海医肠杆菌科培训课件

1、海医肠杆菌科海医肠杆菌科 一、种类肠杆菌科细菌目前已有44个属170多个种。临床上常见的有 概述 埃希菌属（Escherichia）沙门菌属（Salmonella）志贺菌属（Shigella）耶尔森菌属（Yersinia）枸橼酸杆菌属（Citrobacter）克雷伯菌属（Klebsiella） 肠杆菌属、多源菌属、哈夫尼亚属 沙雷菌属（Serratia） 变形杆菌属、普罗菲登菌属、摩根菌属 肠杆菌科中的其他菌属海医肠杆菌科2 概述 埃希菌属（Escherichia）海医肠杆菌科2 第一节 埃希菌属 （Escherichia） ( E.coli)(E.fergusonii)(E.hermanni

2、i)(E.vulneris)(E.blattae)不脱胺/凝聚埃希菌。( E.abecarboxylata/agglomerans) 代表菌：大肠埃希菌（Escherichia coli） 海医肠杆菌科3 第一节 埃希菌属 （E学习大肠埃希菌有何意义?1.大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。2.又为条件致病菌,引起肠道外感染。3.一些血清型具有致病性。4.环境卫生学和食品卫生学常用作粪便污染的指标。5.用于基因工程研究。海医肠杆菌科4学习大肠埃希菌有何意义?1.大肠埃希菌为肠道正常菌群成员。海 一、生物学性状 （一）形态与染色1.G-两端钝圆的中等 大小的短杆菌。2.周鞭毛，无芽胞，电镜 观察有周身

3、菌毛 。 菌毛：普通菌毛、性菌毛 3. 某些菌株有包膜（K）。4.培养初期或分泌物中可形成球形。海医肠杆菌科5 一、生物学性状 （一）形态与染色海医肠杆1.对营养要求不高，自身合成能力很强 。2.兼性厌O2 1545均可发育，最适温度37，最适pH7.47.6。3.在普通琼脂上可形成光滑、湿润、灰白色半透明、凸起、边缘整齐中等大小（23mm）的菌落。4.在血平板上生长更佳，某些菌株（溶血性菌株）可产生溶血。 （二）培养特点海医肠杆菌科6（二）培养特点海医肠杆菌科6（1）SSA指示剂为中性红，分解乳糖产酸的细菌（大肠埃希菌）呈红色菌落（2）中国蓝 大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落，其

4、他不分解乳糖的肠道菌为透明淡红色菌落。 5.在肠道选择性培养基上，因能分解乳糖产酸，使指示剂变色形成有色菌落。海医肠杆菌科7 大肠埃希菌分解乳糖产酸形成大而浑浊的蓝色菌落，5.在海医肠杆菌科8海医肠杆菌科8（三）生化反应 1.可分解多种糖（醇）类 葡、乳、麦、甘对蔗糖、卫矛醇、棉子糖、鼠李糖则因菌株而异。2.IMVC为+ + - -。3.尿素酶、苯丙氨酸、丙二酸盐 -。 4.克氏双糖铁/ 海医肠杆菌科9（三）生化反应 1.可分解多种糖（醇）类 葡、乳、麦、甘 I M V C I M V C + + - - - - + +海医肠杆菌科10 I M V C (四)Ag构造复杂主要有O、H、K三种A

5、g1.O-Ag 本质是细菌细胞壁的成分，其化学组成是脂多糖组成其分子由3部分组成： 海医肠杆菌科11 (四)Ag构 2.H-Ag本质其化学组成为鞭毛蛋白性质不耐热其特异性取决于多肽链排列顺序和空间构型 海医肠杆菌科12 2.H-Ag海医肠杆 3.K-Ag本质化学成分是多糖性质 细菌的种类不同，其名称也不同 E.coliK-Ag S.typhi-不耐热的作用与相应故可阻断周围因其包绕.bAbAgO，AgO.a 区别点 L A B破坏其本身的可凝集性 1001h 1202.5h 100 1h破坏其抑制O血清的凝集 1001h 1202.5h 100 1h与抗体结合力的破坏 1001h 1212.5

6、h不破坏 100 2.5h不破坏抗原性破坏 1001h 1202h 100 1h本质 菌毛抗原 荚膜 荚膜抗原表示法：上述3种抗原均用阿拉伯数字表示 其型别按O:K:H 例如：O111:K58:H2 简写： O111:58:2 O86:B7:H3简写： O86:7:3表示法：上述3种抗原均用阿拉伯数字表示 其型别按O:K:H 例如：O111:K58:H2 简写： O111:58:2 O86:B7:H3简写： O86:7:3Vi Ag海医肠杆菌科13 3.（五）抵抗力不强1.10g/L石炭酸1530min被杀死;2.加热6010min即死;3.对酸敏感海医肠杆菌科14（五）抵抗力不强1.10g/

