罗氏试剂盒说明书 Digitoxin

1、Digitoxin洋地黄毒苷诊断试剂盒03002659 122100测试主要用途用于体外定量检测人体血清、血浆中洋地黄毒苷。该检测用于诊断与治疗洋地黄毒苷过量以及监测洋地黄毒苷的疗效，以确保合理的治疗。Elecsys及cobas e系列免疫分析仪工作原理是电化学发光免疫测定法“ECLIA”。临床应用洋地黄毒苷是一种作用于心脏的糖苷类药物。其确切作用机理仍不完全清楚。洋地黄毒苷使细胞内钙离子浓度升高，钙离子对心机功能而言极其重要。最后，心脏收缩能力增强，收缩幅度增大，从而使心脏每次搏动输出的血量增加。洋地黄毒苷常用于治疗心功能不全。其他治疗指征包括老年患者明显动脉高血压治疗，伴有冠状动脉功能不全

2、的高血压患者的外科术前治疗，以及伴有心脏肥大和心室舒张压有升高趋势的心绞痛患者的治疗。洋地黄毒苷治疗不当患者会引起严重的室性心律不齐和某些特定类型的心包炎。洋地黄毒苷治疗浓度范围约为13-39 nmoll/L(10-30 ng/mL)3。这种情况下，洋地黄毒苷较地高辛有更强的蛋白质结合力。由于洋地黄作用与多种因素有关，故治疗和中毒范围会发生重叠2。因此，血清值必须结合整个临床表现进行解释。洋地黄毒苷半衰期为6-8天，主要在肝脏代谢。在这过程中，产生大约10给予剂量的地高辛。约30%给予的洋地黄毒苷被真正清除。下列情况需确定其血清浓度：监测患者摄入剂量，确定患者中毒可能，患者药物动力学改变或术前

3、用药未知，以及ECG（心电图）中未观察洋地黄反应的患者。检测原理竞争原理。总测定时间：18分钟第一次孵育：15L标本和一份生物素抗洋地黄毒苷特异性单克隆抗体一起孵育，反应形成复合体，复合体量取决于标本中反应物浓度。第二次孵育：添加钌复合体a标记洋地黄毒苷和链酶亲和素包被的微粒后，生物素抗体空闲位点结合抗原，反应生成一“抗体半抗原”样复合体，并在生物素和链酶亲和素的相互作用下结合到固相载体上。将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。未结合的物质通过ProCell 除去。在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。通过检测仪的定标曲线得到最后的检测

4、结果，定标曲线是通过2点定标点和试剂条形码上获得的主曲线生成的。*Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M 链酶亲和素包被的微粒（透明瓶盖）每瓶6.5ml：链酶亲和素包被的微粒，0.72mg/ml防腐剂。R1 生物素化洋地黄毒苷特异性抗体（灰色瓶盖）每瓶9ml：生物素化多克隆抗洋地黄毒苷抗体（羊）：0.5 mg/L；磷酸盐缓冲液：100 mmol/L，PH值6.8；防腐剂。R2 钌复合物标记的洋地黄毒苷（黑色瓶盖）每瓶9m：钌复合物标记的洋地黄毒苷：4.0 g/L；磷酸盐缓冲液：100 mmol/L，PH值6.8

5、；防腐剂。注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。避免与任何形式的试剂或任何形式的样本（样品、定标品和质控）形成泡沫。试剂处理本试剂盒的任何一种试剂只可与试剂盒的其它试剂联合使用，不可单独使用。可从试剂条形码读取有关如何正确使用该试剂的所有信息。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys 洋地黄毒苷试剂盒，以确保使用前自动混合过程中微粒完全有效。稳定性：28（未开封）：有效期内均可使用。开封后，28：可存放12周。在MODULAR ANALYTICE170分析仪及cobas e 601上：可保存4周。在Elecsy

6、s 2010及cobas e 411分析仪上：可保存4周。在Elecsys 1010分析仪上：保存4周（存放在冰箱内或分析仪上，温度2025）；彻底暴露情况下可保存20小时。标本的采集和准备洋地黄毒苷检测的样本须在用药后824个小时内收集。只有按如下方法收集的标本才适合用本试剂盒检测。血清必须用标准试管收集。内有分离胶的试管不适用于治疗药物监测。请注意厂商提供的数据。肝素锂、肝素钠、肝素胺、K3-EDTA、柠檬酸钠血浆。（原则：回收率90110；斜率0.91.1；相关系数0.95；0.95）.稳定性： 28C可保存一周；在-20C可保存6月，只可冻溶一次。选择检测时市场上能获得的标本收集试管收

