四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机33张课件

四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机自信是向成功迈出的第一步四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机自信是向成功迈出的第一步四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及

机制研究许颖智，张军平，李明，彭立，李良军，张光银，杨萃，周亚男天津中医药大学第一附属医院研究背景WHO发达国家低、中等收入国家1000万1900万死于心血管疾病的患者数目500万600万2007年，271.6万人死于CVD。每天有7420人死于CVD，11.6秒死亡1例。四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及机自信是四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及

机制研究许颖智，张军平，李明，彭立，李良军，张光银，杨萃，周亚男天津中医药大学第一附属医院四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响及

机制研研究背景WHO发达国家低、中等收入国家1000万1900万死于心血管疾病的患者数目500万600万2007年，271.6万人死于CVD。每天有7420人死于CVD，11.6秒死亡1例。研究背景WHO发达国家低、中等收入国家1000万190罪犯斑块不在于斑块大小而是斑块结构、成分斑块破裂70%急性心脏事件的病理因素罪犯斑块不在于斑块大小而是斑块结构、成分斑块破裂急性心脏事件易损斑块形成过程及病理特征易损斑块形成过程及病理特征thinfibrouscap(<65um)biglipidcoreinflammatoryneoangiogenesis易损斑块形成过程及病理特征extracellularmatrixdegradationthinfibrouscap(<65um)bigl治疗现状调脂、抗血小板聚集、介入性冠状动脉治疗、冠状动脉旁路移植术等血管再通治疗但是每年仍有约两千万人死于急性心血管事件治疗现状调脂、抗血小板聚集、介入性冠状动脉治疗、冠状动脉旁路亟待解决的问题怎样稳定易损斑块，保护血管，是当前研究的重点和难点围绕机制，开发思路，深入研究，使中医药在AS治疗彰显优势中医药具有多靶点、多途径的整体调节作用亟待解决的问题怎样稳定易损斑块，保护血管，是当前研究的重点和毒瘀滋阴解毒活血脂质炎症反应血管新生痰瘀热毒虚阴中医AS病机认识毒瘀滋阴解毒活血脂质炎症反应痰瘀热毒虚阴滋阴解毒活血－四妙勇安汤四妙勇安汤最早见于华佗《神医秘传》，曰:“内服药用金银花三两，玄参三两，当归二两，甘草一两，水煎服。”清代医家鲍相敖将此方命名为“四妙勇安汤”，收载于《验方新编》中，具有清养结合、毒瘀并驱的功效，清解络中之毒，化解络中之瘀，滋养络脉之体临床应用：周围血管病、下肢闭塞性动脉粥样硬化、冠心病作用机制：抗凝、抗氧化、促血管内皮细胞增殖作用动脉粥样硬化？途径？滋阴解毒活血－四妙勇安汤四妙勇安汤最早见于华佗《神医秘传》，

一、动脉粥样硬化易损斑块模型建立

一、动脉粥样硬化易损斑块1w4w经股动脉球囊拉伤术开始予高脂饮食100g/d造模方法牛血清白蛋白250mg/kg2w

取材10w维持高脂饮食1w4w经股动脉球囊拉伤术开始予高脂饮食100g/d造模方法经股动脉球囊拉伤术左肾动脉左髂总动脉右肾动脉右髂总动脉主动脉弓球囊（压力约为2个大气压）左股动脉备皮插管缝合经股动脉球囊拉伤术左肾动脉左髂总动脉右肾动脉右髂总动脉主动脉评价指标血脂病理形态纤维帽厚度脂池面积炎症因子易损指数新生血管评价指标血脂

实验结果

1.复合造模对血脂及ox-LDL影响造模后TC、LDL-C、ox-LDL成增高趋势。实验结果

1.复合造模对血脂及o2.复合造模对血清炎症因子水平影响与对照组比较*P<0.01造模因素干预后，血清炎症因子明显增高，CRP明显增高2.复合造模对血清炎症因子水平影响与对照组比较*P<0.03.复合造模对内膜的影响MZHE染色(100倍)造模因素干预后，内膜明显增厚，纤维帽变薄,形成AS斑块

3.复合造模对内膜的影响MZHE染色(100倍)造模因素干预4.复合造模对脂核、易损指数影响与对照组比较*P<0.01VI=(ELA+CD68)/(CA+SMA)造模因素干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞减少，胶原纤维增多；易损指数增大4.复合造模对脂核、易损指数影响与对照组比较*P<0.ZMZMZMZM造模因素干预后，脂核增大，细胞外脂质增加，炎症细胞增多，平滑肌细胞减少，胶原纤维增多；易损指数增大。Masson染色(100倍)油红O染色(400倍)CD68免疫组化染色(DAB显色，400倍)

