医学遗传学线粒体遗传病

1、关于医学遗传学线粒体遗传病第1页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四本章重点1掌握线粒体疾病、异质性、阈值效应、母系遗传、遗传 瓶颈等概念。2掌握线粒体DNA的结构与遗传特点。3熟悉线粒体基因组与核基因组的关系。4熟悉几种常见的人类线粒体疾病。5. 了解线粒体DNA的复制、转录特点。第2页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四power plant 第3页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四1894年，德国Altmann首次发现线粒体，并命名为bioblast 第4页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四1897年，Benda

2、正式命名为mitochondrion(线粒体)第5页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四1963年，Nass在鸡胚中发现线粒体中存在DNA Schatz分离到完整的线粒体DNA1981年，剑桥大学Anderson小组测定人mtDNA1987年，Wallace提出mtDNA突变可引起疾病的完整DNA序列，称为“剑桥序列”。第6页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四第一节 线粒体DNA的结构特点与遗传特征线粒体基因组线粒体是细胞质中独立的细胞器，也是动物细胞核外唯一的含有DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)的细胞器。第7页，共65页，2022

3、年，5月20日，6点40分，星期四25号染色体第8页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四每个正常人的细胞内约有几百到几千个线粒体每个线粒体内约有210 mtDNA拷贝第9页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四人mtDNA是一个长为16,569 bp的双链闭合环状分子，外环含G较多，称重链(H链)，内环含C较多，称轻链(L链)。一、线粒体DNA的结构特点第10页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四mtDNA结构紧凑，没有内含子，唯一的非编码区是D环区，长1,122 bp左右。D环区包括mtDNA重链复制起始点，重轻链转录的启动子。第11页，共

4、65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四线粒体的H链是12种多肽链、12S rRNA、16S rRNA和14种tRNA的转录模板，L链是1种多肽链和8种tRNA转录的模板。人类的mtDNA编码13条多肽链、22种tRNA和2种rRNA。13种蛋白质均是呼吸链酶复合物的亚单位。第12页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 mtDNA与nDNA不同 1.其分子上无核苷酸结合蛋白，缺少组蛋白的保护; 2.线粒体内无DNA损伤修复系统，mtDNA易发生突变并容易得到保存; 3.每个线粒体内含有210个拷贝的mtDNA分子; 4.每个细胞可具有数千个mtDNA分子 。第13页

5、，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四D环复制（取代环复制）：不对称复制。特点：两条链的复制起点不在同一点上，一条链先复制，另一条链保持单链而被取代；当一条链复制到一定程度时才暴露出另一条链的复制起点，另一条链才开始复制。线粒体DNA的复制第14页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四复制方式为半保留复制，由线粒体的 DNA聚合酶完成。 H链复制起始点(OH)与L链复制起始点(OL)相隔2/3个mtDNA。第15页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四线粒体基因的转录特点：1. 两条链均有编码功能2. 两条链从D-环区的启动子处同时开始以相同的速

6、率转录，L链按顺时针方向转录，H链按逆时针方向转录3. mtDNA的基因之间无终止子4. tRNA基因通常位于mRNA基因和rRNA基因之间5. mtDNA的遗传密码与nDNA不完全相同6. 线粒体中的tRNA兼用性较强，1个tRNA可以识别几个简并密码子第16页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 二、线粒体DNA的遗传学特征mtDNA半自主性 mtDNA遗传密码与通用密码不完全相同 mtDNA为母系遗传 mtDNA在有丝分裂和减数分裂期间都要经过复制分离 mtDNA具有阈值效应的特征 mtDNA的突变率很高 第17页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（

7、一）mtDNA具有半自主性 线粒体是一种半自主细胞器，受线粒体基因组和核基因组两套遗传系统共同控制 。第18页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 mtDNA编码13种蛋白质，绝大部分蛋白质亚基和其他维持线粒体结构和功能的蛋白质都依赖于nDNA编码，在细胞质中合成后，经特定转运方式进入线粒体 。 mtDNA基因的表达受nDNA的制约，线粒体氧化磷酸酶化系统的组装和维护需要nDNA和mtDNA的协调，二者共同作用参与机体代谢调节。ComplexSubunitsNuclearmtDNA41347440111011310314122837013第19页，共65页，2022年，5月2

8、0日，6点40分，星期四（二）线粒体基因组所用的遗传密码和通用密码不完全等同UGA不是终止信号，而是色氨酸的密码 多肽内部的甲硫氨酸由AUG和AUA两个密码子编码，起始甲硫氨酸由AUG，AUA，AUU和AUC四个密码子编码 AGA，AGG不是精氨酸的密码子，而是终止密码子，线粒体密码系统中有4个终止密码子（UAA，UAG，AGA，AGG）第20页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（三）mtDNA为母系遗传 母亲将她的mtDNA传递给儿子和女儿，但只有女儿能将其mtDNA传递给下一代。第21页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四mtDNA的母系遗传第22页，

