临床标本的微生物学检验课件

1、临床标本的微生物学检验1临床标本的微生物学检验1血液标本的细菌学检验目的和意义正常人的血液是无菌的一旦怀疑有菌血症，均应及早进行血液标本的细菌学检验2血液标本的细菌学检验目的和意义2血液标本的采集采集时间及次数发热早期或体温上升期抗菌药物使用前或下次用药前24h内34次，多部位采血采血部位肘静脉、股静脉、股动脉采血量=1/10血培养瓶中培养基量的不可从静脉留置针中采取血液标本!3血液标本的采集采集时间及次数3血液标本的培养基需氧菌硫酸镁肉汤、葡萄糖酚红肉汤胰化大豆胨肉汤聚茴香磺酸钠SPS对氨基苯甲酸、青霉素酶厌氧菌硫乙醇酸盐培养基牛心脑浸液肉汤4血液标本的培养基需氧菌4血液标本的检验过程35孵

2、育每天观察一次一旦发现有细菌生长现象立即涂片观察，初步报告立即接种固体平板分离（血平板、巧克力平板）连续观察七天无菌生长，盲目接种固体平板分离（血平板、巧克力平板）证实无菌生长后报告阴性5血液标本的检验过程35孵育5血液培养瓶中细菌的生长现象肉汤均匀混浊，发酵葡萄糖产气 G-杆菌微混浊有绿色变化 肺炎链球菌血球层上面出现颗粒状生长，有自下而上的溶血 溶血性链球菌混浊并有胶冻状凝固 病原性葡萄球菌表面有菌膜，培养液清晰 枯草杆菌表面有菌膜，膜下呈绿色混浊 铜绿假单胞菌6血液培养瓶中细菌的生长现象肉汤均匀混浊，发酵葡萄糖产气77血液标本检验结果的报告阳性报告培养日有 菌生长阴性报告培养7日无细菌生

3、长8血液标本检验结果的报告阳性报告8快速检验的方法双相培养基法溶解离心法荧光指示法16S rRNA鉴定法9快速检验的方法双相培养基法9血液中常见的革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、B群链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、厌氧链球菌产单核李斯特菌、炭疽芽胞杆菌、产气荚膜梭菌10血液中常见的革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、血液中常见的革兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌、卡他布拉汉菌伤寒及副伤寒沙门菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌、流感嗜血杆菌、气单胞菌、去硝化产碱杆菌、胎儿弯曲菌、沙雷菌、类杆菌、梭杆菌、布鲁菌、鼠疫耶尔森菌11血液中常见的革兰阴性细菌脑

4、膜炎奈瑟菌、卡他布拉汉菌11血液标本中特殊细菌的检验沙门菌属胆汁葡萄糖肉汤 35 泥砂样沉淀布鲁菌Castenada双相培养基 3周后无菌生长 阴性厌氧菌厌氧培养瓶 80ml培养基 刃天青指示剂14天后无菌生长 阴性有菌生长 厌氧鉴定12血液标本中特殊细菌的检验沙门菌属12脑脊液标本的检验正常人的脑脊液是无菌的一旦感染，病情危急13脑脊液标本的检验正常人的脑脊液是无菌的13脑脊液标本的采取和运送由临床医师在无菌条件下采取无菌容器盛放，立即送检需要保温3514脑脊液标本的采取和运送由临床医师在无菌条件下采取14涂片检查非常重要15涂片检查非常重要15涂片检查对于新型隐球菌特别是小荚膜者易与白细胞

5、相混淆0.1%甲苯胺蓝染色 新型隐球菌红色圆球体，荚膜不着色，白细胞成深蓝色，红细胞不着色16涂片检查对于新型隐球菌特别是小荚膜者易与白细胞相混淆16培养检查及时接种巧克力平板、血平板35 510%CO2 1824小时17培养检查及时接种17脑脊液中的抗酸杆菌检查离心4000r/min 30min 取沉淀涂片抗酸染色静置室温1824小时 结网试验 抗酸染色或金胺O染色培养 罗-琴培养基或7H-10培养基18脑脊液中的抗酸杆菌检查离心4000r/min 30min 脑脊液中的常见细菌革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、B群链球菌、肺炎链球菌、消化链球菌结核分支杆菌、产单核李斯特菌新型隐球菌

6、、白色念珠菌19脑脊液中的常见细菌革兰阳性细菌19脑脊液中的常见细菌革兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌、肺炎克雷白菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、脑膜炎败血黄杆菌、类杆菌钩端螺旋体20脑脊液中的常见细菌革兰阴性细菌20上呼吸道标本的检查上呼吸道是开放性器官有许多细菌寄生奈瑟菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、葡萄球菌、流感嗜血杆菌、类白喉棒状杆菌、真菌必须注意菌群与疾病的关系21上呼吸道标本的检查上呼吸道是开放性器官21标本采集鼻咽拭子咽拭子22标本采集鼻咽拭子22涂片检查白喉棒状杆菌23涂片检查白喉棒状杆菌23培养检查血平板、巧克力平板、EMB百日咳鲍特菌：鲍金平