7、L石炭酸1530min被杀死; 二、致病性 (一)致病物质1.黏附素 使细菌紧密黏附于肠道泌尿道细胞上,避免尿液的冲刷和肠蠕动排除。 特点:具有高度的特异性 定植抗原、 ( CFA/、CFA/、CFA/) 集聚黏附菌毛和 ( AAF/、AAF/) 束形成菌毛(bundle forming pili,Bfp) 种类 紧密黏附素(intimin) P菌毛 侵袭质粒抗原(invasion plasmid antigen,Ipa)蛋白 Dr菌毛海医肠杆菌科15 二、致病性 (一)致病物质 (1)志贺毒素和(Shiga toxins,Stx-,Stx-)（2）耐热肠毒素a和b（heat stable e

8、nterotoxin,STa,STb） (3)不耐热肠毒素和 （heat labile enterotoxin,LT-,LT-） (4)溶血素A2.外毒素 海医肠杆菌科16 (1)志贺毒素和(Shiga toxins,Stx- (1)志贺毒素和 (Shiga toxins,Stx-,Stx-)产生菌株及作用 肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)可表达志贺毒素,引起上皮细胞微绒毛的破坏。性质 Stx-与志贺菌产生的志贺毒素基本相同。Stx-则有60%的同源。两型毒素均由溶原性噬菌体介导。海医肠杆菌科17 海医肠杆菌科17结构及作用A亚单位可裂解60S核

9、糖体亚单位的28SrRNA阻止与氨酰tRNA的结合,终止蛋白质合成。Stx由1个A亚单位和5个B亚单位成。B亚单位与宿主细胞特异性糖脂受体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体)海医肠杆菌科18结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA作用机制A.绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加。B.溶血性贫血的尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)在产生志贺毒素( Stx-)的 EHEC中较多 ,因Stx-能选择性破坏肾小球内皮细胞,引起肾小球滤过减少和急性肾功能衰竭。C.志贺毒素( Stx)还能刺激炎症细胞因子(肿瘤坏死因子-,白细胞介

10、素-6)的表达。D.还可加强糖脂受体的表达。海医肠杆菌科19作用机制A.绒毛结构的破坏引起吸收减低和液体分泌的相对增加产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)产生耐热肠毒素由质粒编码。STb与人类疾病无关 。STa 的性质 : A.低分子量多肽; B热稳定(10020min不失活) C.免疫原性差。STa的作用机制:与LT-不同。是通过激活肠黏膜细胞的鸟苷环化酶使cGMP水平引起腹泻，细菌产生肠毒素的能力与 两种Plasmid有关。应当指出的是:STa阳性菌株同时产生LT,具有更强的致病性。（2）耐热肠毒素a和b（heat stable en

11、terotoxin,STa,STb）海医肠杆菌科20产生菌株及作用（2）耐热肠毒素a和b海医肠杆菌科20 (3)不耐热肠毒素和 （heat labile enterotoxin,LT-,LT-）产生菌株及作用肠产毒素性大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli,ETEC)产生耐热肠毒素由质粒编码。 LT-与人类疾病无关LT- 是引起人类胃肠炎的致病物质,在结构和功能上与霍乱弧菌产 生的肠毒素密切相关。 特点:不耐热 结构:A亚单位(毒素的活性部位)B亚单位与肠黏膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后,使A亚单位穿过细胞膜与腺苷环化酶作用海医肠杆菌科21 (3)不耐热肠毒素和A亚单

12、位(毒素的 LT- 小肠上皮C的腺苷环化E 刺激前列腺素 的释放和炎症因子 的产生ATPcAMP 促进肠粘膜分泌功能 进一步导致水 分的丧失 引起腹泻致病作用海医肠杆菌科22致病作用海医肠杆菌科22 (4)溶血素A在尿路致病性大肠埃希菌所致疾病中有重要作用。海医肠杆菌科23 海医肠杆菌科233.侵袭力（1）K-Ag抗吞噬有抵抗抗体和补体（2）菌毛帮助细菌粘附于粘膜表面。 4.内毒素 5. 型分泌系统是一种向真核靶细胞内输送毒性基因产物的细菌效应系统。海医肠杆菌科243.侵袭力海医肠杆菌科24 （二）所致疾病(一)1.肠外感染（1）尿路感染常见的有O1、O2、O6、O7、O11、O25、O75，

13、这些大肠埃希菌具有K-Ag （抗吞噬）和菌毛（粘附泌尿道抗冲洗）。（2）败血症如烧伤引起G-败血症（3）胆囊炎、肺炎以及新生儿或婴幼儿脑膜炎。 海医肠杆菌科25 （二）所致疾病(一)1.肠外感染海（二）所致疾病(二)2.胃肠炎（1）产毒素大肠埃希菌(ETEC)引起婴幼儿及旅游者腹泻。（2）致病性大肠埃希菌(EPEC)主要引起婴儿腹泻。（3）侵袭性大肠埃希菌(EIEC)引起较大儿童和成年人腹泻，有时可形成暴发性流行。 （4）肠出血性大肠埃希菌(EHEC)：由O157:H7引起的腹泻，有27发展成溶血性尿毒综合征，出现溶血性贫血，血小板减少性紫癜和急性肾衰竭。（5）肠凝聚性大肠埃希菌(EAEC)：

