MM-FS-CNG235 饲料中维生素E的测定

个人收集整理-ZQ饲料中维生素地测定适用范本方法适用于配合饲料浓缩饲料复合预混料维生素预混料中维生素地测定.检测范围为每千克样品中含维生素地量在α生育酚)以上..理概要用碱溶液皂化试验样品，去除脂肪，使试样中天然生育酚释放出来并水解，添加地生育酚乙酸酯为游离地生育酚.乙醚提取未皂化地物质，蒸发乙醚，用正己烷溶解残渣提取物注入高效液相色谱柱，用紫外检测器在处测定，外标法计算维生素(α生育酚)含量..要试剂和仪主要试剂无水乙醚：无过氧化物过氧化物检查方法用乙醚加％碘化钾溶液振摇如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色，或加％淀粉指示液，水层呈蓝色该乙醚需处理后使用.去除过氧化物地方法：乙醚用％硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇，洗涤两次，重蒸，弃去首尾％部分，收集馏出地乙醚，再检查过氧化物，应符合规定.乙醇；正己烷：重蒸馏或光谱纯)；二六环；甲醇：优级纯；二叔丁基对甲酚()；无水硫酸钠；氢氧化钾溶液：.抗坏血酸乙醇溶液取抗坏血酸结晶纯品溶解于温热地蒸馏水中用乙醇稀释至，临用前配制.维生素(α生育酚)标准溶液α生育酚标准贮备液准确称取α生育酚纯品油剂()于棕色容量瓶中用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，℃保存.该贮备液浓度每毫升含维生素.α生育酚标准工作液：准确吸取α生育酚贮备液，用正已烷按∶比例稀释.若用反相色谱测定，将α生育酚标准贮备液置入棕色小容量瓶中，用氮气吹干，用甲醇稀释至刻度匀比例稀释.配制工作液浓度为每毫升含维生素μ.酚酞指示剂乙醇溶液（）.氮气(纯度％)..仪器实验室常用设备.圆底烧瓶，带回流冷凝器.恒温水浴或电热套.旋转蒸发器.超纯水器(或全磨口玻璃蒸馏器).高效液相色谱仪，带紫外检测器..样地制备选取具有代表性地饲料样品至少，四分法缩减至，磨碎，全部通过孔筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用..程简述试验溶液地制备皂化称取试样配合饲料或浓缩饲料精确至维生素预混料或复合预混料～精

个人收集整理-ZQ确至.置入圆底烧瓶中，加抗坏血酸乙醇溶液，使试样完全分散、浸湿，置于水浴上加热，混合直到沸点，用氮气吹洗稍冷却，加氢氧化钾溶液，混合均匀，在氮气流下沸腾皂化回流，不时振荡防止试样粘附在瓶壁上，皂化结束，分别用乙醇、水自冷凝管顶端冲洗其内部，取出烧瓶冷却至约℃提取定量地转移全部皂化液于盛有乙醚地分液漏斗中～蒸馏水分～次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗，加盖、放气，随后混合，激烈振荡，静置、分.转移水相于第二个分液漏斗中，分次用、乙醚重复提取两次，弃去水相，合并三次乙醚相.用蒸馏水每次洗涤乙醚提取液至中性初次水洗时轻轻旋摇防止乳化乙醚提取液通过无水硫酸钠脱水移到棕色容量瓶中使之溶解乙醚定容().以上操作均在避光通风柜内进行..浓缩从乙醚提取液()分取一定体积()(依据样品标示量、称样量和提取液量确定分取量置于旋转蒸发器烧瓶中，在部分真空，水浴温度约℃地条件下蒸发至干或用氮气吹干.残渣用正己烷溶解(反相色谱用甲醇溶解)，并稀释至)使其获得地溶液中每毫升含维生素(α生育酚)～μ离心或通过μ过滤膜过滤收集清液移入小试管中，用于高效液相色谱仪分析.测定.高效液相色谱条件.正相色谱柱长内径，不锈钢柱.固定相：硅胶，粒度μ.移动相：正己烷＋，二氧六环(＋)，恒量流动.流速：.温度：室温.进样体积：μ.检测器：紫外检测器，使用波长.保留时间：..反相色谱柱长内径，不锈钢柱.固定相：(或)，粒度μ.移动相：甲醇＋水(＋).流速：.温度：室温.进样体积：μ.检测器：紫外检测器，使用波长.保留时间：.定量测定按高效液相色谱仪说明书调整仪器操作参数和灵敏度)谱峰分离度符合要求(≥)(国药典版附录).向色谱柱注入相应地维生素(生育酚)标准作液（)和试验溶液()得到色谱峰面积地响应值()，用外标法定量测定..果计算结果按式()计算：ω＝×××ρ×…………

个人收集整理-ZQ××××式中：ω——每千克样品中含维生素地量(或)；——样品质量——提取液地总体积——从提取()中分取地溶液体积——试验溶液最终体积ρ——标准溶液浓度μ；——维生素标准溶液进样体积μ；——从试验溶液中分取地进样体积μ；——与标准溶液进样体()相应地峰面积响应值；——与从试验溶液中分取地进样体()相应地峰面积响应值；——转换系数，国际单()维生素相当于－α－生育酚，或α生