分解纤维素微生物分离知识点

1、关于分解纤维素的微生物的分离知识点第1页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四纤维素酶： 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即CX酶、 C1酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素C1酶Cx酶纤维二糖葡萄糖苷酶葡萄糖第2页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四甲 乙 在2支20mL的试管中，分别放入16cm的滤纸条，再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶（7080U/mL）。将二支试管固定在50m

2、L的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。4、纤维素酶活性的测定实验：第3页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四.纤维素分解细菌的筛选：1.方法：刚果红染色法这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2.原理：第4页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落二、实验设计（此步可以省略）第5页

3、，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四2、选择培养的操作方法将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1-2d，直至培养液变混浊。吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊。选择培养（富集培养）增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。1、目的：第6页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红第7页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四 为了确定分离得到的

4、是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵和_ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_ 含量进行定量测定。课题延伸发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 第8页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四碳源氮源生长因子无机盐水微生物需要的五大类营养要素物质（一）微生物需要的营养物质及功能第9页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四概念来源常见的生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物酵母膏、蛋白胨、动植物组织的提取液 维生素、氨基酸、碱基等生长因子思考是否培养所有微生物的培养基中都需要加生长因子？第10页，共14页，2022年

5、，5月20日，11点27分，星期四1、碳源2、自养型微生物利用无机碳源， 异养型微生物利用有机碳源；有机碳源：如糖类无机碳源：如CO25自养型微生物的能源是光能或无机物氧化释放的化学能； 异养型微生物的能源是和碳源一样（有机碳源） 3、自养型微生物利用无机氮源， 异养型微生物可能利用无机氮源也可能利用有机氮源4、有机碳源也是异养型微生物的主要能源第11页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四8有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵来生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。(1)写出实验步骤：_.制备含有_的固体培养基。_._. (2)预期实验结果结论：第12页，共14页，2022年，5月20日，11点27分，星期四8.答案（1）将培养好的菌株分为两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理作对照。把诱变组的大量菌株接种到多个含有纤维素的固体培养基上，同时对照组接种未处理的菌株。把它们置于相同的条件下培养一段时间后，取培养基用刚果红染色，观察记录菌