14、成人慢性腹泻，儿童急性腹泻。海医肠杆菌科26（二）所致疾病(二)2.胃肠炎海医肠杆菌科26 三、微生物学检查法 （一）肠外感染的细菌学检验主要指普通大肠埃希菌1.标本的采集 视疾病种类不同而异呼吸系痰烧伤及化脓感染脓汁及分泌物尿路感染尿液菌血症（败血症）血液N症状脑脊液胆囊炎胆汁卫生细菌学水等海医肠杆菌科27 三、微生物学检查法 （一）肠外感染的细菌学检验海2.检验方法(1)涂片染色检查法除血液标本外,均作。(2)分离培养血平板、SSA、MAC海医肠杆菌科282.检验方法海医肠杆菌科28(3)鉴定（1）初步鉴定 形态染色特点菌落特征（EMB、中国蓝、麦康凯)KIA A.A+-生化反应初步鉴定为

15、大肠埃希菌 硝酸盐还原+氧化触E+-E、IMVC+-MIU+-海医肠杆菌科29(3)鉴定（1）初步鉴定 硝酸盐还原+氧化（2）最后鉴定触E+氧化E-葡或/+ 乳/迟缓+ 肌醇- IMVC + + - -脲酶- H2S-苯丙脱氨E-硝酸盐还原+动力多+ 海医肠杆菌科30（2）最后鉴定海医肠杆菌科30（二）肠道内感染的细菌学检验 )EaggEC()EHEC()EIEC()EPEC()ETEC(5肠凝聚型大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌肠侵袭性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌产肠毒素型大肠埃希菌组包括海医肠杆菌科31（二）肠道内感染的细菌学检验 )EaggE 检验方法标本 接种选择培养基 挑选可疑菌落鉴定大

16、肠埃希菌ELISA核酸杂交PCR其它其他分子生物学技术检测不同类型胃肠炎Ecoli的肠毒素毒力因子和血清型等特征海医肠杆菌科32 检验方法标本 接种选择培养基 卫生细菌学检查Ecoli随粪便排除污染环境、水源、饮料、食品等检测样品中Ecoli间接表明肠道致病菌污染大肠菌群指数每1000ml(g)样品中的大肠菌群数。大肠菌群系指在3724h内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌。包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属。我国卫生标准规定:饮水 3个/L 汽水果汁5个/L海医肠杆菌科33卫生细菌学检查Ecoli随粪便排除污染环境、水源、饮料、食品防治原则1.疫苗的免疫预防正在研究中。2

17、.抗生素治疗要在药敏试验指导下进行。3.尿道插管和膀胱镜检查应无菌操作。4.腹泻病人应进行隔离治疗,及时校正水和电解质平衡。5.采取措施减少医院感染。6.保持高卫生标准,减少接触引起胃肠炎的大肠埃希菌菌株的危险。7.污染的水和食品是肠产毒素性大肠埃希菌(ETEC)的重要传播媒介;肠出血性大肠埃希菌(EHEC)常由污染的肉类和未消毒的牛奶引起。要充分烹饪。海医肠杆菌科34防治原则1.疫苗的免疫预防正在研究中。海医肠杆菌科34 第二节 志贺菌属（Shigella）志贺菌属痢疾志贺菌（S.dysentriae）福氏志贺菌(S.flexneri)鲍氏志贺菌(S.boydii)宋内志贺菌(S.sonne

18、i)海医肠杆菌科35 第二节 志贺菌属（Shigella）志贺菌属一、生物学性状 （一）形态与染色 从形态学上看，志贺菌属与一般肠杆菌科细菌无明显的区别。 突出点是无鞭毛不能运动。1.G-短小杆菌2.无特殊构造3.有菌毛海医肠杆菌科36一、生物学性状 从形态学上看，志贺菌属与一般肠杆菌科细菌无明 （二）培养特点 1.营养要求不高，可在普通培养基上生长。2.普通琼脂平板 光滑、湿润、圆形凸起，无色半透明，边缘整齐，中等大小的菌落。 3.在肠道选择性培养基上，为不发酵乳糖菌落值得提出的是，宋内志贺菌培养48h后可转为乳糖发酵菌落。也常出现扁平粗糙型菌落 海医肠杆菌科37 （二）培养特点 1.营养要

