高效液相色谱法测定荜茇止痛酊中胡椒碱的含量

1、高效液相色谱法测定荜茇止痛酊中胡椒碱的含量【摘要】目的创立荜茇止痛酊中胡椒碱的含量测定要领。要领接纳高效液相色谱法,18色谱柱,四氢呋喃-甲醇-水(vvv303050)为活动相,流速为1.0l/in,柱温为室温,检测波长为343n,进样10l,以外标法盘算含量。结果胡椒碱在8.341.5g/l内峰面积与比拟品格量浓度呈精良线性干系,其回归方程为：a34131867467.7,r0.9998；其均匀接纳率为99.7%,rsd1.8%(n6)。结论该要领轻便,重复性好,空缺无滋扰,可有用地操纵荜茇止痛酊制剂的质量。【关键词】荜茇止痛酊；胡椒碱；高效液相色谱法keyrds：bibazhitngtin

2、ture；piperine；hpl荜茇止痛酊由荜茇、细辛和花椒等6味中药构成,具有祛风散寒止痛的成果,临床用于治疗风寒牙痛。本制剂消费接纳提取挥发油,水煮醇沉等工艺加工制成。荜茇为方中君药,其重要有用身分为胡椒碱,2022版?中华人民共和国药典?(一部)接纳内标法测定荜茇中胡椒碱的含量1,文献报道胡椒碱的含量测定要拥有高效液相色谱法2-4。本试验接纳革新四氢呋喃-甲醇-水体系为活动相,外标法测定胡椒碱的含量,较实用于本中药复方制剂庞大身分的分散,有用操纵荜茇止痛酊的质量。1仪器与试药高效液相色谱仪(日本岛津)l-6a,包罗：spd-6av检测器,-r4a数据处置惩罚机。胡椒碱(批号0775-9

3、702,由中国药品生物成品检定所提供,纯度为98.79%)；荜茇止痛酊(批号041212、041216、041220,无锡山禾药业股份消费)。甲醇、乙腈为色谱醇,无水乙醇为阐发醇,水为熏蒸水。2要领与结果2.1色谱条件色谱柱：18柱(4.6250,10),大连依科特科学仪器；活动相：四氢呋喃-甲醇-水(vvv303050)；流速：1.0l/in；检测波长：343n；柱温：室温；分散度：r1.5；理论板数按胡椒碱峰盘算应大于1500。2.2检测波长的选择对胡椒碱的乙醇溶液举行紫外区扫描,结果胡椒碱在343n处有最大汲取,应选用343n作为检测波长。2.3活动相的选择曾试验4种活动相：甲醇-水(7

4、723)；乙腈-水(7030)；乙腈-0.05l/l磷酸二氢钠溶液(7030),用磷酸调治ph为3.5、3.1；四氢呋喃-甲醇-水(303050),此中使胡椒碱峰与杂质峰分散结果好,能基线分散。2.4溶液的制备比拟品溶液的制备：细密称取胡椒碱比拟品10g,置50l棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀。细密量取5l,置50l棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,即得(每1l中含胡椒碱20g)。供试品溶液的制备：细密量取荜茇止痛酊1l,置25l棕色量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,于冰箱中冷藏1.5h,取出,安排至室温,滤过,取续滤液5l,置25l棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,即得。阴性比拟液

5、的制备：按处方中药味的比例自配不含荜茇的群药,按其工艺制成阴性制剂,再按供试品溶液制备要领制成空缺溶液,即得。2.5阴性液滋扰试验细密汲取供试品溶液、阴性液和比拟品溶液各10l注入色谱仪中,由色谱图可知,在与比拟品色谱峰保存时间相应的位置上,供试品溶液具有雷同保存时间的色谱峰出现；而阴性液在此峰位无汲取,对本品中胡椒碱的含量测定无滋扰,色谱图见图1。2.6线性干系的观察细密汲取胡椒碱比拟品(10.38g50l)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0l,别离置25l棕色量瓶中,加乙醇稀释至刻度,摇匀,别离细密汲取10l,注入高效液相色谱仪,记载峰面积。以比拟品的含量对峰面积值作图,得到一个通过原

6、点的直线,并绘制尺度曲线。结果表白,胡椒碱在8.341.5g/l范畴内峰面积与比拟品格量浓度呈精良线性干系,其回归方程为：a34131867467.7,r0.9998。2.7细密度试验细密汲取同一供试品溶液(批号041212),重复进样5次,求得rsd0.93%。2.8不变性试验细密汲取同一供试品溶液(批号041212),别离于配制后0、2、4、8、16、24h测定色谱峰面积,盘算rsd为1.2%,结果表白,其在24h内根本不变。2.9接纳率试验细密汲取含量的同一批号(批号041212)样品0.5l,别离细密参加胡椒碱比拟品乙醇溶液,依法测定,结果均匀接纳率为99.97%,rsd1.8%(n6

7、)。见表1。表1加样接纳率试验结果略2.10样品中胡椒碱含量测定取3批荜茇止痛酊样品,照“2.4项测定,结果见表2。表2样品含量测定结果(略)3讨论本实行接纳高效液相色谱法内标法和外标法2种要领举行荜茇药材中胡椒碱含量的比拟试验,结果表现,2种要领测定结果根本雷同。2022年版?中华人民共和国药典?接纳内标法测定含量,结果正确,但鉴于中药复方制剂身分庞大,接纳内标法时分散度难以满意要求,因此,本实行研究接纳外标法更为现实、可行。由于荜茇止痛酊所含身分庞大,给含量测定带来必然的困难。我们在样品前处置惩罚接纳无水乙醇稀释、冰箱中静置撤除杂质的要领,使样品得到净化,可满意含量测定的要求,且重现性好。【参考文献】1国度药典委员会.中华人民共和国药典(一部)s.北京：化学产业出书社,2022.163.2陶淑娟,王桂燕,毕开顺.hpl法测定蒙药那如-3丸中胡椒碱的含量j.沈阳药科大学学报,2022,