细胞工程绪论课件

4细胞工程第一章细胞工程简介(jiǎnjiè)第一页，共五十九页。第一节生物工程(shēnɡwùɡōnɡchénɡ)也称生物工艺学，一般称为生物技术。以生命科学为基础，利用生物体系和工程学原理生产生物制品和创造新物种的一门综合技术。换言之，就是利用生物有机体（从微生物直至(zhízhì)高等动物）或其组成部分（器官组织细胞）发展新工艺或制造新产品的一种科学技术。第二页，共五十九页。1.生物工程(shēnɡwùɡōnɡchénɡ)的发展历程第一代生物工程4000年前酿酒1674显微镜列文虎克发现微生物清康熙十九年第三页，共五十九页。8第四页，共五十九页。9第五页，共五十九页。古代的中国(zhōnɡɡuó)是怎么酿酒蒸煮粮食，是中国人酿酒的第一道程序，粮食拌入酒曲，经过蒸煮后，更有利于发酵，在传统工艺中，半熟的粮食出锅后，要铺撒在地面上，这是酿酒的第二道程序，也就是搅拌、配料、堆积和前期发酵的过程。晾晒粮食的地面有一个专门的名字，叫晾堂。酒窖，内壁和底部都用纯净的黄泥土涂抹，窖泥厚度8厘米到25厘米不等。酒窖里进行的是酿酒的第三道程序，对原料进行后期发酵。经过窖池发酵老熟的酒母，酒精浓度还很低，需要经进一步的蒸馏和冷凝，才能得到较高酒精浓度的白酒，传统工艺采用俗称天锅的蒸馏器来完成。在基座上架着巨大的天锅，天锅分上下两层，下面的锅里装酒母，上面的锅里装冷水(lěngshuǐ)，基座上柴火旺盛，蒸煮酒母，含有酒精的气体被上面的冷水(lěngshuǐ)冷却，凝成液体，从管道流出，这就是蒸馏酒。

第六页，共五十九页。1857巴斯德清朝咸丰年间(1850～1861)证实酒精发酵是由活酵母引起的，其他发酵产物也是由不同微生物的作用而形成。19世纪末到20世纪30年代,工业发酵过程陆续出现，如，乳酸,酒精,丙酮,柠檬酸,淀粉酶等的生产。上述产品大多数是嫌气发酵过程的产物，产物的化学结构比较简单，属于初级代谢(dàixiè)产物，同时生产过程也比较简单，对设备的要求不高，规模不大。第七页，共五十九页。第二代生物工程(近代生物工程)1928发现青霉素，1943年,工业化20世纪40年代第二次世界大战时期，军队需要一种有效而副作用小的抗细菌感染的药物治疗因创伤(chuāngshāng)引起的感染及继发性疾病。1928弗莱明发现青霉素。1940年证明具有卓越疗效和低毒。但是大规模制备困难。第八页，共五十九页。1941年，美国和英国合作对青霉素的大规模生产技术进行研究(yánjiū)和开发，1943年开发出一条青霉素沉浸培养工艺。不久，链霉素，金霉素，新霉素等相续问世，抗生素工业的兴起标志着工业微生物的生产进入了一个新的阶段。第九页，共五十九页。抗生素生产的经验促进其他发酵产品的发展，最突出的是20世纪50年代氨基酸发酵工业和60年代的酶制剂工业，与第一代生物工程产品相比，这一时期的特点是：产品类型多,包括初级代谢产物，次级代谢产物，以及生物转化(shēnɡwùzhuǎnhuà)，酶反应等产品。技术要求高,生产过程需在无菌条件下进行，大多数为好气发酵发酵规模大第十页，共五十九页。第三代生物工程(现代生物工程)1953年,美国的沃森和克里克发现了DNA双螺旋结构，为DNA重组奠定了基础，1974年美国的波依耳和科恩首次在实验室中实现了基因转移(zhuǎnyí)，从而使人们有可能在实验室中组建按照人们意志设计新的生命体。