19、求不高，可在普通培养基 SSA海医肠杆菌科38 SSA海医肠杆菌科38（三）生化反应 较为复杂葡萄糖、MR 阳性 尿乳蔗枸赖脱，V-P、H2S均阴性 SSA 无色半透明菌落 克氏双糖铁 斜面粉红, 底层黄+海医肠杆菌科39（三）生化反应 较为复杂葡萄糖、MR 阳性 海医肠杆菌科 I M V C海医肠杆菌科40 I M V （四）Ag构造及分类 1.Ag构造 特点无H-Ag（1）O-Ag是分类的依据型特异性Ag 群特异性Ag 海医肠杆菌科41（四）Ag构造及分类 1.Ag构造 特点无H（2）K-Ag 海医肠杆菌科42（2）K-Ag 海医肠杆菌科422.分类根据O-Ag不同将shigella分为4

20、个群 (P122，表7-12) -海医肠杆菌科432.分类 -海医肠杆菌科43我国福氏最多，宋内次之。南方鲍氏也不少。 A群:即痢疾志贺菌 有12个血清型均不发酵甘露醇无鸟氨酸脱羧酶与其他各群无血清学关系我国常见的为2型，又叫舒密志贺菌（西藏），I（靛基质）+，其他型- B群又叫福氏菌群有6个血清型,2个变种(X、Y)其特点：分解甘露醇无鸟氨酸脱羧酶-Ag构造较复杂，各型间有交叉Ag海医肠杆菌科44我国福氏最多，宋内次之。南方鲍氏也不少。 海医肠杆菌科44 C群又叫鲍氏菌群，有18个血清型其特点：分解甘露醇鸟氨酸脱羧酶-各型间无交叉Ag D群又叫宋内菌群，只有一个血清型其特点：分解甘露醇鸟氨酸

21、脱羧酶+迟缓分解乳糖本群菌有光滑型（S）和粗糙型（R）两种海医肠杆菌科45 C群又叫鲍氏菌群，有18个血清型海医肠杆菌科45较其他肠杆菌科细菌弱 。（五）抵抗力1.不耐热6010min即可杀死2.对一般消毒剂敏感3.耐48种药物海医肠杆菌科46（五）抵抗力1.不耐热6010min即可杀死海医肠杆菌科4 二、致病性与免疫性 （一）致病物质 1.侵袭力 2.内毒素 3.外毒素 海医肠杆菌科47 二、致病性与免疫性 （一）致病物质海医肠杆菌科4派伊尔淋巴结的M细胞通过型分泌系统向上皮细胞和巨噬细胞分泌4种蛋白志贺菌IpaA IpaB黏附并侵入IpaCIpaD诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞志贺菌溶解吞噬

22、小泡 进入细胞质内繁殖宿主细胞内肌动纤维的重排,推动细菌进入毗邻细胞细胞到细胞传播细菌逃避了免疫的清除作用而得到了自身保护通过诱导细胞程序性死亡从吞噬中得到了存活引起白细胞介素-1的释放 吸引多形核白细胞到感染组织肠壁完整性破坏细菌到达较深层的上皮细胞,加速了细菌的扩散1.侵袭力 作用海医肠杆菌科48派伊尔淋巴通过型分泌系统向上皮细志贺菌IpaA Ip2.内毒素内毒素肠黏膜通透性内毒素的吸收促进发 热神志障碍中毒性休克作用内毒素肠黏膜破坏炎症溃疡形成典型的脓血黏液便内毒素肠壁自主神经系统作用于肠功能紊乱肠蠕动失调和痉挛肤痛里急后重海医肠杆菌科492.内毒素内毒素肠黏膜通透性内毒素促进发 热作用

23、内3.外毒素其功 能同肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC),引起上皮细胞微绒毛的破坏。产生菌株及功能A群志贺菌(痢疾志贺菌) 型和型可产生志贺外毒素。海医肠杆菌科503.外毒素其功 能同肠出血性大肠埃希菌(enterohemo结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA阻止与氨酰tRNA的结合,终止蛋白质合成。Stx由1个A亚单位和5个B亚单位成。B亚单位与宿主细胞特异性糖脂受体结合(肠绒毛和肾上皮细胞均有高浓度的糖脂受体)毒素作用:损伤上皮细胞。个别病人志贺毒素可介导肾小球内皮细胞的损伤,导致溶血性尿毒综合征(HUS)海医肠杆菌科51

24、结构及作用A亚单位可裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA急性、亚急性、慢性菌痢，急性最常见，中毒性痢疾。 （二）所致疾病海医肠杆菌科52急性、亚急性、慢性菌痢，急性最常见，中毒性痢疾。 （二）所(三)免疫性 病后,在血液中可产生循环抗体,此抗体无保护作用。 其抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的分泌型IgA(SIgA) 。 病后免疫期短,不巩固。其原因:1.感染只停留在肠壁局部。2.型别多。海医肠杆菌科53(三)免疫性 病后,在血液中可产生循环抗体,此抗 三、微生物学检查法 （一）标本的采集1.用无菌棉拭取病人新排出的粪便的粘液或脓血便。2.无便者，用无菌棉拭从肛门或直肠直接取。3.对昏迷病人、

