专题3课题2.月季花药的培养课件

1、课题2 月季的花药培养花药培养 采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈伤组织分化成完整的植株的技术。什么是花药培养呢？ 1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花药时，首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的单倍体植株。 说明生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下也具有发育成完整植株的潜能。 自20世纪60年代以来，世界上已有250多种高等植物的花药培养获得成功。 我国已经培育成功近50种植物的花粉再生植株，如小麦、玉米、大豆、甘蔗、橡胶等。 花药培养是以获得单倍体植物为目的而

2、采用的一种方法。 再经历与胚形成的同样过程，发育成正常的单倍体植物。 经过人工诱导使染色体数目加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。 单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。花药培养在育种工作上的意义一、 基础知识花粉：花丝花药雄蕊囊状结构，内有很多花粉粒雄蕊 花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉 被子植物花粉的发育要经历： 四分体时期、单核期和双核期等阶段。精子2个（一）被子植物的花粉发育花粉母细胞单核居中期单细胞花粉粒有丝分裂营养细胞，生殖细胞二细胞花粉液泡扩大，细胞核靠边单核靠边期单细胞花粉粒四分体减数分裂有丝分裂生殖细胞营养细胞

3、生殖细胞精子1个三细胞花粉（成熟花粉）1个12个4个4个8个4个4个8个4个A.花粉是花粉母细胞经有丝分裂形成的B.花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期C.花粉发育经历的四分体时期与减数分裂的四分体时期含义相同D.花粉母细胞形成花粉粒中精子的过程是一系列减数分裂的过程1.下列关于被子植物花粉的形成，说法正确的是B2.下列关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是A.被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果B.花粉粒是在花药中的花粉囊中形成的C.花粉粒在发育过程中，核先位于细胞中央，在移到细胞的一侧D.被子植物花粉的发育要经历小孢子四分体时期、单核期和双核期等阶段A（二）产生花粉植株的两种

4、途径移栽 两种途径之间无明显的界限，主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度配比。3.下列对产生花粉植株途径的叙述，不正确的是A.花粉通过胚状体阶段直接发育成植株B.花粉先形成愈伤组织在诱导分化成植株C.花粉经脱分化形成胚状体，再分化出根，然后诱导生芽D.两种途径并无绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类和浓度比例C先芽后根1、材料的选择：不同植物的诱导成功率很不相同。同一植物的不同生理状况（花期早期初花期）a.花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。b.合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间） 选择合适的花粉发育时期也是提高诱

5、导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。（三）影响花药培养的因素 通常从生长旺盛的植株上取早期现蕾的花药或花粉进行培养，较易形成花粉植株；取蕾前，供体植株的栽培条件的好坏也影响花粉植株的诱导率。A .亲本植株的生长条件其他影响因素B .材料的低温预处理 有报道称低温（如4）预处理一定时间（如48 h）可以明显促进胚状体的形成，有的经短期高温（30 40）处理也能够促进胚状体的形成，但是不同作物对所需的最适处理温度和时间要求不同。C .培养条件 培养温度通常保持在25左右，光照因作物种类不同而

6、异。在花粉培养的早期，黑暗或弱光条件可能更有利于花粉分裂的启动。D. 接种密度 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。思考为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？P39二、 实验操作（一）材料的选取（二）材料的消毒（三）接种和培养（一） 材料的选取1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。2. 最常用的方法：醋酸洋红法 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。（三）接种和培养 灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。 在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生愈

7、伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 每瓶接种花药7-10个，温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。三、 结果分析与评价1、选材是否恰当 选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。 2、无菌技术是否过关 如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。3、接种是否成功 如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。植物组织培养技术与花药培养技术的比较基础知识