第十一页，共五十九页。20世纪(shìjì)70年代后，随着基因重组，细胞和组织培养，酶的固定化，动物植物细胞的大规模培养，现代化生物反应器和计算机的应用，以及产品分离，纯化等技术的发展，生物工程进入了一个新的发展阶段------现代生物工程阶段。第十二页，共五十九页。这期间的现代生物技术以及(yǐjí)产品的特点是运用了DNA重组技术，产品有：干扰素，胰岛素，生长激素及其相关因子，淋巴细胞活素，血纤维蛋白溶解剂，疫苗，胸腺素，白蛋白，血因子，促红细胞生长素，促血小板生长素，降血钙素，绒帽促性腺激素，抗血友病因子，乙型肝炎疫苗，以及氨基酸，食品加工酶，单细胞蛋白，生物杀虫剂，生物杀菌剂，生物完全降解塑料等等。第十三页，共五十九页。16第十四页，共五十九页。其中最具代表性生物技术产品为转基因生物和克隆动物。目前，美国40％以上的农田种植了经过基因改良的作物。我国批准生产的转基因作物为棉花和番木瓜。1996年7月英国(yīnɡɡuó)成功采用成体体细胞克隆出绵羊多莉更是一项里程碑的现代生物工程成果。第十五页，共五十九页。18第十六页，共五十九页。现代(xiàndài)生物工程的特点和组成生物工程与生物学,化学等基础理论科学的区别显而易见,后者主要为前者提供某种生物产品的制造的理论支撑。生物工程操作的对象是有生命的物质,这是与化学工程等其他(qítā)工程类学科最明显的不同。第十七页，共五十九页。20第十八页，共五十九页。2.生物(shēngwù)技术的组成发酵工程酶工程蛋白质工程基因工程(jīyīngōngchéng)生化工程细胞工程第十九页，共五十九页。现代发酵工程主要指利用微生物、包括利用DNA重组技术改造的微生物在全自动发酵罐或生物反应器中生产某种商品的技术。现代发酵工程是生物代谢、微生物生长动力学、大型发酵罐或生物反应器研制、化工原理等密切结合(jiéhé)和应用的结果。a.发酵(fājiào)工程第二十页，共五十九页。第二十一页，共五十九页。24第二十二页，共五十九页。b.酶工程酶可特定地促成某个化学反应而他们本身却不参与反应，具有反应效率高，反应条件温和，反应产物污染小，能耗低，反应容易(róngyì)控制等特点。酶工程就是利用酶的催化作用，采用适当的生物反应器工业化地生产人类所需的产品或是达到某一特殊目的的一门生物工程技术。酶工程开发生产的酶主要6大类，氧化还原酶，转移酶，水解酶，裂解酶，连接酶，异构酶。第二十三页，共五十九页。蔗糖(zhètáng)转葡糖基酶第二十四页，共五十九页。27酶工程的研究和应用(yìngyòng)范围包括：天然酶的分离纯化以及鉴定和生产酶的固定化酶生物反应器的研制和应用第二十五页，共五十九页。基因工程水平上的蛋白质改造：通过基因融合或基因定位诱变等手段改变蛋白质的结构和功能；将DNA合成技术用于蛋白质功能片断多肽基因的合成，可创造结构和功能全新的蛋白质。蛋白质修饰：对蛋白质分子进行化学修饰，提高蛋白质的稳定性或催化能力，或更适合酶固定化而用于实践。还可延长蛋白质药物(yàowù)的生物半衰期，改变其免疫原性，提高对蛋白酶的抗性。c.蛋白质工程(gōngchéng)第二十六页，共五十九页。第二十七页，共五十九页。“后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”，即从对基因信息的研究(yánjiū)转向对蛋白质信息的研究(yánjiū)，包括研究(yánjiū)蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上，对蛋白质人工改造与合成，最终获得商业化的产品。第二十八页，共五十九页。基因工程是根据分子生物学和遗传学原理，设计并实施一项把一个生物体中有用的目的DNA(遗传信息)转入另一个生物体中，使后者获得新的需要的遗传性状或表达所需要的产物，最终实现(shíxiàn)该技术的商业价值。d.基因工程(jīyīngōngchéng)第二十九页，共五十九页。基因工程与建筑工程第三十页，共五十九页。e.生化(shēnɡhuà)工程生物化学工程是由生物科学与化学工程相结合的交叉学科，主要研究将生物技术的实验室研究成果转化为生产力过程带有共性的工程技术问题，是生物技术的一个重要组成部分。早期的生物化学工程曾经为发酵(fājiào)和酶反应过程的产品迅速发展做出杰出贡献。20世纪80年代后，生物化学工程则主要转向为基因工程，细胞工程等现代生物技术产品的产业化服务。第三十一页，共五十九页。第三十二页，共五十九页。今后生物化学工程重点研究方向大致包括以下4个方面：1、新型生物反应器系统以及相关培养和放大技术(jìshù),工艺的研究与开发;2、新型分离方法和设备的研究开发;3、描述生物反应过程的数学模型的建立;4、生产过程在线检测和控制手段的完善.第三十三页，共五十九页。37第三十四页，共五十九页。38第二节细胞工程第三十五页，共五十九页。多核细胞发现植物学：1902年德国植物学家发现植物细胞全能性。1934年生长素发现1937年离体培养胡萝卜组织，并使细胞增殖1960年原生质体制备1972年体细胞杂种植株(zhízhū)动物学1907年培养蛙胚神经组织1965年动物细胞融合诱导1.细胞工程的发展(fāzhǎn)历史第三十六页，共五十九页。细胞工程发展到今天，人们(rénmen)借助于细胞工程技术可以把生命像积木那样组装起来，进行细胞水平上的生命组合。一只老鼠有3个父亲、4个母亲，而且还都是绝对有“血缘”关系的。这些听起来有些令人难以置信，但科学家已经将它变成了现实。这是细胞工程在动物身上取得的一次成功试验。1977年英国采用胚胎工程技术培育出世界首例试管婴儿；1997年英国利用成年动物体细胞克隆出绵羊多莉。2001年培育出转基因克隆猪。第三十七页，共五十九页。412主要研究(yánjiū)内容对象：微生物，植物，动物(dòngwù)技术：融合，拆合，染色体导入，胚胎和细胞核移植水平：细胞，组织，细胞器，基因