25、不排便者灌肠。4.慢性患者用直肠镜。 海医肠杆菌科54 三、微生物学检查法 （一）标本的采集海医肠杆菌科注意事项：1.用药前采集标本2.要快（要立即送检）最好1h内或床边接种3.取材不要粪尿相混（本菌怕酸）4.如不能立即送检者，立即用3%甘油盐水保存液，远道可放在冰壶中 海医肠杆菌科55注意事项：海医肠杆菌科55（二）检验程序 海医肠杆菌科56（二）检验程序 海医肠杆菌科56（三）检验方法 1.分离培养SSA及MacConkey无色透明中等大菌落2.初步鉴定 （1）试探性玻片凝集 先用志贺菌属多价诊断血清再用单价血清（2）初步生化反应 KIA、MIU KIA MIU 抗血清斜面底层气体H2S

26、动力吲哚脲酶 多价 单价- +-/+ - - +/- - + +海医肠杆菌科57（三）检验方法 1.分离培养KIA 3.最后鉴定 （1）生化反应,除KIA、MIU外，甘露醇（+/-）、蔗糖（-/+）、C（-）、苯丙氨酸脱氨酶（-）、ONPG（-半乳糖苷酶）（-）、鸟氨酸脱羧酶（-）（宋内+）(2)血清学鉴定：生化特点符合,且多价、单价血清均呈阳性者，应转入分型鉴定。海医肠杆菌科58 3.最后鉴定 （1）生化反应,除KI测定志贺菌的侵袭力可用Sereny试验豚鼠眼结膜试验另一只眼用大肠埃希菌作对照 4.毒力试验受试1824h培养物接种结囊内发生结膜炎Sereny试验阳性表明受试菌有侵袭力志贺毒素

27、的测定HeLa细胞Vero细胞PCR直接检测其毒素基因stxA和stxB海医肠杆菌科59测定志贺菌的侵袭力可用Sereny试验另一只眼用大肠埃希菌作（1）免疫荧光菌球法特异性较强（2）免疫染色法 (3)协同凝集试验 (4) 胶乳凝集试验 (5)分子生物学方法5.快速检验法海医肠杆菌科60（1）免疫荧光菌球法特异性较强5.快速检验法海医肠杆菌科 第三节 沙门菌属（Salmonella）动物致病的沙门菌从对人引起疾病的角度 本属的代表菌伤寒沙门菌（S.typhi）。 引起肠热症副伤寒沙门菌伤寒沙门菌人的致病菌Bparatyphi.S(A)typhi.S(毒污染乳肉蛋引起食物中肠炎沙门菌猪霍乱沙门菌

28、鼠伤寒沙门菌人畜共患-)senteritidi.S()suischolera.S()mtyphimuriu.S(c海医肠杆菌科61 第三节 沙门菌属（Salmonella）动物致病的沙门 一、生物学性状 （一）形态与染色 基本同E.coli1.G-细长的中杆菌2.无芽胞、无荚膜，除雏白痢沙门菌和鸡沙门菌外均具有周身鞭毛3.多数菌株有菌毛 海医肠杆菌科62 一、生物学性状 （一）形态与染色 （二）培养特点 3.生长现象（1）普通琼脂平板 圆形，无色半透明，光滑湿润，边缘整，粗糙型表面干燥边缘不整（呈锯齿状）。 (2)产生H2S的细菌在SSA上形成带黑心的菌落。海医肠杆菌科63 （二）培养特点 3

29、.生长现象(2)产生H2S的细菌海医肠杆菌科64海医肠杆菌科64海医肠杆菌科65海医肠杆菌科65 （三）生化反应 1.沙门菌与大肠埃希菌的区别 乳 蔗 I E.coli + Salmonella - - - 尿素 Proteus + Salmonella - 葡 麦 甘 鼠 鸟 C（柠） 其他沙门菌 /- + +/- 伤寒沙门菌 + + + - - -/+ 3.伤寒沙门菌与其他沙门菌的主要区别 2.沙门菌与变形杆菌的区别 4.根据生化反应，沙门菌属分为6个亚属海医肠杆菌科66 （三）生化反应 1.沙门菌与大肠埃希菌的区别 海医肠杆菌科67海医肠杆菌科67 I M V C海医肠杆菌科68 I M

30、 V （四）Ag构造及分类 1.菌体（O）Ag （1）组成 就是细胞壁的脂多糖 （2）性质较稳定（3）成分 根据O-Ag的组成成分不同，共有58种，用阿拉伯字母1、2、3表示，目前已排至67，其中有9个数码被删去，故数字不是连续的。并且将具有相同成分的沙门菌都归为一群（即每群都有它共同的Ag），这样使2000种沙门菌归为A、B、C、D、E、F、I一直至Z，在以O51O67群表示 ( 4）O-Ag机体产生IgM型Ab O-Ag与O-Ab呈颗粒状凝集石炭酸破坏不被酒精可达耐热、h5.2，100海医肠杆菌科69 （四）Ag构造及分类 1.菌体（O）Ag 石炭酸2.鞭毛（H）Ag（1）组成Pr（2）性