7、板白喉棒状杆菌：吕氏血清斜面脑膜炎奈瑟菌：巧克力平板（CO2）流感嗜血杆菌：巧克力平板（CO2）24培养检查血平板、巧克力平板、EMB24上呼吸道标本的常见细菌正常菌群和链球菌、微球菌、表皮葡萄球菌、四联球菌、白喉以外的棒状杆菌、乳杆菌其他奈瑟菌、其他嗜血杆菌25上呼吸道标本的常见细菌正常菌群25上呼吸道标本的常见细菌上呼吸道常见致病菌化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌白喉棒状杆菌、结核分支杆菌白色念珠菌流感嗜血杆菌、百日咳鲍特菌肺炎克雷白菌、大肠埃希菌铜绿假单胞菌26上呼吸道标本的常见细菌上呼吸道常见致病菌26下呼吸道标本的检查正常下呼吸道细菌情况对下呼吸道的感染采用痰液标

8、本进行细菌学检查27下呼吸道标本的检查正常下呼吸道细菌情况27标本采集晨痰方法：自然咳痰法气管镜下采集气管或环甲膜穿刺需避免上呼吸道正常菌群的污染 28标本采集晨痰28涂片检查合格痰液标本大量吞噬细胞未见鳞状上皮细胞不合格痰液标本大量鳞状上皮细胞未见吞噬细胞29涂片检查合格痰液标本不合格痰液标本29培养检查标本前处理均质化法洗涤法分离培养血平板巧克力平板沙保弱琼脂特殊培养30培养检查标本前处理30下呼吸道标本的常见细菌革兰阳性细菌化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌白喉棒状杆菌、结核分支杆菌厌氧菌、放线菌、奴卡菌革兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌、肺炎克雷白菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、

9、产气肠杆菌、嗜肺军团菌31下呼吸道标本的常见细菌革兰阳性细菌31尿液标本的微生物学检验正常的尿液是无菌的任何怀疑尿路感染或全身感染的患者均可进行尿液细菌培养尿液是细菌的良好培养基，容易受污染32尿液标本的微生物学检验正常的尿液是无菌的32尿液标本的采集用药前采取中段尿女性：清洗外阴部，留取中段尿510ml ，月经期不得采取男性：清洗尿道口，留取中段尿510ml儿童：清洗尿道口，留取中段尿510m，l必要时膀胱穿刺肾盂尿采集、膀胱穿刺33尿液标本的采集用药前采取中段尿33菌落计数的意义正常尿道口有细菌存在尿液容易受少量细菌污染105/ml菌落计数 104/ml 、 105/ml建议：重复检查34

10、菌落计数的意义正常尿道口有细菌存在34影响计数的原因已用抗生素治疗使用利尿药物尿频，尿液在膀胱中停留时间短细菌种类平板上有三种或三种以上细菌生长，判为标本污染，不必计数变形杆菌生长不能计数，应改用CLED或MacConkey平板35影响计数的原因已用抗生素治疗35菌落计数的方法平板涂布倾注培养定量接种法36菌落计数的方法平板涂布36尿液标本的快速细菌检验硝酸盐还原试验阳性率约为80%，大肠埃希菌等肠杆菌科假阴性20%，细菌不还原硝酸盐，如葡萄球菌、肠球菌、不动杆菌等氯化三苯四氮唑（TTC）还原试验与菌落计数符合率为93.7%简易培养基37尿液标本的快速细菌检验硝酸盐还原试验37L型细菌应用高渗

11、培养基，软琼脂，小牛血清510%CO2，“油煎蛋”样菌落普通培养上无菌生长38L型细菌应用高渗培养基，软琼脂，小牛血清38尿液标本中常见的细菌革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、酿脓链球菌、肠球菌、厌氧链球菌、结核分支杆菌革兰阴性细菌淋病奈瑟菌大肠埃希菌、变形杆菌、伤寒及副伤寒沙门菌、肺炎克雷白菌、产气肠杆菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌、沙雷菌、厌氧菌其 它支原体、衣原体、念珠菌39尿液标本中常见的细菌革兰阳性细菌39粪便标本的微生物学检验肠道中有大量正常菌群应使用选择性培养基必要时（如携带者的检查）进行增菌根据不同季节、人群和临床特征选择检验方法40粪便标本的微生物学检验肠道中有大量正常菌群40标本采集急性期、用药前粘液、脓血便直肠拭子不能立即检验，需要卡-布运送培养基41标本采集急性期、用药前41涂片检验一般不作直接涂片检查霍乱弧菌、结核杆菌葡萄球菌、艰难梭菌、真菌42涂片检验一般不作直接涂片检查42培养检查沙门菌属和志贺菌属 SS平板 无色、透明或半透明、小的或黑色菌落麦康凯无色、透明或半透明、小的选择两个可疑菌落分别接种两支KIA、MIU43培养检查沙门菌属和志贺菌属 43培养检查霍乱弧菌 TCBS、碱性平板致病性大肠埃希菌 中国蓝空肠弯曲