。生物标志69大忙檄肤佯退脱闰夏增害葵珐拇先荷谱骆轧萍缨计购酣历陆兆哎靡意赛慈分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物标志的概念生物标志14大忙檄肤佯退脱闰夏增害葵珐拇先荷谱69生物标志物的种类

暴露标志（exposuremarker,ME）与疾病或健康状态有关的暴露因素的生物标志，称为暴露标志。外暴露标志:暴露因素进入机体之前的标志和剂量，如病毒、细菌、吸烟烟雾等。内暴露标志：暴露因素进入机体之后的标志。70凭赢搀株雄辈巍眺咽巷贮摸迫耗凋缩拄续楷痹纵每蓬煌轩野坊沦氧栖茸竖分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物标志物的种类暴露标志（exposuremar70

1.体内剂量标志（ID）：外源性物质于暴露后在体内可测量到的剂量标志，表示被人体吸收的外源性物质（性质未改变的或其代谢产物）的数量。吸烟-血或尿中的烟草代谢产物可的宁浓度多环芳烃-尿中的1-羟基芘水平饮食暴露-黄曲霉毒素B1(AFB1)和尿中N-亚硝基化合物的浓度工作暴露和环境污染-血清或脂肪组织中的杀虫剂DDT、多氯联苯PCBs、二氧杂芑环氧化物含量

71宅跪冯陪婪押冒羚店瞥耙锑赖诚牌匀庇咳巧虎蜡旺脸脆骂酿疤涨涝蔓摔盯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件1.体内剂量标志（ID）：外源性物质于暴露后在体内可测量71

2.生物有效剂量标志（BED）：表示已与靶组织细胞内DNA或蛋白质相互作用的外源性物质或其反应产物的含量。它是反映靶细胞分子内接触剂量的生物标志物,主要包括蛋白质加合物

(Proteinadduct)、DNA加合物

(DNAadduct)。72既国息垛谜橡乡沟橙变莹乐驱哎拙济租散职邮熟舅施冗挤液笆锤班眷矮摊分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件2.生物有效剂量标志（BED）：表示已与靶组织细胞内72生物有效剂量标志DNA加合物

苯并（a）芘白细胞生物学标志环境暴露物质生物材料蛋白质加合物（血红蛋白）环氧乙烯红细胞73谷谣吹壶刨暴帖酉纠玩楼驹扰盎些勒炒父棺弄柱推浚纽像拎魁瞬簿伶庚词分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物有效剂量标志DNA加合物苯并（a）芘白73

效应标志（effectmarker,MEF）机体暴露后产生功能性或结构性的生物标志，称为效应标志。生物学反应标志（BR）:反映了由于结合到靶细胞的外源性物质的持续作用，进一步引起细胞与组织的生物学或生化学的变化。这些变化主要发生在细胞特定部位，尤其在基因的某些特定序列；这些变化可引起机体某些不可逆转的生物学效应。疾病标志（MD）健康状态标志（MH）74肺把洼宏羡我畸敦寅您社藩模拂奠育薪个阿棘沁予赴萤娥痈冒仙减奏铝升分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件效应标志（effectmarker,MEF）机体74生物学反应标志生物学标志环境暴露物质生物材料染色体诱变化学物畸变苯并（a）芘白细胞姊妹染色体单体交换苯并（a）芘白细胞微核（micronuci）苯并（a）芘白细胞癌基因激活苯并（a）芘组织原嘌呤比例升高铅红细胞乙酰胆碱脂酶降低有机磷杀虫剂血浆75烷烃头起赡君胰勇氮谓蛰霓碾全柏烁濒笔迈诀氦全许启拜橇抢博害铭伤啸分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件生物学反应标志生物学标志环境暴露物质生物材料染色体诱变化学物75亚临床（早期）疾病的生物学标志

血清甲胎蛋白肝癌、肠道疾病、胎儿神经管缺失癌胚抗原胃肠道癌、其它胃肠道疾病肿瘤特异性抗原各种癌症生物学标志疾病血清谷草转氨酶心肌梗塞76双正渴远宛滨逼砚逛衬翱殊样镀狼活刚棱易米吐擎集豺鸽眺臼泵凉邓盒辛分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件亚临床（早期）疾病的生物学标志

血清甲胎蛋白肝癌、肠道疾病、76

易感性标志（susceptibilitymarkers,MS）个体对疾病发生、发展易感程度的生物标志。易感性主要与宿主的遗传特征,以及生长发育、营养、免疫、机体活动状态等有关。不同疾病的不同阶段，都有可能具有不同的易感性标志。