31、质不稳定 （3）具有鞭毛的细菌经甲醛固定后即制成H-Ag，由于H-Ag将O-Ag遮盖，故O-Ag不能再与O-Ab发生凝集（4）H-Ag机体产生IgG型Ab H-Ag与H-Ab呈絮状凝集 海医肠杆菌科702.鞭毛（H）Ag海医肠杆菌科70（5）H-Ag分两相 同时具有两相的H-Ag叫双相菌 仅有一相的H-Ag，叫单相菌 3.表面Ag 目前已证实，本属细菌中的个别血清型具有Vi-Ag、M-Ag和5Ag三种表面Ag。 -)7(4,3,1 2,，70)117P,117(zz,z,z，z)(zd,c,b,a，65321种以上目前有表示伯字母几种沙门菌共有。用阿拉第二相又叫非特异相多种目前有表见表示以后则

32、用小写直至表示用小写特异性高第一相又叫特异相,海医肠杆菌科71（5）H-Ag分两相 同时具有两相的H-Ag叫双相菌3.表面（五）抵抗力 本属细菌在自然界中生活能力较强，仅次于大肠埃希菌，在土壤、水中可活几周几个月，在粪便中可活较长时间。1.耐冷不耐热 2.易被一般消毒剂杀死 3.胆盐、煌绿及其他染料对沙门菌的抑制作用较其他肠道菌为小。 海医肠杆菌科72（五）抵抗力 本属细菌在自然界中生活能力较强，仅次于大肠埃希 二、致病性和免疫性 1.侵袭力 有Vi-Ag的伤寒沙门菌比无Vi-Ag者要强得多。2.内毒素3.有些菌型尚能产生肠毒素（如鼠伤寒沙门菌），其性质类似产毒素大肠埃希菌。 （一）致病物质海

33、医肠杆菌科73 二、致病性和免疫性 1.侵袭力 有Vi派伊尔淋巴结的M细胞通过两个型分泌系统沙门菌黏附并侵入诱导细胞膜凹陷 导致细菌内吞沙门菌溶解吞噬小泡 进入细胞质内繁殖细胞到细胞传播导致宿主细胞死亡1.侵袭力 繁殖输送外源性Ag到其下方的巨噬细胞沙门菌致病岛(SPI)沙门菌致病岛(SPI)沙门菌侵袭蛋白向M细胞宿主细胞内肌动纤维的重排细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织具有耐酸应答基因使细菌在胃和吞噬体的酸性环境得到保护氧化酶、超氧化物歧化酶保护细菌不被胞内杀菌因素杀伤伤寒沙门菌希氏沙门菌Vi抗原抗吞噬,阻挡抗体、补体海医肠杆菌科74派伊尔淋巴通过两个型分泌系统沙门菌黏附并侵入诱导细胞膜凹陷2.

34、内毒素沙门菌死亡后释放内毒素引起宿主KT ,WBC大剂量导致中毒症状和休克激活补体替代途径产生C3a、C5a等诱发免疫细胞、分泌TNF-、IL-1、IFN-等细胞因子海医肠杆菌科752.内毒素沙门菌死亡后释放内毒素引起宿主KT ,WBC大（二）所致疾病1.伤寒、副伤寒沙门菌肠热症2.食物中毒（急性胃肠炎）3.败血症 炎症出血性坏死4.无症状带菌者海医肠杆菌科76（二）所致疾病1.伤寒、副伤寒沙门菌肠热症炎症出血性坏死 三、微生物学检查法 （一）细菌学检查 1.标本的采集 （1）肠热症：1血2便3检尿，要检骨髓全知道 （2）食物中毒 ：呕吐物、可疑食物、粪便（3）其他标本 ：胆汁、脑脊液、胸腹水

35、，应离心后沉淀，供培养用；中耳分泌物、渗出液、脓液、咽喉、阴道等可用拭子采集。注意事项：病的晚期或用药，阳性率 病的初期阳性率不高海医肠杆菌科77 三、微生物学检查法 （一）细菌学检查 海医肠杆菌采集时机用药前新鲜标本，立即送检（如不能立即送检应保存在冰箱、冰壶内，但不得超过2h）血液标本应在出现症状后尽早静脉采血5ml。 海医肠杆菌科78采集时机海医肠杆菌科782.检验方法 （1）分离培养与增菌培养增菌培养孔雀绿氯化镁四硫磺酸盐一般沙门菌亚硒酸盐甲副伤寒增菌液不同沙门菌应选择不同、：、温度的选择伤寒37其他沙门菌4043 为好 -麦康凯中国蓝产选择亚硫酸铋琼脂琼脂强选择种各选培养基一次一次次

