酵母细胞的固定化课件3

1、酵母细胞的固定化课件3酵母细胞的固定化课件3酵母细胞的固定化课件3知识回忆：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除顽渍。常用的酶制剂有_四类。2、影响酶活性的因素有_、_和_。3、影响洗衣粉洗涤效果的因素有 _ 。2021/1/122第一页，共54页。酵母细胞的固定化课件3酵母细胞的固定化课件3酵母细胞的固定化知识回忆：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除顽渍。常用的酶制剂有_四类。2、影响酶活性的因素有_、_和_。3、影响洗衣粉洗涤效果的因素有 _ 。2021/1/122第二页，共54页。知识回忆：1、洗衣粉中添加_，可以更有效地去除在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使

2、用有很多优点，你能举出一些例子吗？催化效率高、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺点吗？你能举出一些例子吗？2021/1/123第三页，共54页。在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使酶制剂存在的缺陷： 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，进步了消费本钱； 3、反响后会混在产物中，可能影响产品质量。2021/1/124第四页，共54页。酶制剂存在的缺陷： 2021/1/124第四页，共54页 假如你是工程技术人员，你如何解决这个问题？2021/1/125第五页，共54页。 假如你是工程技术人员，你如何解决这

3、个问题？202 阅读P49-50，并考虑：1、解决酶应用中存在问题的方法是？2、这种方法的优点是什么？3、什么是高果糖浆？使用它有何好处？4、消费高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？5、理解高果糖浆消费过程。一、固定化酶的应用实例2021/1/126第六页，共54页。 阅读P49-50，并考虑：一、固定化酶的应用实例20211、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术如固定在不溶于水的载体上。2、固定化酶技术的优点：1使酶既能与反响物接触，又能与产物别离；2固定在载体上的酶可以被反复利用。2021/1/127第七页，共54页。1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术如固定

4、在不溶3、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人的安康有利。你能写出果糖的分子式吗?它属于什么糖?2021/1/128第八页，共54页。3、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，4、消费高果糖浆需要葡萄糖异构酶；其作用是将葡萄糖转化为果糖；这种酶稳定性好，可持续发挥作用。2021/1/129第九页，共54页。2021/1/129第九页，共54页。5、固定化酶技术消费高果糖浆的图示：注意反响柱的各部分名称。你能说出反响柱的优点吗？2021/1/1210第十页，共54页。5、固定化酶技术消费高果糖浆的图

5、示：注意反响柱的各部分名称。消费流程含淀粉的浆液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖异构酶葡萄糖的异构化42%45%转化成果糖果葡糖浆果糖和葡萄糖分离葡萄糖再次异构化反复多次果糖含量70%90%高果糖浆2021/1/1211第十一页，共54页。消费流程含淀粉的浆液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖异构酶葡反响柱能连续使用半年，大大降低了消费本钱，进步果糖的产量和质量。优点：2021/1/1212第十二页，共54页。反响柱能连续使用半年，大大降低了消费本钱，进步果糖的产量和质练习：1、以下说法不正确的选项是 A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖B、从固定化酶反响柱下端流出的是果糖C、高果糖浆

6、不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中回收2021/1/1213第十三页，共54页。练习：1、以下说法不正确的选项是 2021/1/2、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的 A、温度 B、PHC、水分 D、营养2021/1/1214第十四页，共54页。2、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大3、目前，日用化工厂大量消费的酶制剂，其中的酶大都来自A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微

7、生物体内 2021/1/1215第十五页，共54页。3、目前，日用化工厂大量消费的酶制剂，其中的酶大都来自202 在消费实际中使用固定化酶技术有无缺乏?如有缺乏,怎么办?有。一种酶只能催化一种化学反响，而在消费实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反响才能进展，所以操作比较费事。可采用固定化细胞技术。2021/1/1216第十六页，共54页。 在消费实际中使用固定化酶技术有无缺乏?如有缺二、固定化细胞技术1、概念：利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所需要的代谢产物。阅读P50：考虑第二段的问题2021/1/1217第十七页

8、，共54页。二、固定化细胞技术1、概念：利用物理或化学方法将细胞固定在一将酶或细胞包埋在细微网格里将酶或细胞互相连接起来将酶或细胞吸附在载体外表上包埋法化学结合法吸附法2021/1/1218第十八页，共54页。将酶或细胞包埋在细微网格里将酶或细胞互相连接起来将酶方法原 理适用对象包埋法将聚合物的单体与酶溶液混合，再借助于聚合助进剂(包括交联剂)的作用进行聚合，酶被包埋在聚合物中以达到固定化酶或细胞2021/1/1219第十九页，共54页。方法原 理适用对象包埋法将聚合物的单体与酶溶液混合，再方法原 理适用对象化学结合法酶蛋白的侧链基团和载休表面上的功能基团之间形成共价键而固定的方法酶物理吸附法

9、通过氢键、疏水作用和电子亲和力等物理作用，将酶固定于水不溶载体上。从而制成固定化酶酶2021/1/1220第二十页，共54页。方法原 理适用对象化学结合法酶蛋白的侧链基团和载休表面酶和细胞固定方法的选择酶合适采用化学结合和物理吸附法固定细胞合适采用包埋法固定1、方法2、原因细胞个大，酶分子很小个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出2021/1/1221第二十一页，共54页。酶和细胞固定方法的选择酶合适采用化学结合和物理吸附法固定3、固定化细胞常用的载体常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 2021/1/1222第二十二页，共5

