肝纤维化的研究进展课件

1、肝纤维化的研究进展肝纤维化的研究进展肝纤维化的研究进展肝纤维化的研究进展肝纤维化的研究进展肝纤维化的研究进展General principles肝纤维化Hepatic Fibrosis肝组织内细胞外基质（extracellular matrix,ECM）因合成增加、降解相对不足而在肝内异常沉积所导致肝脏结构和（或）功能发生异常改变的一种病理变化。以ECM在肝脏内沉积为特征是几乎所有原因所导致的慢性肝脏损伤的一种“创伤愈合”的慢性渐进的病理过程。General principles肝纤维化Hepatic肝纤维化的研究进展课件急性肝损伤炎症反应有限的ECM沉积肝实质细胞再生取代坏死或凋亡的细胞慢性

2、肝病持续或反复的炎症坏死ECM大量增生降解活性相对或绝对不足肝纤维化形成肝小叶结构改建、假小叶和结节形成肝硬化急性肝损伤炎症反应有限的ECM沉积肝实质细胞再生慢持ECM大肝纤维化的研究进展课件肝纤维化是可逆的“谁将阻止或延缓肝纤维化的发生，谁就将治愈大多数慢性肝病！” 世界著名肝病权威Hans Popper教授肝纤维化是可逆的“谁将阻止或延缓肝纤维化的发生，谁就将治愈大肝纤维化的研究进展课件肝星状细胞（HSC）的活化上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)细胞外基质（ECM）的合成与降解失衡相关的细胞因子及信号传导通路Cellular

3、and molecular mechanisms肝纤维化发生的基本机制肝星状细胞（HSC）的活化Cellular and moleHSC的活化HSC的活化HSCScott L.friedman,Hepatic Stellate Cells:Protean,Multifunctional,and Enigmatic Cells of the Liver.Physial Rev88:125-172,2008.HSCScott L.friedman,Hepatic St肝纤维化的研究进展课件 HSC活化MFBECM生成过量型胶原沉积形成纤维间隔肝小叶结构破坏型胶原酶大量合成释放肝窦功能性基底膜的结构

4、破坏肝窦毛细血管化肝纤维化 HSC活化MFBECM生成过量型胶原沉积Olav A Gressner et al,Evolving concepts of liver fibrogensis provide new diagnostic and therapeutic options,Comparative Hepatology 2007,6:7Olav A Gressner et al,EvolvingMFB是一种多起源的异质性细胞,呈梭形,特征介于成纤维细胞和平滑肌细胞之间表达平滑肌肌动蛋白(-SMA),其胞质内有大量平行的肌丝而具有收缩和迁移的能力是组织纤维化过程中产生过量ECM的主要来源

5、细胞 肌成纤维细胞（MFB）MFB是一种多起源的异质性细胞,呈梭形,特征介于成纤维细胞和上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)上皮-间充质细胞转化(epithelial-mesenchy肝纤维化的研究进展课件 纤维增生 ECM合成增加 “净效应” 动态过程 纤维分解 ECM的降解 ECM的变化肝纤维化的发生、发展和转归ECM的变化肝纤维化的发生、发展和转归肝纤维化的研究进展课件参与肝纤维化的关键细胞因子及其信号传导途径候选基因 2003年Bataller等肝纤维化动物模型促进肝纤维化者:瘦素及其受体、Smad3、TIMP -1、IGF

6、 - 1、Fas。抑制作用者:纤溶酶原、端粒酶、IFN、IL - 10、诱导性NO合酶。作用不确定或未知者: TNF、IL - 6、IL - 13。参与肝纤维化的关键细胞因子及其信号传导途径候选基因 20候选基因 人类肝纤维化促肝纤维化形成的基因IL - 10、IL - 1、IL - 1受体、TNF -、MnSOD、免疫应答相关因子(CTL - 4、TADP2 ) 、CD14 (脂多糖受体)酒精性肝病TGF -1、血管紧张素源、TNF -、微粒体环氧化物水解酶,血色素沉着病基因、ApoE丙型肝炎肝纤维化、型胶原、IGFBP - 7、Lumican、MMP - 7,SPARC胆道闭锁性(BA)肝

7、病抑制肝纤维化形成的基因Cingulin 和MMP - 2 胆道闭锁性(BA)肝病候选基因 人类肝纤维化促肝纤维化形成的基因宿主遗传因素影响肝纤维化发生单核苷酸基因多态性（SNP）对肝纤维化的影响：干扰素信号转导通路上的 基因多态性影响干扰素应答效果Th1及Th2类细胞因子基因多态性影响机体对病毒清除的免疫反应Toll样受体-4、DDX5、TGF-1、TIMP-1、MMP等参与纤维化发生的重要因子，其基因多态性可能影响纤维化反应多个SNP标志物可建立纤维化危险积分，可用于慢性丙型肝炎患者肝硬化发生危险的预测宿主遗传因素影响肝纤维化发生单核苷酸基因多态性（SNP）对肝参与肝纤维化的信号转导通路T