α-SMA免疫组化染色(DAB显色，400倍)5.复合造模对脂核、易损指数影响ZMZMZMZM造模因素干预后，脂核增大，细胞外脂质6.复合造模对斑块内CD31及VEGF表达的影响CD31造模因素干预后，斑块内可见内皮细胞组成的连续或不连续的小管腔,CD31和VEGF表达呈强阳性。VEGF免疫组化染色(DAB显色，400倍)ZMZM6.复合造模对斑块内CD31及VEGF表达的影响CD31小结本实验模拟人AS发病机制综合多种因素，以高脂饲喂叠加免疫生物损伤和内皮损伤的复合因素制作模型，更接近于人体AS的发生发展过程通过对家兔血脂、血清炎症标志物及斑块的病理形态、脂质成分、炎症反应、血管新生、胶原含量、易损指数等的综合分析，证实建模成功可操作性、重复性、稳定性、易于评价小结本实验模拟人AS发病机制综合多种因素，以高脂

二、四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响二、四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损研究方法易损斑块动物模型建立成功后，以辛伐他汀（5mg/kg)作为阳性对照，观察四妙勇安汤对模型病理形态、易损指数、斑块内细胞外基质的影响，明确其稳定斑块的作用机制。研究方法易损斑块动物模型建立成功后，以辛伐他汀（斑块内脂质含量1α-SMA，MMP-9，NF-κB

234评价指标胶原含量（CA）内中膜及纤维帽厚度斑块内1α-SMA，MMP-9，234评价指标胶原含量1.四妙勇安汤对主动脉内膜及纤维帽的影响与正常组比较P<0.01,与模型组比较×P<0.05,#P<0.01。ZMXS模型组：内膜明显增厚;“纤维帽”较薄;内皮部分脱落，大量脂质沉积，泡沫细胞及炎性细胞浸润;中膜平滑肌减少，弹力板不连续，弹力纤维断裂溶解给药组：内膜增厚，有少量泡沫细胞形成，内皮完整，中膜平滑肌增殖，弹力板尚完整HE染色100倍1.四妙勇安汤对主动脉内膜及纤维帽的影响与正常组比较P<0.2.四妙勇安汤对斑块内脂质含量的影响模型组ELA,LNA/PA,CD68高于正常组，四妙勇安汤可降低易损指数，降低LCA/PA、ELA、CD68阳性面积百分比。与正常组比较，*P<0.01；与模型组比较，×P<0.05,#P<0.01ELA(油红“O”染色)40×CD68免疫组化染色（DAB显色）40×正常组模型组辛伐组四妙组2.四妙勇安汤对斑块内脂质含量的影响模型组ELA,LNA/P

CA(Masson染色)40×

α-SMA免疫组化染色（DAB显色）40×

3.四妙勇安汤对斑块内CA、α-SMA的影响组别nCAα-SMA正常组100.68±0.2916.7±7.80模型组89.89±1.48*3.69±1.51*辛伐组1018.67±3.60*▲9.03±3.80△四妙组1018.29±4.37*▲16.50±3.23▲注：与正常组比较*P<0.01,与模型组比较△P<0.05,▲P<0.01模型组斑块内CA高于正常组,α-SMA低于正常组，四妙勇安汤可升高斑块内CA、α-SMA阳性面积百分比。CA(Masson染色)α-SMA免疫组化染色3.四妙勇安4.四妙勇安汤对斑块内MMP-9,NF-κB的影响与正常组比较P<0.01,与模型组比较×P<0.05,#P<0.01。模型组斑块内MMP-9,NF-κB蛋白表达明显增高，四妙勇安汤能够抑制MMP-9,NF-κB蛋白表达4.四妙勇安汤对斑块内MMP-9,NF-κB的影响与正常组讨论运用复合因素造模方法建立兔AS斑块模型，并从血脂、血清炎症标志物、主动脉病理形态、纤维帽厚度、斑块内炎症反应、脂质成分、血管新生、胶原含量、易损指数等方面综合分析，证实建模成功依照动脉粥样硬化斑块不稳定“阴虚毒瘀”的中医病机。运用具有滋阴活血解毒之功效的四妙勇安汤对动脉粥样硬化模型兔进行干预，明确其稳定AS易损斑块的作用机理讨论运用复合因素造模方法建立兔AS斑块模型，并从血脂、血四妙勇安汤可延缓血管壁的病变进展，降低内膜厚度及脂核面积、增加纤维帽厚度抑制降低斑块内脂质含量、使具有收缩功能的平滑肌增多、增加胶原含量，从而降低易损指数，使斑块趋于稳定状态讨论四妙勇安汤可延缓血管壁的病变进展，降低内膜厚度及脂核面积、增讨论抑制斑块内细胞外基质降解抑制MMP-9表达可能与NF-κB细胞信号通路有关是否还涉及到其它信号通路及通路的上下游基因的初步表达情况如何还需要进一步探讨讨论抑制斑块内细胞外基质降解谢谢！谢谢！谢谢！21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根

22、