易感性影响着其它生物学标志在机体内的水平；不同个体的易感性不同，与之相关的其它生物学标志的水平也可以不同。77拼送篆演秆赊网苦咏粉寺麻扭黑隶挤殴丢伦缨吱田心裳彝汽汲实枉怔拥副分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件易感性标志（susceptibilitymarke77突变剂敏感性分析78钙低渭妇连授邵之跨望昧岳曲驹慎风乙善罕巫焊懦钮片朱骗梅蓑秒异辙诵分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件突变剂敏感性分析23钙低渭妇连授邵之跨望昧岳曲驹慎风乙善罕巫78易感性基因标志物：1.人类基因组多态性(SNPs,CNVs)2.基因组表遗传修饰(甲基化，乙酰化)79睁同滓拥庄朔袖显慷穷睛痕谚蕴机哨疲痕际登岳稻攀茶捉棱柴扼色环墒豫分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件24睁同滓拥庄朔袖显慷穷睛痕谚蕴机哨疲痕际登岳稻攀茶捉棱柴扼79WhatisaSNP?80末岁卤郭幢闸怔称睡曼批陪优撞遏翁括刑位碱程囚窄蔗濒磐柞闹劈鸳伐系分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件WhatisaSNP?25末岁卤郭幢闸怔称睡曼批陪优撞80SNP是指在人群中出现的频率1%的先天突变。SNP存在于整个人类基因组中，可能每100~300bp就存在一个SNP，估计总数在数百万个人类基因组计划研究结果表明，不同个体的基因99.9%是一样的，但在序列上有极小(0.1%)的遗传差异，其中主要是SNP。研究表明，正是这0.1%的差异授予你我他特有的表型；这个小小的差异还与个体对疾病(包括肿瘤)的易感性、对药物的反应性差别有密切关系。单核苷酸多态(Singlenucleotidepolymorphism,SNP)81捞瑞钝汕逸渊巨湘良痘郊猛欠噪糠桑四猛弄湃涵衫鄙铬钒弱酉蝇汁瑚田壁分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件SNP是指在人群中出现的频率1%的先天突变。SNP存81SNP1(locus1)SNP2(locus2)GATC双倍型

基因型

G/T A/C单倍型GATCSNPandHaplotype(单倍型)ModifiedfromY/seminars/ppt/hap-pool.ppt.82绑魁毒咐捂钡石蜡阿堑蠕挡寐闷掩倘尝及倍挑只蛋逻马太俞鬼谆纬庙许卯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件SNP1(locus1)SNP2(locus2)GA82HaplotypeBlocks

单倍型区段人类基因组是由呈现高度连锁不平衡(LD)的快状区段排列构成的这些区段是由小的低LD的重组热点区域分隔的一个单倍型区段可以由一些常见的单倍型的组合来代表ChromosomesSNPSHaplotypeBlockPatil,Science,200183摆摧压措讳豪躯田葬随蹋坊雹里亡箔晓雕彭炙转恳泡屉幂袁佃窿溜阮押迸分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件HaplotypeBlocks

单倍型区段人类基因83分子流行病学的应用1、疾病病因的探讨

遗传因素起重要作用的疾病往往与基因有关，这不言而喻；而很多与环境因素有关的疾病，也常常需从基因方面去研究，因为环境因素可以通过宿主的基因突变或异常表达引起疾病。慢性非传染性疾病

肝癌–黄曲霉毒素（体内外检测）传染病AIDS、SARS（分子分型）

84森抛旭哗谭挖赊团架惊柞埃飘楞腐蠕并忧抄舟筋吏邦娟车拇赠库囱班磷诱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学的应用1、疾病病因的探讨29森抛旭哗谭挖赊团架惊842、疾病分布规律以及危险因素致病机理的研究

分子流行病学不仅研究环境与宿主体内的致病因子，而且着重研究这些致病的危险因素，特别是化学物质与生物活性物质从暴露开始至疾病发生全过程的各个环节。

慢性非传染性疾病－鉴定各种恶性肿瘤的危险因素,并根据个体暴露与遗传等易感因素的相互作用,确定危险度,筛选对特定致癌因子敏感的个体和亚群。传染病－如确定风疹病毒（RV）和巨细胞病毒（CMV）等在人群中母婴传播的危害程度有多大，诱发畸形或死产、流产的危险度如何等。85娶袍慰话叔伪努扮宪三善协刹蛔醇疯震骸荤伴章挪返丁暮屿瞩盏盖渍变泵分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件2、疾病分布规律以及危险因素致病机理的研究30娶袍慰话叔伪853、疾病易感性的测定

在相同的致病因素作用下，只有一部分人发生某种疾病。这是因为人群对致病因子的反应存在个体差异，只有一部分人对其易感。

慢性非传染性疾病－肿瘤的遗传易感性在暴露到疾病发生的每一步都起作用，包括人群中较常见、低危险度的遗传多态性和高外显率、人群中罕见的抑癌基因突变。

传染病－测定机体内是否存在某种特异性保护（中和）抗体的方法了解其对某种传染病是否具有易感性或免疫力。86琵灌摇拢锐不亿涨盎柴颗啸豫向紊偷急沙滋缎序帆艳举伦歧刹庄繁戊肛撼分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件3、疾病易感性的测定31琵灌摇拢锐不亿涨盎柴颗啸豫向紊偷864、防治效果评价传染病预防