10、4页。3、固定化细胞常用的载体常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？明 假如反响底物是大分子物质，能否用固定化细胞技术? 为什么？ 那应该采用何种技术?2021/1/1223第二十三页，共54页。 假如反响底物是大分子物质，能否用固定化细胞技术?20练习：1.使用固定化细胞的优点是( )。A.能催化大分子物质的水解 C.与反响物易接近 2021/1/1224第二十四页，共54页。练习：2021/1/1224第二十四页，共54页。2.酶的固定方法不包括( )。A.将酶吸附在固体外表上 B将酶互相连接起来C将酶包埋在细微网格里 D将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉中的酶2021/1/1225第二十五页，

11、共54页。2.酶的固定方法不包括( )。2021/1/1225第二十3、假如反响物是大分子物质，采用那种方法催化受限制( )。A直接使用酶 B使用化学方法结合的酶C使用固定化细胞 D使用物理吸附法固定的酶2021/1/1226第二十六页，共54页。3、假如反响物是大分子物质，采用那种方法催化受限制( 4、以下关于酶和细胞的固定表达不正确的选项是( )。A 酶分子很小，易采用包埋法 B酶分子很小，易采用化学结合或物理吸附法固定的酶C细胞个大，难被吸附或结合 D细胞易采用包埋法固定2021/1/1227第二十七页，共54页。4、以下关于酶和细胞的固定表达不正确的选项是( )。2025. 关于固定化

12、酶的表达不正确的选项是 ( )。A 既能与反响物接触，又能与反响物别离 B固定在载体上的酶可被反复利用C可催化一系列反响 D酶的活性和稳定性受到限制2021/1/1228第二十八页，共54页。5. 关于固定化酶的表达不正确的选项是 ( )。2021/6、固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是( )。A防止了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B固定化细胞在多种酶促反响中连续发挥作用C促化反响完毕后，能被吸收和重复利用D细胞构造保证了各种酶在细胞内化学反响中有效的发挥作用2021/1/1229第二十九页，共54页。6、固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是( )。202三、实验操作一制备固定化酵母细

13、胞阅读P5051考虑以下问题：1制备过程包括哪几个步骤？2你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？3各步骤应当分别注意什么问题？2021/1/1230第三十页，共54页。三、实验操作一制备固定化酵母细胞阅读P5051考虑以下1、酵母细胞的活化考虑： 关于酵母菌你有哪些知识？ 什么是活化？ 怎样活化？ 应注意什么？2021/1/1231第三十一页，共54页。1、酵母细胞的活化考虑：2021/1/1231第三十一页，共2021/1/1232第三十二页，共54页。2021/1/1232第三十二页，共54页。活化： 让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；本质： 加快新陈代谢；方法： 参加适量的水。

14、 你能说出理由吗？2021/1/1233第三十三页，共54页。活化：2021/1/1233第三十三页，共54页。取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，参加蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右使其活化2021/1/1234第三十四页，共54页。取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，参加蒸馏水10ml，用考虑： 你认为酵母的活化操作有哪些本卷须知？1、所用容器要大一些；2、要保证酵母菌的活性；3、物种要单一；4、注意水的用量。2021/1/1235第三十五页，共54页。考虑：2021/1/1235第三十五页，共54页。2溶液称取无水Cacl2 0.83g。放入20

15、0mL的烧杯中，参加150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。2021/1/1236第三十六页，共54页。2溶液称取无水Cacl2 0.83g。放入200mL的烧杯中3、配制海藻酸钠溶液2021/1/1237第三十七页，共54页。3、配制海藻酸钠溶液2021/1/1237第三十七页，共54操作： 称取0.7g海藻酸钠，放入50mL小烧杯中.加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL。注意，加热时要用小火，或者连续加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止2021/1/1238第三十八页，共54页。操作：2021/1/1238第三十八页，共54页

16、。 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，一定要按照教材的提示进展操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。假如海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；假如浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。应当注意什么问题？2021/1/1239第三十九页，共54页。 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，参加已活化的醉母细胞，进展充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。为什么海藻酸钠溶液要冷却？2021/1/1240第四十页，共54页。4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液

17、2021/1/1241第四十一页，共54页。2021/1/1241第四十一页，共54页。5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的Cacl2溶液中，观察液滴在Cacl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30 min左右。 你知道还有什么地方可以用到氯化钙？2021/1/1242第四十二页，共54页。5、固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液2021/1/1243第四十三页，共54页。2021/1/1243第四十三页，共54页。 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的构造。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用以

18、下方法： 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，假如凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就说明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，假如凝胶珠很容易弹起，也能说明制备的凝胶珠是成功的。2021/1/1244第四十四页，共54页。 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察凝胶珠的颜色和形状:假如制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，那么说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。2021/1/1245第四十五页，共54页。这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察凝

19、胶珠的颜色和形状:202二用固定化细胞发酵1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中，再参加固定好的酵母细胞，置于25下发酵24h。2021/1/1246第四十六页，共54页。二用固定化细胞发酵1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏2021/1/1247第四十七页，共54页。2021/1/1247第四十七页，共54页。这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察发酵的葡萄糖溶液；利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。还有其他方法吗？2021/1/1248第四十八页，共54页。这一阶段成功与否呢？怎样评价？观察发酵的葡萄糖溶液；2021请考虑课后练习 P522021/1/1249第四十九页，共54页。请考虑课后练习2021/1/1249第四十九页，共54页。类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。对