罗氏试剂盒说明书-定标液 HCG STAT 12177196001V12

1、12177196001V12HCG STAT人绒毛膜促性腺激素（快速法） 2009-08，V12 中文 5/5 Elecsys和cobas e 分析仪 REF 11972103 122 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途该免疫测定法适用于人血清和血浆中完整的人绒毛膜促性腺激素的体外定量检测，特别适用于妊娠的诊断和监测。Elecsys和cobas e免疫分析仪采用电化学发光免疫法（ECLIA）。概述1，2，3，4与LH、FSH和TSH相似，人体绒毛膜促性腺激素（HCG）是糖蛋白家族

2、成员之一，由2个亚单位(-和-链) 连接组成完整的激素。上述4种糖蛋白激素的-链结构相同，-链的结构不同，并与激素的特定功能有关。人体绒毛膜促性腺激素包括多种分子量大小不一的具有相同功能的激素分子形态。HCG的生物作用是维持妊娠黄体。同时也影响类固醇的生成。妊娠妇女的血清中含有的HCG主要是整分子的HCG。妊娠一周后即可通过检测HCG确定是否怀孕。妊娠初期三个月内检测HCG特别有意义。如果检测结果的异常升高则提示绒毛膜癌、葡萄胎或多胎妊娠可能。检测结果偏低则提示先兆/早期流产、异位妊娠、妊娠中毒或胎儿宫内死亡。Elecsys HCG STAT 检测使用特异单克隆抗体识别整分子激素，因此适用于判

3、定和监测妊娠。钌标记和生物素化抗体直接针对不同HCG分子的抗原决定簇。检测原理抗体夹心法，总检测时间：9分钟Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪：第一次孵育：10l样本、1个生物素化单克隆HCG特异性抗体和1个钌（Ru）复合物标记的单克隆HCG特异性抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：加入包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，通过生物素和链霉素的相互作用，复合物与磁珠结合。cobas e 601分析仪：通过9分钟的孵育，样本（10ul）中的抗原、生物素化单克隆HCG特异性抗体、钌复合物标记的单克隆HCG特异性抗体和链霉素包被的磁珠形成夹心复合物并与固相磁珠结合

4、。所有分析仪：将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正定标曲线计算获得检测结果，通过读取试剂条码获得标准曲线。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5 ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72 mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗HCG单克隆抗体（灰盖），每瓶，9 ml；生物素化的抗HCG抗体（鼠）浓度2.3 mg/L，

5、磷酸缓冲液40 mmol/L，pH 7.5;防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗HCG单克隆抗体（黑盖），每瓶，10 ml，钌标记的抗HCG单抗（鼠）浓度6.0 mg/L，磷酸缓冲液40 mmol/l，pH6.5;防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理该试剂盒为即用型，请勿分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys HCG STAT试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能

6、够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周Elecsys 2010和cobas e上8周Elecsys 1010上4周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时）样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、K3-EDTA、枸橼酸、氟化钠和草酸钾抗凝的血浆都适用。标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。稳定性： 2-8可保存3天；-20可保存12个月，一次冻融。5选择合适的试管进行不同类型样本的采集，并非所有厂商的试管均可用于检测。不同厂商的

7、样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。不能使用添加叠氮化合物的样本和质控品。检测前，样本、定标液及质控品须在室温下(20-25)平衡。考虑到蒸发影响，样本、定标品和质控品的检测需在2小时之内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号REF03303071190，HCG STAT CalSet 4 x1 ml货号REF11731416122，PreciControl Universal，2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1 和2或者货号REF1173

8、1416190，PreciControl Universal，2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1 和2货号REF11731416160，PreciControl Universal，2 x3 ml，分别为PreciControl Universal 1 和2（美国专用）货号REF11732277122，Diluent Universal，2 x16 ml样本稀释液或 货号REF03183971122，Diluent Universal，2 x36 ml实验室基础设备Elecsys 1010/2010或Cobas e分析仪cobas e 分析仪配件货号REF0

9、4880340190，ProCell M，2 x 2L 系统缓冲液货号REF04880293190，CleanCell M，2x 2L 测量池洗液 货号REF12135027190，CleanCell M，1x 2L测量池洗液（美国）货号REF03023141001，PC/CC-Cups，12个杯，用于ProCell M和CleanCell M使用前的预热货号REF03005712190, ProbeWash M, 12x70mL清洗液，用于检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号REF03004899190，PreClean M，5600mL检测清洗液货号REF12102137001，反应杯/

10、吸头组合装AssayTip/AssayCup Combimagazine M，48盒84反应杯或移液管吸头，废物袋货号REF03023150001, WasteLiner，,废物袋 货号REF03027651001，SysClean，适配器所有分析仪配件：货号REF11298500316, Elecsys SysClean, 5 x100 mL系统清洗液货号REF11298500316, Elecsys SysClean, 5 x100 mL系统清洗液（美国专用）检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。