9、共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 人的细胞里通常有上千个mtDNA拷贝，在突变体和正常mtDNA共存的细胞中，mtDNA在细胞的复制和分离过程中发生遗传漂变，可导致子细胞出现三种基因型：纯合的突变体mtDNA、纯合的正常mtDNA、突变体和正常的mtDNA的杂合体。（四）mtDNA在有丝分裂和减数分裂期间都要经过复制分离第23页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 异质性(heteroplasmy):由于mtDNA突变率极高，使得一个细胞内同时存在突变型和野生型mtDNA，也叫杂质性。 同质性(homoplasmy):同一组织或细胞中的mtDNA分子都是一

10、致的，也称做纯质性。 机制：杂质性细胞经过有丝分裂和减数分裂，随机分离到两个子细胞中的突变型和野生型mtDNA的比例发生改变，分别向纯合突变型和纯合野生型漂变，经过无数次分裂后，细胞达到纯合型。第24页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四复制分离：随机分配导致mtDNA异质性变化的过程。第25页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四遗传瓶颈效应：10万2200第26页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四能引起特定组织器官功能障碍的突变mtDNA的最少数量称阈值。线粒体病发病有一阈值，只有当异常mtDNA超过阈值时才发病。不同的组织器官对能量的

11、依赖程度不同，脑、骨骼肌、心脏、胰腺、肾脏、肝脏对能量的依赖性依次降低。 ATP产生越少，病症涉及的器官越多，症状越严重。最先受损的是中枢神经系统，其后为骨骼肌、心脏、胰腺、肾脏和肝脏。（五）mtDNA具有阈值效应的特性第27页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（六）mtDNA的突变率极高 原因： mtDNA中基因排列紧凑，任何突变都可能会影响到其基因组 内的某一重要功能区域。 mtDNA是裸露的分子，不与组蛋白结合。 mtDNA位于线粒体内膜附近，直接暴露于呼吸链代谢产生的超氧离子和电子传递产生的羟自由基中，极易受氧化损伤。 mtDNA复制频率较高，复制时不对称,缺乏有效

12、的DNA损伤修复能力。 第28页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四第二节 mtDNA突变与人类疾病1987年发现第一个mtDNA突变以来，现已发现100多个与疾病相关的点突变、200多种缺失和重排。mtDNA突变类型主要包括点突变、片段缺失插入和mtDNA拷贝数目减少。第29页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四一、线粒体遗传病的突变类型 1.碱基突变错义突变: 也称氨基酸替换突变，主要与脑脊髓性及神经性疾病有关，常见有Leber遗传性视神经病和神经肌病。蛋白质生物合成基因突变: 比错义突变的疾病表型更具有系统性特征，且所有生物合成基因突变都为tRNA突变

13、，并与线粒体肌病相关。主要有MERRF综合征。第30页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四2.缺失、插入突变 mtDNA缺失突变引起绝大多数眼肌病，这种缺失导致的疾病一般无家族史。3.mtDNA拷贝数目突变 与核基因突变有关。第31页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四线粒体病（mitochondrial disease, MD）: 以线粒体结构或功能异常为主要病因的一大类疾病。细胞病变或损伤最敏感的指标之一，是分子细胞病理学检查的重要依据。特点： 1.MD多数由于线粒体DNA改变而引起。 2.MD具有母系遗传的特点。 3.MD多为神经、肌肉系统疾病。二、人

14、类线粒体遗传病 第32页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四细胞损伤中的液泡状线粒体缺氧导致的肾小管上皮细胞损伤第33页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四线粒体病涉及组织第34页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四病因：mtDNA发生突变（片段缺失或点突变） 无法编码M在氧化代谢过程中必须的酶/载体 糖原/脂肪酸（底物）不能进入M或不能被充分利用 ATP产生不足 细胞功能减退甚至坏死第35页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四mtDNA突变引起的疾病 中枢神经系统和骨骼肌对能量的依赖性最强，故临床症状以中枢神经系统和骨骼

15、肌病变为特征.线粒体脑病: 病变以中枢神经系统为主；线粒体肌病: 病变以骨骼肌为主；线粒体脑肌病: 病变同时侵犯中枢神经系统和骨骼肌。 第36页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（一）Leber遗传性视神经病（OMIM # 535000）Leber遗传性视神经病是以德国眼科医生Theodor Leber的名字命名的，又称Leber视神经萎缩，为一种急性或亚急性发作的母系遗传病，男女病人比例5:1，至今尚未发现一个男性患者将此病传给后代。Leber T 医生第37页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四视神经与视网膜神经元退化，发病较早，表现急性亚急性视力减退

16、，中心视野丧失明显，导致失明。患者正常者第38页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四11778GA导致编码NADH脱氢酶亚单位4(ND4)中第340位的Arg精His组，改变ND4空间构型，NADH脱氢酶活性降低，线粒体产能效率下降，视神经细胞提供能量不能长期维持视神经完整结构，导致神经细胞退行性变、死亡。Leber遗传性视神经病(LHON)11778 GA公认的致病性最强的三种原发性突变11778GA 90. 9%3460GA 1. 8% 14484TC 7. 3% 第39页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四其它致病基因位点突变第40页，共65页，202