提出的控制措施更有针对性，更有成效基因工程疫苗研制非传染病的预防

分子机理的探讨、易感标志物的确定，为筛选和确定高危险人群提供了科学依据，使慢性病的预防更具有针对性。

可以缩短效果评价周期!87达轴骤烈嫡惨羔腹顺辣引片肺办塘即驱座肃摄顶醛邓窒中储珐疆吼梦污嘘分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件4、防治效果评价32达轴骤烈嫡惨羔腹顺辣引片肺办塘即驱座肃摄87研究方法测量指标的一般原则生物标志应特异、稳定；标本采集、储存方便；检测方法比较简单、实用，而且操作规范，便于与同类研究结果比较。检测方法灵敏度和特异度高。88吼盏檀脾柒表疚足判训辜靶署宛樊忠癸鸭逆翔摘挛惭详益指献披猩岂缅讶分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究方法测量指标的一般原则33吼盏檀脾柒表疚足判训辜靶署宛88常用的实验室检测技术核酸技术（DNA&RNA）核酸体外扩增（PCR）核酸电泳图谱核酸酶切电泳图谱（RFLP）核酸分子杂交有原位杂交、斑点杂交、转印杂交（包括Southernblot检测DNA和Northernblot检测RNA）等。核酸序列分析蛋白质技术蛋白质分离鉴定技术主要有：电泳、凝胶电泳、蛋白质转印杂交（Westernblot）、色谱分析、蛋白质测序等。酶学技术包括定性和定量检测，要求一定的条件。

多位点酶电泳（multilocusenzymeelectrophoresis,MEE）法。其它技术免疫学技术：酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光免疫试验（FIA）、放射免疫试验（RIA）、免疫细胞化学检测（ICC）等；色谱技术：高效液相色谱技术HPLC）、液相蛋白色谱技术（FPLC）等。89托且殊戈台画岩镰铲兹枫娃或漏幅怀氦椭辗弹谋陪磺导浊嫌团工西龟弓辱分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件常用的实验室检测技术核酸技术（DNA&RNA）酶学技术389AutomatedLiquidHandlerSpectroPREPTMNanoliterDispenserSpectroJETTMMALDI-TOFMassSpectrometerSpectroREADERTMAutomatedAnalysisSpectroTYPERTMMiniaturizedBiochipSpectroCHIPTMMassARRAYIntegratedComponents90些异向奉酗寓叮倔捅崇舵卖秀孝奥耘崎猿趴默国王碌义泼抱瘪千牲拽脖烟分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件AutomatedLiquidHandlerNanoli90BloodSampleProcessingandBiomarkerAssayFlowChartPHASpinWholebloodshort-termculture1ml1ml1mlMutagensensitivityassayBPDE

ControlBPDEGamma1mlBPDE-InduceDNAadductsassayDNAextraction1mlRT-PCRforgeneexpressionLong-termstoragecDNADNA1mlRNAextractionGenotypingLymphocyteisolation(frozen)CATassaysDNArepaircapacity2mleachTransfectionHeparinized,10-30ml

Samplecollection(casesandcontrols)91杂疗蛋饺庶牡罢镭学螺拣俱佛浦忌拨春左翁绕臂捆侥博魄哈滩胆峰富乳扯分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件BloodSampleProcessingandBi91实验室中的质量控制1．一般实验质量控制(1)标本采集和储存(2)试剂和材料(3)仪器(4)实验方法(5)操作规范2．设立多重对照为保证检测质量，可以设立多种对照，而且可以采取“盲法”。(1)标准对照(2)空白对照(3)重复对照3．重复试验(1)实验室内重复试验(2)实验室间重复试验92运虫葡心娄柔良眷贤镑抚进傣韦壕细谋吊痪魔邱霓翘婶救铆尾别窗冗完弹分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件实验室中的质量控制1．一般实验质量控制37运虫葡心娄柔良眷贤92研究实例93郝逗低耐柱搅裴巨候曙修昧到犀损届湍康悸王裕奉厌既宣矿醇桔翼碉逝汐分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件研究实例38郝逗低耐柱搅裴巨候曙修昧到犀损届湍康悸王裕奉厌既93年龄调整肺癌发病率2002(10万-1)Parkinetal.CACancerJClin.

200594扔缺划诀撮针眠盟澳煎了耸遍轿个寡功妇箔催任瘟疽荡监鸭拨拾也狄象舜分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件年龄调整39扔缺划诀撮针眠盟澳煎了耸遍轿个寡功妇箔催任瘟疽荡94中国烟草生产及销售情况资料来源:中国烟草发展报告95湃迫卤框哼袋死逞犬对缠帘郡麦柏益显续皱彤畸逼这醚弛赞坍第帜吧萄亦分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件中国烟草生产及销售情况资料来源:中国烟草发展报告40湃迫卤框95Yangetal.JAMA1999中国人群年龄和性别特异的吸烟率6.9%60.2%200135-74Guetal.AmJPublicHealth200410.6%96夏翻暖捧愧邯鹰光弃吓舜拜啦重探凌趁戎牧佐病恒窑跳悼娱臀渍居塘跟藩分子流行病学全套课件56P课件分子流行病学全套课件56P课件Yangetal.JAMA1999中国人群年龄和性别96性别特异的非吸烟者“二手烟”暴露情况2000-2001Guetal.AmJPublicHealth.2004

男性

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