8、GF-Smad信号通路Rho-ROCK信号通路 PI-3K信号通路ERK/MAPK信号通路：Ras/ERK信号通路 JAK/sTAT信号通路Wnt信号通路NF-B信号通路参与肝纤维化的信号转导通路TGF-Smad信号通路TGF/BMP信号传导通路与其它信号通路的Cross-talkXing Guo,Xiao-Fan Wang,Signaling cross-talk between TGF/BMP and other pathways,Cell Research(2009)19:71-88TGF/BMP信号传导通路与其它信号通路的Cross-ta小结小结肝纤维化的治疗控制原发病因、治疗原发疾病

9、阻断HSC活化抑制减少HSC增殖、分化促进HSC凋亡促进疤痕纤维的降解中医药治疗肝纤维化肝纤维化的治疗控制原发病因、治疗原发疾病针对病因治疗针对病因治疗阻断HSC活化 减轻炎症损伤阻断HSC活化 减轻炎症损伤J.Poniachil et al,:J.Lzb.Clin,Med.1999;133:342-8050100150200250012345678甲基-3H-胸腺嘧啶(DOM/ng DNA,means+SEDLPC = 双亚油酰磷脂酰胆碱 17 mM 酒精 M DLPC* + 17 mM 酒精 易善复抑制肝星形细胞的增殖28J.Poniachil et al,:J.Lzb.Clin,肝硬化间

10、隔纤维化静脉周围纤维化脂肪正常+01234567年Lieber, C.S. et al.: Gastroenterology 1994; 106: 152-9酒精+正常饮食喂养7年的狒狒中酒精性肝损伤的发展过程29肝硬化间隔静脉周围脂肪正常+0123456701234567肝硬化间隔纤维化静脉周围纤维化脂肪正常+年酒精+易善复 饮食喂养的狒狒中酒精性肝损伤的发展过程Lieber, C.S. et al.: Gastroenterology 1994; 106: 152-93001234567肝硬化间隔静脉周围脂肪正常+我们曾经所做的工作（1）和加拿大美尼托巴大学的各位同仁应用大鼠HSC研究了S

11、mad1基因的表达和调控情况，发现Smad1的表达和磷酸化是通过BMP受体调控的，并在HSC活化时增加。并且TGF呈时间和剂量依赖性的显著的抑制了HSC中Smad1的表达。此外虽然TGF1和BMP2都可以激活HSC，却对HSC的增殖影响的效应却不一样。我们曾经所做的工作（1）和加拿大美尼托巴大学的各位同仁应用大Hong Shen,Yongping Chen,Yuewen Gong etcal, Transforming growth factor-1 downregulation of Smad1 gene expression in rat hepatic stellate cells, A

12、m J Physiol Gastrointest Liver Physiol 285:539-546,2003Hong Shen,Yongping Chen,Yuewen我们曾经所做的工作（2）成功构建将TGF1抗原表位基因与HBcAg编码基因融合，并经原核表达，制备成融合蛋白的重组疫苗。经动物实验证明可诱导肝纤维化大鼠产生抗TGF1抗体，TGF1mRNA表达水平明显下降，TIMP-2的表达显著下降，肝组织纤维化分级明显改善。我们曾经所做的工作（2）成功构建将TGF1抗原表位基因与H陈永平，巩跃文等，转化生长因子1与乙型肝炎病毒核心抗原融合基因的表达和鉴定，Chin J Infect Dis,

13、October 2005,Vol 23,No 5陈永平，巩跃文等，转化生长因子1与乙型肝炎病毒核心抗原融合卢明芹、陈永平等，转化生长因子1疫苗对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2表达的影响，Chin J Hepatol,September 2006,Vol 14,NO.9卢明芹、陈永平等，转化生长因子1疫苗对肝纤维化大鼠基质金属我们正在做的工作（1）CD4+CD25+调节性T细胞在肝纤维 化免疫发病机制中的作用的研究（2）BMP7在肝纤维化中的作用的研究我们正在做的工作（1）CD4+CD25+调节性T细胞在肝纤维abcabAB HSC与CD4+CD25+Treg 共

14、培养(a) 96孔板直接接触性共培养 A：HSC B ：CD4+CD25+treg(b)Transwell培养小室非直接接触性共培养，生长在膜上的HSC(c)Transwell培养小室非直接接触性共培养，培养在膜下层的 CD4+CD25+tregABabcabAB UNPUBLISED DATECCK-8法测定不同比例CD4+CD25+Treg与HSC混合之HSC生长增殖曲线 肝纤维化的研究进展课件肝纤维化的研究进展课件-400bp -500bpBMP7417bpactin-452bp- 500bp- 400bpBMP7mRNA在大鼠肝纤维化模型中的动态变化1234567M-400bp -500bpBMP7417bpactin注：模型组各时间点与对照组比较：a P0.05图 对照组与模型组各时间点BMP7 mRNA水平变化abbbaa注：模型组各时间点与对照组比较：a P0.05， b 肝纤维化是机体对慢性损伤的主动性修复反应，以肝脏ECM增生与沉积为特征；只有慢性损伤才引起肝纤维化；尽管肝纤维化的病因不同，但其病理特点基本一致；HS