36、进行分离培养、EMB、HE.SSA)1(h48h24162海医肠杆菌科792.检验方法 （1）分离培养与增菌培养孔雀绿氯化镁四硫（2）初步鉴定-主要依据是生化和血清学两个方面菌落特点：从选择性培养基上挑选菌落是一个重要环节，稍一疏忽则易遗漏a.菌落以无色、光滑、较透明、扁平为主要特征，大小则往往不一。b.EMB-靠近大肠埃希菌者可呈深蓝色c.SSA-产生H2S者带黑心d.对可疑菌落用笔圈出（便于复查）生化鉴定 凡可疑之每型菌落均要挑取12个，分别接种于KIA和MIU。 海医肠杆菌科80（2）初步鉴定-主要依据是生化和血清学两个方面海医肠杆菌科8本属内细菌鉴定 海医肠杆菌科81本属内细菌鉴定 海

37、医肠杆菌科81先用AF群多价O诊断血清做玻片凝集试验 盐水+无效（S R有关） 盐水-多价O血清+沙门菌 盐水-多价O血清- 生化反应不典型阴性 生化反应典型Vi-AgcH若H2S+葡尿素-初步考虑 （3）最后鉴定 全面生化反应枸橼酸菌属沙门菌亚属、海医肠杆菌科82先用AF群多价O诊断血清做玻片凝集试验cH若H2S+葡尿血清学鉴定a.先用AF群多价O血清做玻片凝集T-确定是否是在AF群内（因95%以上沙门菌均属AF群）b.再分别用代表6个O群的单价因子血清做玻片凝集T进行分群 c.再用鞭毛Ag确定菌种 海医肠杆菌科83血清学鉴定海医肠杆菌科834.鉴定依据 （1）沙门菌的鉴定主要靠 （2）血清

38、型的确定 （3）检查过程中必须配合形态与染色检查，以排除肠球菌 和其他肠道内细菌（4）也可用噬菌体鉴定 生化反应综合判定式相同的菌株则需借助对于型相结合综合决定其血清相和第H因子血清第血清决定定群AgO海医肠杆菌科844.鉴定依据 （3）检查过程中必须配合形态与染色检查，以排除（二）血清学检查肥达（Widal）反应 1.原理 人患伤寒、副伤寒后，一般于12周后在血清中出现的特异性Ab（凝集素），3、4、5周后达高峰，以后缓慢下降。根据此道理，用已知伤寒沙门菌TO、TH和副伤寒PA、PB、PC的菌液做Ag，与病人血清做凝集反应来测定病人血清中有无相应特异性抗体的定量凝集试验。根据抗体凝集价增长情

39、况，以做伤寒、副伤寒的辅助诊断。 2.方法实验课做。 海医肠杆菌科85（二）血清学检查肥达（Widal）反应 1.原理 人患3.结果判断必须结果临床、病期及地区而定（1）效价的地区性（2）注意病程（3）有关TH与TO变化的评价 出现速度 交叉反应或非特异性回忆反应 （4）注意区别非特异性回忆反应 海医肠杆菌科863.结果判断必须结果临床、病期及地区而定海医肠杆菌科86 本菌在自然界中分布很广，主要存在于饮水、污水中。在动物中存在于家畜、家禽、鼠、鸽、蛙、蜗牛和虾蟹排泄物中。在食品（乳、乳制品、蛋、肉、冰琪淋等）常检出。猪是带菌者。经苍蝇、蚤、蟑螂、蜚蠊带菌等媒介传播，为人兽共患病原菌之一。 (

40、三)致病性海医肠杆菌科87 本菌在自然界中分布很广，主要存在于饮水、污水中。 第四节 其 他菌属一、克雷伯菌属（Klebsiella） 肺炎克雷伯菌菌属(Kpneumonia) 产酸（催娩）克雷伯菌 (Koxytoca) 解尿氨酸克雷伯菌(Kornithinolytica)植生克雷伯菌(Kplanticola)土生克雷伯菌(Kterrigena)臭鼻克雷伯菌(Kozaenae)鼻硬结克雷伯菌(Krhinoscleromatis) 本属菌包括7个种海医肠杆菌科88 第四节 其 他菌属一、克雷伯本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为：1.G短杆菌，无芽胞，无鞭毛有荚膜2.营养要求不高普通培

