罗氏试剂盒说明书 HBsAg Confirmatory Test 11935933001-en

1、11935933001V21HBsAg确证实验REF 11820648 122PAGE PAGE 4 中文主要用途：用Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II方法检测出重复反应的人血清和血浆样本时，用免疫学方法体外确证样本中乙型肝炎表面抗原的存在。临床应用1，2，3，4，5，6，7，8Elecsys HBsAg确证实验是基于特异性抗体免疫中和反应原理。多克隆HBsAg特异性抗体与乙型肝炎表面抗原的抗原决定簇结合，因而占据了Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II测定时抗体的结合位点。检测原理：根据Elecsys HBsAg, Elecsys HBsA

2、g II检测程序，用确证试剂和质控试剂预处理样本。阳性质控，Elecsys PreciControl HBsAg 2, Elecsys PreciControl HBsAg II 2应该与性能检查同时进行检测。样本预处理：在Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测中重复反应的样本，同时用确证试剂和质控试剂处理，然后进行培养。在确证试剂中过多的抗HBs抗体中和样本中的HBsAg。在接下来进行的Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II 检测时导致了与样本初值相比临界值(COI)指数值（样本/临界值信号）的下降。Elecsys HBsAg, Elecs

3、ys HBsAg II 检测:第一次孵育:两份经预处理的样本与生物素化的单克隆HBsAg特异抗体和钌标记的单/多克隆HBsAg特异性抗体反应形成夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒，抗原抗体复合物通过生物素和链霉素之间的反应结合到微粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠微粒吸附在电极表面。未予磁珠微粒结合的物质通过ProCell去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。通过比较样本反应物获得的电化学发光信号和先前抗HBsAg定标时获得的临界值信号，仪器自动计算得到检测结果。Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)

4、-complex (Ru(bpy)2+ 3 ) 三联吡啶钌 试剂-工作溶液瓶1 确证试剂（黑盖），2瓶，每瓶1mL：在人血清中抗-HBs（人） 200000 IU/L ；防腐剂。瓶2 质控试剂（白盖），2瓶，每瓶2 mL：人血清，抗- HBs 3 IU/L；防腐剂。警告和注意事项;仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必须遵循所有实验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必须按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。所有人源性物质必须视为有潜在感染性。来源于人血液的所有产品由献血员提供，经特殊制备而成，经检测HBsAg,HCV抗体,HIV抗体，均为阴性。所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法

5、令98/97/EC附件II,列表A。但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人标本一样仔细处理。接触者必须遵守健康专业机构相应的法规。有效期之后，试剂不可使用。避免试剂和样本（标本，定标液和质控品）产生气泡。试剂处理：试剂盒为即用型。避免污染。使用后2-8 C储存。储存及稳定性：储存于2-8 C。试剂1和2的稳定性：未开封试剂，2-8 C有效期内均可使用开封试剂，2-8 C8周样本采集和准备:在Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测中重复反应的样本。稳定性和样本采集请参阅Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测。

6、提供的物品:参阅“试剂-工作溶液”章节。需要的物品：REF 11820532, HBsAg 试剂盒， 100个测试或 REF 04687787, HBsAg II 试剂盒， 100个测试。（进行Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测所需材料参见Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II试剂盒说明书）Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 或 cobas e 分析仪。检测样品预处理;根据在Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测中样本的各自临界值指数的大小确定反应体积。吸取下列体积样本到E

7、lecsys样品杯。临界值指数 7.0的阳性样本 270 L 样本 + 30 L 确证试剂270 L 样本 + 30 L 质控试剂或临界值指数在7.0和 1 mg/mL or 550000 IU/mL）会导致在Elecsys HBsAg, Elecsys HBsAg II检测中临界值指数 50 %,有必要核对实验条件。合适条件下，用新鲜试剂重复检测。目的去评估样品的有效性，用质控试剂稀释的样品的临界值指数必须 1.0 (Elecsys HBsAg检测) or 0.9 (Elecsys HBsAg II 检测).临界值指数 1.0 或 50 % 和 质控试剂COI 1.0/0.9 = 无活性x

8、50 % 和 质控试剂COI 1.0/0.9 = 无效x 50 % 和 质控试剂COI 1.0/0.9 = 阳性x 50 % 和 质控试剂COI 1.0/0.9 = 不确定。使用新鲜试剂重复检测无效结果。重复检测不确定结果。如果结果仍旧不确定，重复样本应该被检测。如果推测是高剂量钩镰效应，请参阅（限制-干扰因素）章节，这样样本需要更高预稀释倍数。特殊的性能指标：Elecsys HBsAg试剂在Elecsys分析仪上，手工样本预处理的性能试验数据如下。各实验室所得出的数据可能会少有差异。精密度：应用3个不同HBsAg浓度的血清（用质控试剂和确证试剂8-10倍稀释样本），用手工方法确定精密度。在2

