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文档简介

1、实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数目的要求:1.掌握改良牛鲍计数板的结构和使用方法2.掌握手工显微镜红细胞计数的方法。1实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数目的要求:1(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 临指导P7 1. 改良牛鲍氏计数板的结构(见图)2(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 临指导P7233442. 改良牛鲍氏计数板的使用方法1)准备计数板:用绸布擦拭,“推压”法加盖玻片2)稀释的血液:准确吸取稀释液和血液,立即混匀。3)充池:充池前充分混匀稀释液,充池要一次性完成,充液不能过多、过少、有气泡、断续充液、充池后移动盖玻片。4)静置2-3min,待细胞下沉。 52.

2、改良牛鲍氏计数板的使用方法55)显微镜计数:小心移动;手和显微镜镜头不能 碰到盖玻片。6)计数原则:逐格计数; 按一定方向进行计数; 对压线细胞遵循“数上不数下,数 左不数右”的原则。(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 65)显微镜计数:小心移动;手和显微镜镜头不能(一)改良牛鲍氏771.保证所用器材清洁,勿用手触膜。2. )充池:充池前充分混匀稀释液,一次性完成,充液不能过多、过少、有气泡、断续充液。3.充池后移动盖玻片。4.计数池使用后用蒸馏水冲,纱布轻试,切不可用粗糙织物擦试,以免磨损刻度。3.改良牛鲍氏计数板使用注意事项81.保证所用器材清洁,勿用手触膜。3.改良牛鲍氏计数板使用注

3、 (二) 红细胞计数P141原理 用红细胞等渗稀释液(2.0ml)将血液(10l)稀释一定倍数,滴入计数池,于高倍镜下计数一定范围内的红细胞数,再换算成每升血液中的红细胞数。9 (二) 红细胞计数P141原理92.红细胞稀释液(1)Hayem(赫姆氏液)即传统的红细胞稀释液 成分及作用: 氯化钠:调节渗透压至等渗 硫酸钠:提高比密,防止细胞粘连 氯化高汞:防腐剂 缺点:遇高球蛋白血症患者,球蛋白沉淀使红细胞 容易凝结。(二)红细胞计数102.红细胞稀释液(二)红细胞计数10(二)红细胞计数-2.红细胞稀释液(2)甲醛枸橼酸盐成分及作用:枸橼酸钠 :抗凝、保持等渗 甲醛:防腐、固定红细胞优点:配

4、制简单、红细胞不凝集,可保持红细胞正常的 圆盘状数小时,目前应用广泛。11(二)红细胞计数-2.红细胞稀释液(2)甲醛枸橼酸盐11 (3)不含甲醛的枸橼酸盐: 成分及作用:31.3g/L的枸橼酸钠。 优点:遇自身凝集素增高者,可使凝集的红细胞分散并照常计数。 (4)急诊时可用生理盐水或含1%甲醛的生理盐水作为红细胞稀释液。 (二)红细胞计数-2.红细胞稀释液12 (3)不含甲醛的枸橼酸盐:(二)红细胞计数-2.3.操作步骤 (1)准备稀释液:加红细胞稀释液(赫姆氏液)2.0ml于试管中。 (2)采血:10 l至稀释液中,立即混匀。 (3)准备计数板、混匀稀释液、充池、静置2-3min。 (4)显微镜计数:高倍镜下计数中间大方格内四角及中央的5个中方格内的红细胞总数。 (二)红细胞计数133.操作步骤(二)红细胞计数134计算 红细胞数/L =N25/510106200=N1010=N/1001012参考值: 成年男性:4.05.5 * 1012/L; 成年女性:3.55.0 * 1012/L; 初生儿: 6.07.0* 1012/L(二)红细胞计数144计算 (二)红细胞计数14 5注意事项:(1)同白细胞计数(2)红细胞在计数池中若分布不均,每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正

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