17、2年，5月20日，6点40分，星期四Leber遗传性视神经病家系第41页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四山东的赵氏家系26位母系亲属中有21人因LHON失明,其中3人自杀42第42页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四以发育迟缓，近端肢体肌无力，痴呆，抽搐，视网膜色素变性和感觉功能减退为特点。（二）神经病伴运动性共济失调和视网膜色素变性（ NARP ）mtDNA结构16569 bpNARP8993TG在线粒体ATPase6基因的第8993位点发生T至G的颠换，使ATPase第6亚单位的第156位上亮氨酸精氨酸，从而影响ATP合酶的质子通道。第43页，共6

18、5页，2022年，5月20日，6点40分，星期四如果8993位置突变的异质性超过90%时，通常会发生一种致命的、发生在婴儿期的疾病，称Leigh综合征（Leigh syndrome，LS，OMIM # 256000）。主要病理学特征是基底神经节和脑干部位神经元细胞的退化 。Leigh综合征患者第44页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（三）癫痫伴碎红纤维病 （MERRF综合征）多系统紊乱，肌阵挛性癫痫，共济失调，轻度痴呆，耳聋，脊髓退化。大量团块状线粒体聚集于肌细胞中（可被特异性染料染成红色，破碎红纤维）。大脑卵圆核与齿状核有神经元的缺失。MERRF综合征患者第45页，共6

19、5页，2022年，5月20日，6点40分，星期四MTTK*MERRF 8344A GmtDNA结构16569 bp病因：第46页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（四）线粒体脑肌病伴乳酸血症和卒中样发作 （ MELAS综合征）1020岁发病，40岁以前开始出现的复发性休克、肌病、共济失调、肌阵挛、痴呆和耳聋。少数患者出现反复呕吐、周期性的偏头痛、糖尿病。进行性眼外肌无力或麻痹使眼的水平运动受限，眼外肌麻痹，眼睑下垂。肌无力，身材矮小等。在MELAS患者中，异常的线粒体不能够代谢丙酮酸，导致大量丙酮酸生成乳酸，而后者在血液和其他体液中累积。MELAS患者的特征性病理变化就是在

20、脑和肌肉的小动脉和毛细血管管壁中有大量的形态异常的聚集的线粒体。第47页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四MELAS患者脑部病变mtDNA结构16569 bpMTTL1*MELAS3243G超过80%的突变率发生在tRNA leu(UUR)基因上的A3243G突变第48页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四链霉素、庆大霉素、妥布霉素、新霉素、巴龙霉素等氨基糖甙类药物进入耳蜗和前庭毛细胞的线粒体并蓄积，抑制线粒体蛋白质的合成并抑制耳蜗和前庭细胞氧化磷酸化，造成线粒体和细胞受损，启动细胞调亡，最终造成患者听力下降。 A1555G突变线粒体 12S rRNA（五

21、）链霉素耳毒性耳聋（OMIM # 580000）第49页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 mtDNA结构16569 bpDEAF1555位点AG 7445位点TG第50页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四氨基糖甙类抗生素耳神经毒性第51页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四（六） KSS综合征（慢性进行性外部眼肌麻痹，CPEO) 常见临床表现：是进行性眼外肌麻痹（CPEO)和视网膜色素变性。还包括心肌电传导异常，共济失调，耳聋，痴呆和糖尿病。发病年龄一般低于20岁，大多数患者在确诊后几年内死亡。 CPEO患者眼外肌慢性进行性瘫痪 病因

22、：KSS患者的线粒体分析表明有mtDNA结构的改变，包括大片段缺失(1000bp)和DNA复制。第52页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四第53页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四mtDNA结构16569 bp第8648位 第13460位 第54页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四(七) 帕金森病（Parkinson disease，PD）又称震颤麻痹，特征是震颤、强直、运动减少；是一种中枢神经系统变性疾病。由于环境和/或遗传所导致的线粒体功能受损及-突触核蛋白异常聚集所致。 位于中脑部位黑质的细胞发生退化，患者黑质mtDNA中存在4977bp长的一段DNA缺失，导致多种组织细胞内的线粒体复合体、存在功能缺陷，引起神经元中能量代谢障碍。第55页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四 巴金和陈景润都是帕金森病患者帕金森病患者脑和脊髓发生神经元退性变性,丢失。第56页，共65页，2022年，5月20日，6点40分，星期四线粒体功能随着年龄的增加而退化衰老过程中，抗氧化防御系统作用减弱，线粒体内自由基不能有效地清除而累积，导致线粒体损伤缺失累积多种器官组织，使OXPHOS组分缺损或数量减少，致使细胞死亡，引起衰老和