11、试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。cobas e601分析仪：需要PreClean M溶液Elecsys 2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪系统会自动调节试剂温度和各试剂盒瓶盖开关。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱定标该检测方法可溯源至4th 人绒毛膜促性腺激素国际参考标准（NIBSC） 编

12、码75/589。每套Elecsys HCG STAT试剂的条码标签上均含有其批特异的定标信息。使用Elecsys HCG STAT定标液可调整预设置的定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控使用Elecsys PreciControl Universal和2进行质控。其他合适的质

13、控品也可使用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。各实验室可根据需求制定各自的质控限和质控周期。质控值必须处于规定的质控限内。各实验室必须建立应对失控的相应纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制。计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位：mIU/mL或IU/L。干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素496mol/L或29 mg/dL）, 溶血（血红蛋白0.932mmol/L或 1.5g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 2400mg/dL)和生物素40ng/mL或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。浓度低于667 IU/ml的类风湿因子

14、不影响检测结果。浓度低于500000 mIU/mL的HCG不产生hook效应的影响。体外对26种常用药物进行试验未发现会影响检测结果。注意：Elecsys 1010分析仪存在携带污染的可能，低浓度样本的检测结果可能会受影响。对于有疑问的结果必须进行确认。少数病例中高浓度的钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.500-10000 mIU/mL（通过最低检测限和厂商定标曲线的最高值确定）。检测值低于检出限则报告0.5 mIU/mL。检测值高于检测上限时则报告10000 mIU/mL（或报

15、100倍稀释结果1000000 mIU/mL）。稀释高于检测范围的标本可用通用稀释液（Elecsys Diluent Universal）稀释。建议1:100稀释（Elecsys 1010/2010 和cobas e411 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。cobas e 分析仪上只能手工稀释，被稀释的标本浓度必须高于100 mIU/mL 。如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。期望值比利时、法国和德国的5家临床中心使用Elecsys HCG STAT检测健康人群的HCG结果数据如下（研究序列号：BO1P019,2003年3月）：182例非妊娠的健康女性的

16、97.5分布位点为1 mIU/mL，95置信区间的上限值为4.9 mIU/mL。143例健康绝经期后女性的97.5分布位点为7 mIU/mL，95置信区间的上限值为4.9 mIU/mL。下列数据通过检测妊娠妇女（孕周计算为末次月经开始），只罗列了检测例数大于10例的各孕周对应数据孕周NHCG mIU/mL中位数5-95分布位点32518.75.4-7.244313510.2-7085231420217-82456193475152-32177713358734059-1537678238360331366-14909492310447559109-13590110208530444186-17

17、040912176173027107-20161514203708224302-93646155462869612540-6974716766243468904-5533217190220648240-517931864224649649-55271每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。由于具体情况不同，各实验室所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清样本和质控品验证重复性，按照CLSI（临床和实验室标准化委员会）的修正准则EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。下面是所得

18、结果：b)重复性=批内精密度c)U=Universal应用Elecsys试剂盒、人混合血清样本和质控品验证重复性，按照CLSI（临床和实验室标准化委员会）的分离研究准则EP5-A执行：每天2次复管检测，共21天 (n=60)。下面是所得结果分析灵敏度（检测下限）0.500 mIU/mL 检测下限是指可检测到的区别于零浓度的最低分析物浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）方法学比较使用临床标本比较Elecsys HCG STAT 检测（y） 和Elecsys HCG+检测（x），相关性数据如下：标本数n=81Passing/Bablok6

19、 线性回归y = 1.0 x 7.38 y = 1.05x 52.6T = 0.986 r = 0.999样品比较的浓度范围约为67675 mIU/mL。分析特异性抗体交叉反应如下：LH 0.29；FSH 0.09；TSH无交叉反应。参考文献：1.Thomas CMG, Reijnders FJL, Segers MFG, Doesburg WH, Rolland R.Human Choriogonadotropin (HCG): Comparisons between Determinations of Intact HCG, Free HCG -Subunit, and “Total” H

20、CG + in Serum during the First Half of High-Risk Pregnancy. Clin Chem 1990;36(4):651-655.2. Hoermann R, Berger P, Spoettl G, Gillesberger F, Kardana A, Cole LA, Mann K. Immunological Recognition and Clinical Significance of Nicked Human Chorionic Gonadotropin in Testicular Cancer. Clin Chem 1994;40(

21、12):2306-2312.3. Schwarz S, Berger P, Wick G. The Antigenic Surface of Human Chorionic Gonadotropin as Mapped by Murine Monoclonal Antibodies. Endocrinology 1986;118(1):189-197.4. Runnebaum B, Rabe T. Gynkologische Endokrinologie, Grundlagen, Physiologie, Pathologie, Prophylaxe, Diagnostik, Therapie.