骨髓细胞染色体标本制备_第1页
骨髓细胞染色体标本制备_第2页
免费预览已结束，剩余1页可下载查看

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验八 动物骨髓细胞染色体的制备一、实验目的 1 .掌握动物骨髓细胞染色体制备方法 2 .观察染色体的形态特征以及数目二、实验原理 用适量的秋水仙素溶液注入动物体内，处于分裂期的细胞经秋水仙素处理，由于阻断了纺锤丝的形成，使细胞分裂处于中期，此时的染色体具有典型的形态。骨髓中具有丰富的细胞，这些细胞具有高度的分裂活性，经秋水仙素处理后，可使分裂期细胞处在有丝分裂中期，再经过离心、低渗、固定、滴片、染色等步骤，可制作理想的染色体的标本。是研究细胞遗传学的好材料三、实验步骤 1. 秋水仙素处理：取小白鼠一只，体重20g左右， 在实验前3.5 4 h 腹腔注射0.80g/L的秋水仙素0.2 毫升。

2、2. 取股骨：实验开始时，小鼠拉颈椎处死，取两侧 股骨，用酒精纱布擦去股骨上的肌肉。 3. 收集骨髓细胞： 1ml 注射器插入骨髓腔内，将骨 髓腔先穿通. 然后针头刺入一半位置，将股骨另一 端置于含有5ml0.85%生理盐水的离心管，反复抽 打，直到股骨变白色为止，然后倒转股骨，如法继 续抽打，使骨髓腔内的骨髓全部冲洗到离心管中。 然后1000 rpm离心10min，弃上清。4. 低渗处理：沉淀中加4ml 0.075M KCl(事先在37 温箱中预热) ，用吸管抽打均匀后，置于37 温箱 中低渗处理30 min.5. 固定：低渗处理后，1000rpm离心10min去上清， 沉淀中慢慢加入新配置

3、的卡诺固定液45ml，立即 用吸管轻轻吹打均匀，静置15min。1000rpm离心 10min, 去上清。6. 重复第5步操作一次。7. 离心后的上清，约剩0.5ml左右，用吸管吹打成悬液。8. 滴片：将干净载玻片事先预浸在0 冰水中， 用时取出，将载玻片倾斜45o，用吸管取细胞 悬液。滴在载玻片上12滴（避免重叠），立 即用力吹散，使细胞分散均匀，然后置酒 精灯上微微加热干燥。 9. 染色：取晾干的玻片，用Giemsa染液染色10min ，蒸馏水冲洗，自然干燥。10 . 镜检：先在低倍镜下找到中期分裂相的细胞， 再转高倍镜，选择染色体分散适度，长度适度的 分裂相观察。四、作业 1、描绘小鼠骨髓细胞

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论