对乙酰氨基酚的鉴定结构确证与含量测定

1、-、实验目的掌握对乙酰氨基酚的鉴定的方法了解对乙酰氨基酚结构确证的过程运用仪器分析手段对对乙酰氨基酚进行含量测定二、实验原理对乙酰氨基酚(CHNO)为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。在热水或892圈|对乙醉抵基酚丽分子结陶Fi-ir.Tin1eiiiJituJujslJurliLfi!ul.xiLiiiLi)cijl.*ri乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中微溶。熔点168-172C。对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药物，且毒副作用小，较适合儿科患者使用。已成为全世界应用最广泛的的药物之一，是国际医药市场上头号解热镇痛药。以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液

2、在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。利用721分光光度计测定其波长确定最大吸收，并通过分光光度计进行条件优化，依据比尔定律绘制标准曲线。通过标准曲线法求得对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。取对乙酰氨基酚溶解于流动相后于200400波长范围扫描，结果在250的波长处有最大吸收，故选择此波长作为测定波长。对乙酰氨基酚易溶于热水中，用温水浴溶解15分钟以上时对乙酰氨基酚已全部溶解。以甲醇-水-磷酸(22-78-0.1)为流动相，能使对乙酰氨基酚得到很好的分离。采用外标法，用对乙酰氨基酚标准溶液作为对照品，求得样品对乙酰氨基酚的浓度，从而求得对乙酰氨基酚的含量。三、

3、实验过程鉴定本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色。取本品约0.1g，加稀盐酸5ml,置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1,滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性B-萘酚试液2ml，振摇，即显红色。本品的红外吸收图谱应于对照的光谱一致。结构确证红外光谱图4C1CM132002DOC9SCOI2CKJftUQ4001核磁共振氢谱（3）含量测定紫外分光光度法3.1.1溶液的制备Na2C03溶液的制备准确称取Na2CO35.3035g,置于1000mL容量瓶中，加纯水标定至刻度，摇匀。图1对乙酰氨基酚和内标邻苯二屮酸氢钾的结构覆其氢谱Fi场1TheslruelureandHNMRs

4、peciraofparaceientolantiKriassiuniliyrljogenphlhillale3.1.2对乙酰氨基酚溶液的制备准确称取对乙酰氨基酚标准品0.1023g,置于100mL的烧杯中，加浓盐酸10mL，纯水10mL,在70C水浴加热75min，冷却至室温，将水解液转移到1000mL的容量瓶中。用Na2C03溶液稀释至刻度，摇匀。0043g置于100mL容量瓶中加纯水标定到刻度，摇匀。3.1.3显色剂（1%亚硝基铁氰化钠）的制备准确称取Na2C031.0019g亚硝基铁氰化钠1.3.1.4实验方法段光廉与弟占汀同義系曲苗；Fi苗.MjTVT：with呷知1嚳泗tjilYir

5、先以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液，对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用，生成蓝色配位化合物。由图4知当络合时间超过20分钟，吸光度也不会发生较大改变，故定络合时间为20分钟。精确吸取对乙酰氨基酚溶液100mL，放入1000mL的容量瓶中，加水至刻度线，摇匀，定为溶液（I）。在752-分光光度计上测定波长范围,选择出最大波长利用752分光光度计测定其波长确定最大吸收。在上述条件下，按实验方法改变溶液中对乙酰氨基氨基酚的加入量，测定吸光度并绘制标准曲线。精确取样品对乙酰氨基酚0.1000g,置于100mL的烧杯中，加浓盐酸10mL，纯水10mL，在70C水浴加

6、热75min,冷却至室温，将水解液转移到1000mL的容量瓶中。用Na2C03溶液稀释至刻度，摇匀。精确吸取样品对乙酰氨基酚溶液100mL，放入1000mL的容量瓶中，加水至刻度线，摇匀，在752分光光度计下测定其吸光度，由标准曲线求得浓度，从而求得样品对乙酰氨基酚的含量。HPLC法3.2.1仪器与试剂仪器高效液相色谱仪：高效液相色谱仪（岛津LC-10A）紫外检测器,N2000色谱工作站，C反18向键合相色谱柱(150mmx4.6mm),微量注射器(25uI)试剂及试药甲醇:色谱纯;磷酸:分析纯;水:二次蒸馏水对乙酰氨基酚对照品(纯度99%)对乙酰氨基酚样品3.2.2色谱条件色谱柱：Cq反向键

7、合相色谱柱(150mmx4.6MM)流动相：甲醇-水-磷酸(22-78-0.181)流速：1.0ml/min检测波长：250nm;进样量：50ul柱温：35C。2.3实验方法精密称取对乙酰氨基酚对照品10mg,置100ml容量瓶中,加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10ml与另一100ml容量瓶，加入流动相稀释至刻度，作为标准溶液。精密称取对乙酰氨基酚样品10mg置100ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。精密吸取10ml与另一100ml容量瓶，加入流动相稀释至刻度，作为待测溶液。在相同的色谱条件下各进两针待测液与标准液，通过峰面A积求得待测液的浓度。3(%)=10 xixCxO.IOOOxMAmss

8、i(A样品对乙酰氨基酚的色谱峰面积A标准对乙酰氨基酚的色谱峰面积C标准对iss乙酰氨基酚的的物质的量浓度M对乙酰氨基酚的相对分子量)标准对乙酰氨基酚峰面积As样品对乙酰氨基酚的峰面积Ai第一次测量第二次测量参考文献1张金磊，李海龙分光光度法测定药品中对乙酰氨基酚含量【J】广州化工第40卷第18期2012年9月2.杨静伟刘晓放王瑞红HPLC法测定外用对乙酰氨基酚凝胶中对乙酰氨基酚的含量【J】黑龙江医药VOL.20NO.320073朱炯孙会敏岳志华田颂九PLC法测定对乙酰氨基酚栓剂中对乙酰氨基酚的含量【J】药物分析杂志ChinJPharmAnal,2004(4)中国药典(2010年版二卷)中国医药出版社严拯