41、养基即可生长3.生化反应较活泼（1）可发酵多种糖类 葡 乳 麦 甘 蔗 其他糖醇（阿拉伯、木、棉子、海藻、阿糖醇） + + + + +（2）触酶 氧化E 脂E H2S 明胶 硝酸盐 尿素 V-P ONPG 肌醇 + + + + + +4.均为周围环境及人呼吸道常居菌群，为条件致病菌 ，目前引起感染日益增多。其代表菌为肺炎克雷伯菌。 共同特征海医肠杆菌科89本属细菌符合肠杆菌科一般特征。其属的共同特征为： (一)生物学性状肺炎克雷伯菌1.形态与染色（1）G-卵圆或球杆菌，常成双排列（2）菌体外绕以宽厚的荚膜（3）无芽胞、无鞭毛、无动力、有菌毛（4）培养物菌体长，常呈多形性，有时可见丝状物海医肠杆

42、菌科90(一)生物学性状肺炎克雷伯菌海医肠杆菌科90海医肠杆菌科91海医肠杆菌科912.培养特点（1）需O2或兼性厌O2（2）对营养要求不高，普通培养基即可生长（3）在普通琼脂和血平板 灰白色、圆形、光亮较大凸起,粘液状，菌落易互相融合，用接种环挑易拉成丝状的较大菌落。（4）在肠道选择培养基上呈乳糖发酵产酸的菌落，与大肠埃希菌相似但色泽较淡，较为饱满而凸起。（5）液体培养基混浊生长、农厚，有菌膜，管底有粘液性沉淀。 35 24h 海医肠杆菌科922.培养特点35 海医肠杆菌科92海医肠杆菌科93海医肠杆菌科93（6）生化反应本菌IMVC+，其他，如丙二酸盐+（7）Ag构造 O、K两种Ag K-

43、Ag为分型依据（8）抵抗力不强 对一般消毒剂敏感对热敏感56-60即死对一般抗生素均敏感，但易产生抗药性海医肠杆菌科94（6）生化反应海医肠杆菌科94 (二)临床意义 本属细菌多感染重病老人及幼儿，死亡率很高。也是医院感染的常见菌。 海医肠杆菌科95 (二)临床意义 本属细菌多感染重病老人及幼儿，死二、变形杆菌属（Protens）普通变形杆菌（P.vulgaris）变形杆菌属 奇异变形杆菌（P.mirabili 产粘变形杆菌（P.myxofaciens） 潘纳变形杆菌（P.penneri） （一）生物学性状1.形态与染色（1）G-中小杆菌，菌端钝圆（2）无芽胞、无荚膜、周身鞭毛，运动活泼。（3

44、）具有明显的多形性，多呈球状或丝状，在活泼运动的培养物中多为较长而弯曲的杆菌。 海医肠杆菌科96二、变形杆菌属（Protens）普通变形杆菌（P.vulg海医肠杆菌科97海医肠杆菌科972.培养特点（1）需O2，或兼性厌O2。（2）营养要求不高，在普通或综合培养基上均可发育，但大部分需要菸草酸（3）有迁徒状生长现象（moving grow）。 （4）产粘变形杆菌能形成很粘的薄膜层，且能溶血。（5）在肠道选择性培养基上可形成圆、扁、无色半透明的乳糖不发酵菌落。在SSA上-产H2S的菌株菌落带黑心（6）液体培养基均匀混浊，液面有菌膜、管底有沉淀。海医肠杆菌科982.培养特点海医肠杆菌科98海医肠杆

45、菌科99海医肠杆菌科99海医肠杆菌科培训课件4.Ag构造与分型 Ag构造与分型 根据菌体（0）Ag分群根据鞭毛（H）分型每种变形杆菌都分许多血清型。产粘变形杆菌Ag结构尚未测定目前有100多个血清型海医肠杆菌科1014.Ag构造与分型 Ag构造与分型 每种变形杆菌都分许多血这里值的提出的是：在普通变形杆菌与奇异变形杆菌二类中还有些特殊的菌株OX19、OX2、OXK与某些立克次体有共同抗原成分，故可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病患者血清作凝集反应，以辅助诊断某些立克次体病，此称为外-斐（Weill-felix）反应.海医肠杆菌科102这里值的提出的是：海医肠杆菌科102 （二）致病性变形杆

46、菌属的细菌一般不致病，但在一定条件下有时也可致病，故称为条件致病菌。1.原发性感染通过尿路上行感染造成膀胱炎和肾盂肾炎。2.继发性感染例如手术时，变形杆菌跑到肠外，引起继发感染（如腹膜炎）。外伤（如烧伤），在伤口外引起继发感染，形成化脓病灶，当机体抵抗为有时可引起败血症。 3.食物中毒 海医肠杆菌科103 （二）致病性变形杆菌属的细菌一般不致病，但在三、摩根菌属 摩根菌属只有1个种摩氏摩根菌。近年又增加一个生物群。（一）形态与染色特征与变形杆菌属相似，但本属的某些菌株在30以上不形成鞭毛。（二）培养特点1.不形成迁徙生长 2.肠道选择培养基上形成乳糖不发酵菌落3.生化反应不活泼 4.Ag构造及分型以O-Ag分为42个血清群以H-Ag分为75