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书【产品名称】酬名新人翻嬴翱殿觥PCR做院盒敷名次;Shuwen'HumanEGFBGeneMutationDetectionKittaReal-TimePCR【预卿制EG眼是,卿卜电由表面的僧小白曼的班睛氨酸效雷(TyrosineKin^c,TK)话,是原雕0wbM(HER-1)的表达产机EGFR的主要信号与导途的有;H3KJDK通配RAS-RAF-MEK-ERK-MAPK施断PLC』/觥,JAK-5IAT暇。通过这酷相能献阚蹴为旭棉号,从而棚蚓膊雕号嘛,脚掰蛹妹、加媪摊雉糠亡EGFR异就趣过多棘制嬲奥跳靴,疏受体咖鳏达、藏、生长肝爱能分解椭侬及带趟帽麟新其中涉跚戳蚓进展的雕中触见虢EGFR犍因突翅速衷逐EG飕雕节髅色懒磬plR低嶙渊阚底其藏提姓曲G理麴酸麟的ATP豁触瓣驱阑脚犍子),撇翅,EG网穗醐棘撇(醐吉耦&m冰舸靓等)就鸵嬲翱的妓有的神关也睛喘报献蛹叫突变与吉精般再次用灯.:鹏网!,:注如法记回肝mw出心/版小匕博丽篇般M大轴阚帙的占所有突变制洗其中病种耐E防A7聊底也帆山和2处金汕I川腻为岩用上制IM日工1Mdi也占料的代ol乩日NiiHwqb佑片虫赤;上工方鹿苏的代皿之七.乩旦MiqMiihL猊Q也贩觥1150S茴霭枝贩麻1150外在做题滋1159T礴130阳㈱靴(A1100璃嬲水1500跳一肝脑触反疑副穆蒯歇卜都蝴的乐mmABI7300jABI750II,ABI7MABISkpOnc,ABIStepOnePlus,Rotor-GtneQ【就熟】本撷舸嫌飘藕嬲那FPE嬲巾髀舶M,DNA质量魏魏哪岫懈性相施鼠加撷量罪械翻间、琳獭、DNA嬲方流切肤而且所糠懒床林中唏嬲螂的歌程她洞,WffWWih新辆枷船过程打柘林奸后应雏瞰入⑳既下斓林隔碉钺购制备过程中,标林应在1个小时械人10%中性聊麻3林麟帼后膻应为嬲聊小,战的触布耶小粒机工新辘辘本要询皤有耦螺杆惘遍族娅惚虱映购战乳髓使聃岐糊鲤娜MAXYGEN,QIAGE嚅祠产时期的心邮分觥的撷啦榭底\照:心也包腹其二错碍创帽「戒娘33、网憾解临藕髓翎翩魄艮量去除献嬲及石蒯氨睛稣触M剂盒期突变19-del1)19-dei2)S768I20-InsT790ML858RL861QG719X外控1样品1样品1样品1样品1样品1样品1样品1样品1样品12样品2样品2样品2样品2样品2样品2样品2样品2样品23样品3样品3样品3样品3样品3样品3样品3样品3样品34样品4样品4样品4样品4样品4样品4样品4样品4样品45样品5样品5样品5样品5样品5样品5样品5样品5样品56STDSTDSTDSTDSTDSTDSTDSTDSTD7NTCNTCNTCNTCNTCNTCNTCNTCNTC1.打开操作软件,设置PCR扩增程序为19-del(1)19-del(2)S768I20-InsT790ML858RL861QG719X阳性CT<28CT<28CT<30CT<28CT<28CT<28CT<29CT<28阴性CT28CT28CT30CT28CT28CT28CT29CT28Stage1:95℃5minStage2:95℃20s,57℃32s,5个循环Stage3:95口20s,60℃32s,40个循环收集FAM信号注:如果使用ABIO量PCR仪,将PassieReeene设置为Nne,ete设置为“FAM”,“quencher”设置为“TAMRA”【参考值】检测结果判定:当样品CT值大于或等于阴性临界值时,则该样品为阴性或低于口试剂盒的检测下限。当样品CT值小于阴性临界值时,则该样品为阳性。表3结果判定【实验结果的解释】阈值设定:针对ABI7500机型,对以上9种检测分别设定阈值,其中19-del(1),19-del(2)和G719X阈值设定为12000,其他为30000阴性无模板空白对照(NTC)应无扩增曲线升起;否则表明此次实验结果无效,建议更换操作环境或反应试剂,重新试验。(若只稍稍升起,但对结果判断无显著影响,则结果依然有效)阳性对照Ct值一般小于25,参照基因体系的阳性对照CT值一般小于23,但须根据仪器型号等情况进行判断。
管,一并划定阈值,从而得到外控CT值和样品的突变CT值。5.参照基因CT值应控制在23之前,以用于评估反应体系中的DNA模板量。若外控CT值大于23,说明加入的DNA含有PCR抑制剂或DNA加入量太少,需重新提取或增大DNA加入量再做。(仅对全阴性结果而言;若已经判断为阳性,结果仍然可靠)4.CT值确定:建议对于一个突变检测体系应同时选择参照基因反应管,STD反应管,NTC和样品反应附表:突变外口子碱基变化CosmicID对应检测体系E746_A750del(1)192235-2249del1562231号反应体系19-DelD1)E746_A750del(2)192236-2250del156225L747_P753>S192240-2257del1812370E746_T751>I192235-2252>AATdel1813551E746_T751>A192237-2251del1512678E746_S752>D192238-2255del186220L747_A750>P192238-2248>GCdel1112422L747_T751>Q192238-2252>GCAdel1512419L747_E749del192239-2247del96218L747_T751del192239-2253del156254L747_S752del192239-2256del186255L747_A750>P192239-2248>Cdel1012382
L747_P753>Q192239-2258>CAdel2012387L747_T751>S192240-2251del126210L747_T751del192240-2254del1512369L747_T751>P192239-2251>Cdel1312383E746_T751del192236-2253del18127282号反应体系19-DeI2)E746_S752>A192237-2254del1812367E746_S752>V192237-2255>Tdel1912384S768I202303G>T62413号反应体系S768IH773_V771insH202319-2320insCAC123774号反应体系D770_N771insG202310-2311insGGT1237820-InsV769_D770insASV202307-2308insGACAACGTG12376T790M
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