7、集标本和检测，不是所有能获得的厂商的试管均可用于检测。不同厂商标本收集系统可能含有不同材料，某些情况下会影响检测结果。在使用原始试管处理标本时，应遵循试管生产商所提供的指导。如标本中有沉淀出现，必须先作离心处理再进行分析。已经加热失活的标本无法分析。使用叠氮化物作为稳定剂的标本或质控液无法分析。检测前，请确保患者标本、定标液及质控液放置在2025C的环境中。由于蒸发因素的影响，标本、定标液及质控液在放入分析仪后请在2小时内完成测定。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号03002667，Elecsys Digitoxin CalSet, 4 x 1 mL货号0353047

8、7, Elecsys PreciControl Cardiac, 2 x 2 mL各含 PreciControl Cardiac 1和2货号11732277, Elecsys Diluent Universal, 2 x 18 mL样品稀释液或货号03183971, Elecsys Diluent Universal, 2 x 40 mL常规实验设备Elecsys 1010/2010 或MODULAR ANALYTICS E170 免疫分析仪 Elecsys 1010 和 2010分析仪所需材料: 货号11662988122, Elecsys ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲

9、液货号11662970122, Elecsys CleanCell, 6 x 380 mL,检测池洗液 货号11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液 货号11933159001, SysClean 适配器 货号11706829001, Elecsys 1010 分析杯, 12 x 32 反应管，或货号11706802001, Elecsys 2010分析杯,60 x 60反应管 货号11706799001, Elecsys 2010 分吸吸头, 30 x 120 移液管吸头 Modular Analytics E170免疫分析仪所需材料: 货号

10、12135019190, ProCell M, 1 x 2 L 系统缓冲液 货号12135027190, CleanCell M, 1 x 2 L 检测池洗液货号03023141001, PC/CC杯, 50杯用于在测定前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗系统。货号12102137001,分析杯/分析吸头 组合装 M, 48 分析杯x 84 反应管或加液器吸头,废物袋 货号03023150001, WasteLiner,废物袋 货号03027651001, SysC

11、lean 适配器 M 三种分析仪均需要的材料: 货号11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要获得最佳的测定结果，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪特定检测的操作手册。在使用前分析仪自动使微粒处于悬浮状态。通过各试剂条形码可读取其详细实验参数。在少数情况下，分析仪无法自动读取信息时，请输入标签上的15位数字序列。E170，Elecsys2010及cobas e系列分析仪：将各试剂降温至20C左右，放到分析仪的试剂盘（20C）上，避免泡沫产生。分析仪将自动调节反应温度及各试剂瓶瓶盖的开关状态。Elecsys 1010分析

12、仪：将各试剂降温至2025C左右，放到分析仪的试剂盘上（环境温度2025C），避免泡沫产生。在测定过程中需手动开关各试剂瓶的瓶盖。使用后储存于28C。定标溯源性：本测定方法已按照参考标准定标标准化，即在无分析成分的人血清基质中添加洋地黄毒苷。每批Elecsys洋地黄毒苷试剂都有条形码标记，条形码含有特定批次试剂对应的特定定标信息。预先定义的主曲线适用于使用Elecsys Digoxin CalSet的分析仪。定校间隔：每批不同试剂须重新进行定标（例如在试剂盒被分析仪识别后的24小时内）。除此之外，以下情况必须重新进行定标：Elecsys 2010，E170及cobas e系列分析仪：同一批号的

13、试剂盒在分析仪上使用超过1个月（28天）。同一试剂盒在分析仪上使用超过7天Elecsys 1010分析仪：每换一个试剂盒就要定标一次。系统温度在2025C时7天定标一次。系统温度在2532C时7天定标一次。对于所有分析仪：根据需要定标：如质控数据超过额定的限度。质控Elecsys PreciControl Cardiac,1和2试剂和其它适合的试剂均可作为测定时的质控液。在测定时，对于不同浓度范围的标本，每24小时内必须进行一次质控测试。每次更换试剂盒或进行定标后也须进行质控测试。每个实验室须根据各自的情况确定合适的质控间隔和范围。测定值必须处于规定的范围内。若测定值不在规定的范围内，则每个试