第三十八页，共五十九页。动植物细胞(xìbāo)与组织培养细胞融合染色体工程胚胎工程细胞遗传工程随着细胞生物学，分子生物学，遗传学等学科发展核研究的日益深入，细胞工程近年来得到(dédào)快速的发展，以及成为现代生物工程的一个重要代表性领域，具体而言，细胞工程的一些研究领域包括：第三十九页，共五十九页。a.动植物细胞(xìbāo)与组织培养该技术最显著的价值在于优良植物的快速繁育与代谢产物的大量制备方面。动植物细胞与组织培养可分为三个层次上的培养：细胞培养，组织培养和器官培养。以工业生产为目的细胞培养不受气候季节限制，可以大量培养细胞获得药物和其他(qítā)有用物质，无论在生物学基础研究，还是生产实践中都发挥着越来越大的作用。第四十页，共五十九页。45b.细胞融合采用自然或人工的方法(fāngfǎ)使两个或几个不同细胞（或原生质体）融合为一个细胞，用于产生新的物种或品系及产生单克隆抗体。第四十一页，共五十九页。46c.染色体工程(gōngchéng)第四十二页，共五十九页。47第四十三页，共五十九页。染色体工程是按照人们的需要来添加，削减或替换生物的染色体的一种技术。染色体工程技术最大的价值体现在新品种的选育，主要是单倍体和多倍体育种方法，四倍体小麦(xiǎomài)，八倍体小黑麦等。第四十四页，共五十九页。49第四十五页，共五十九页。51d.胚胎(pēitāi)工程

第四十六页，共五十九页。这项技术主要对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作获得人们所需要的成体动物。胚胎工程采用的新技术包括(bāokuò)胚胎分割技术，胚胎融合技术，卵核移植技术，体外受精技术，胚胎培养，胚胎移植，以及性别鉴定技术，胚胎冷冻技术等。胚胎工程的最成功的应用领域体现在畜牧业，主要是胚胎移植技术进行优良品种的快速繁殖和胚胎保存。对于人类，试管婴儿培育技术也为人类做出了贡献。第四十七页，共五十九页。e.细胞(xìbāo)遗传工程主要包括克隆和转基因技术，前者主要是指无性繁殖，如动物克隆是指由一个动物经无性繁殖而产生的遗传性状完全相同的后代个体。后者是指将外源基因整合到生物体内，得到稳定表达(biǎodá)，并使该基因能稳定地遗传给后代的实验技术，是改变物质遗传性状的有效途径。第四十八页，共五十九页。3.细胞工程重要(zhòngyào)应用当今，细胞工程已经称为生物学家手中经常应用的技术之一。并已经成为生物工程的重要组成部分和主导领域之一，涉及面及其广泛(guǎngfàn)，在许多领域都有非常重要的应用价值，并且已经取得了惊人成就。如多倍体与单倍体育种，体细胞杂交和染色体工程等。此外细胞器移植，体外受精，胚胎培养等为植物和家畜的品种改良提供了新的途径。第四十九页，共五十九页。a.优质植物快速培育与繁殖基于植物细胞的全能性，在适当的生长条件下，能快速、大量繁殖一些有价值的苗木，花卉(huāhuì)和药材和濒危的植物。第五十页，共五十九页。b.动物胚胎工程快速繁殖优良濒危品种为加快家畜优良品种的繁育，人们以借腹怀胎的方法来提高种畜的利用率。20世纪(shìjì)30年代胚胎移植在绵阳和山羊中取得成功。1982年，获得第一胎试管犊牛，之后，相续在十几种哺乳动物中获得成功，培育出试管动物。第五十一页，共五十九页。c.利用动植物细胞培养生产活性产物，药品生物药品主要有各种疫苗，菌苗，抗生素，生物活性物质，抗体等。自1975年英国剑桥大学的科学家利用动物细胞融合技术(jìshù)获得单克隆抗体以来，许多人来过去无能为力的病毒性疾病遇到了克星。随着基因重组技术和单克隆抗体的发展，动物细胞培养展现出越来越可观的工业化前景。第五十二页，共五十九页。58d.新型动植物品种的培育利用细胞融合技术可以使不同种，属间的细胞或原生质体进行融合获得(huòdé)杂交体细胞，使不同种，属的优良性状组合在一起。转基因鲤鱼，鲫鱼，泥鳅。第五十三页，共五十九页。59e.供医学器官修复和移植的组织工程骨骼，软骨(ruǎng