9、0 C ，30分钟的孵育后，在Elecsys分析仪上使用Elecsys 试剂, 校准品和质控品,检测经预处理的样本。最初HBsAg 检测结果-样品未经预处理（重复性，n=8-10）：HS = 人血清在手工样本预处理之后的结果：检测限：在人HBV阴性血清中，在HBsAg标准品系列稀释的标准曲线上可以读出临界值信号所对应的HBsAg浓度，以确定灵敏度。浓度 0.1 U/mL和 0.1 IU/mL的稀释品是根据Paul-Ehrlich-Institute 标准品(亚型 ad, 1987) 和 NIBSC 标准品(货号: 00/588; WHO HBsAg第二国际标准品,亚型 adw2, 基因型 A)

10、并使用 Elecsys HBsAg 确证实验确定的。方法学比较：使用90个重复反应的病人样本比较Elecsys HBsAg 确证实验和市售确证实验 (MEIA)的检测结果，相关性数据如下：临床敏感性临界值指数在范围1-2之内的12份样本，全部都能通过Elecsys HBsAg确证实验进行确定。临床特异性Elecsys HBsAg确证实验的特异性通过确证阳性和假阳性样品被检测。318份阳性样本被确定为阳性。一份假阳性供血者样本和19份人为的产生假阳性干扰的样本最终证实为阴性。因此两组中Elecsys HBsAg确证实验的特异性是100%。扩展的特异性能指标Elecsys HBsAg and HB

11、sAg II 实验的比较：一组来自韩国的n=88 HBsAg阳性样本，用于表明Elecsys HBsAg and Elecsys HBsAg II 实验的可比较性（因为预选错误，一份样本被排除；在两个HBsAg检测中，一份样本是阴性的（COI0.81-0.88），但是最初在韩国检测时结果是阳性的（COI1.12）；两份样本因为样本量不足而没有进行Elecsys HBsAg确证实验）。第一次使用Elecsys HBsAg and Elecsys HBsAg II 实验试剂进行检测，然后使用Elecsys HBsAg 确证实验试剂进行处理，再次用两种试剂进行检测。对于其余的84 HBsAg阳性标本

12、，Elecsys HBsAg and Elecsys HBsAg II 实验结果与中和试验一致（相关系数0.995）。HBsAg突变样本的中和反应一组 n=19天然突变样本（未经稀释和已经稀释）用于检测Elecsys HBsAg 确证实验用于中和突变样本适用性。用Elecsys HBsAg II实验和3个另外的HBsAg实验检测样本。2份样本 (突变M133L/M143T/G145R 和突变T45S/I49R/113T114/I186P, 各自的），所有试验的检测结果为阴性，用3个实验检测第一个突变（COI0.03-0.76），用四个实验检测第二个突变（COI 0.03-0.78）。5个样本通

13、过Elecsys HBsAg 确证实验检测。结果为不确定，因为样本量不足（包括所有试验检测结果是阴性）。其余的14个天然突变样本用Elecsys HBsAg确证实验（55.6-99.7%中和）被有效的中和。References1. Gerlich W. Viral Hepatitis. Section 2, Churchil Livingstone, Ed.Zuckermann AJ, Thomas HC, 1993:83-113.2. Hollinger FB. Hepatitis B virus. In: Fields BN, Knipe DM (eds). Virologyed. 2 N

14、ew York Raven Press 1990;2:2171-2236.3. Courouc-Pauty AM, Plancon A, Soulier JP. Distribution of HBsAgSubtypes in the World. Vox Sang 1983;44:197-211.4. Frsner G. Moderne Hepatitisdiagnostik. Frsner G KilianVerlag, Marburg 1996.5. Hoofnagle JH, Di Bisceglie AM. Serologic Diagnosis of Acute and Chron

15、icViral Hepatitis. Seminars in Liver Disease 1991;11/2:73-83.6. Frsner G, Schomerus H, Wiedmann KH, et al. Diagnostic significanceof quantitative HBsAg determination in acute and chronic hepatitis Binfection. Eur J Clin Microbiol 1982;1:52-58.7. CDC. Prevention of Perinatal Transmission of Hepatitis

16、 B Virus:Prenatal Screening of all Pregnant Women for Hepatitis-B-SurfaceAntigen: Recommendations of the Immunization Practices AdvisoryCommittee (ACIP). MMWR 1988;37:341-355.8. Stiko Recommendations, Bundesgesundheitsbl. 1996;1/96:32-42.9. Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens.(29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register.10. Council Directive (2000/54/EC). Official Journal of the EuropeanCommunitie