14、验室必须建立相应的矫正方法。计算分析仪自动计算得出每份标本的测定浓度（单位可为nmol/L 或 ng/mL).换算公式nmol/L x 0.76 = ng/mLng/mL x 1.31= nmol/L干扰因素下列情况不影响测定结果：黄疸（胆红素浓度小于633umol/l或37 mg/dL），溶血（血红蛋白小于0.683mmol/L 或1.1 g/dL），脂血（脂类乳剂小于1500 mg/dL），和生物素（小于205 nmol/L 或50ng/mL）。标准：回收率10初始值。对于因某些疾病需要而接受高剂量生物素治疗的患者（ 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集标本。浓度达1500IU/

15、ml的风湿因子对测定无影响。体外对39种常用药物进行试验未发现有药物影响检测结果。乌扎拉可能会导致假性洋地黄毒苷结果偏高。由于存在1.1的交叉反应，乌本苷会导致洋地黄毒苷测定结果偏高。某些情况下，糖苷浓度与药物剂量所对应的浓度值不相关。其原因可能是患者依从性不好，或者是没有考虑以往用药情况。肾衰、肝脏衰竭患者和怀孕晚期妇女血中存在地高辛类似免疫反应物质（DLIS）。研究发现使用商业免疫试剂测定地高辛时，标本中DLIS会使地高辛检测结果偏高。DLIS也会干扰洋地黄毒苷测定。检测中通过添加合适的物质尽量减小检测成分和罕见血清之间出现的免疫交叉反应的干扰。少数病例中极高浓度的链霉抗生物素蛋白和钌抗体

16、会影响测定结果。必须结合患者病史，各项实验室检查及其它临床资料来综合评估测定结果。检测范围2.62-105 nmol/L或 2.00-80.0 ng/mL（由系统主曲线的最低限和最高限决定）。洋地黄毒苷浓度低于检测最低限则报告为2.62nmol/L或 105nmol/L或 80 ng/mL,或最多2倍稀释210 nmol/L或 160 ng/mL。稀释若标本中洋地黄毒苷浓度超过测定范围，则可使用Elecsys Diluent Universal稀释标本。推荐的稀释倍数是1：2（MODULAR ANALYTICS E170，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析仪自动或手动稀

17、释）。稀释标本的浓度必须大于2.5ng/mL 或3.2 nmol/L。手动稀释后，则结果需乘以稀释倍数。使用分析仪自动稀释，则MODULAR ANALYTICS E170 ，Elecsys 1010/2010及cobas e系列分析仪计算标本浓度时会自动考虑稀释因素。参考范围文献中洋地黄毒苷治疗血清浓度为13-39 nmol/L或 10-30ng/mL3。由于治疗和中毒血清浓度范围存在重叠，因此必须考虑糖苷浓度监测和临床发现以判断洋地黄中毒可能。参见“干扰因素”章节。每个实验室必须调查各自患者群体的参考范围变异性，必要时根据具体情况制订自己的参考范围。特殊的性能指标10分析仪的代表性试验数据如

18、下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度根据NCCLS（全国临床实验室规范化操作委员会）制订的改良试验计划(EP5-A)，应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证Elecsys 洋地黄毒苷试剂盒检测重复性。每日测6 次共10 日（n60）；在E170 分析仪上的组间精密度（n21），得结果如下：分析灵敏度（低浓度检测限）2.62 nmol/L (2.00 ng/mL )检测限制定义为可以区别零浓度定标液的最低可测浓度值，计算公式为定标液最小浓度2SD（标准差）（系统定标，定标液最小浓度2SD，组间精密度范围之内，标本数21）。方法学比较将Elecsys Digitoxin试剂（y）按照CEDIA（x）参考品和试剂旧版本进行比较，检测相同的临床标本，得到以下线性关系（ng/mL):标本的浓度范围为6.5 和 55 nmol/L。分析特异性单克隆的抗体具有高度特异性。与以下成分有交叉反应。测定浓度ng/mL交叉反应氢化可的松2000n.d.d肾上腺酮2000n.d.DHEA-S2000n.d.波尼松龙2000n.d.乌本苷20001.1强的松1000n.d.雌二醇200n.d.孕酮200n.d.前海葱甙原50003.6K-毒毛旋花甙50040睾丸激素200n.d.洋地黄毒甙元一洋