开心散对D半乳糖致衰老小鼠非酶糖基化和自由基的抑制作用研究

1、周高明王华王袆丹高向东【摘要】目的探究快乐散对朽迈少鼠的高级糖基化终末产物AGEs和自由基的按捺作用。要领创立D-半乳糖诱导的亚急性朽迈模子，用快乐散举行治疗，不雅察其对朽迈模子小鼠脑、肝脏的高级糖基化终末产物AGEs，SD活力以及DA含量的影响。效果快乐散可以或许显着改进D-半乳糖诱导的朽迈少鼠的学习影象停滞，明显进步朽迈少鼠的脑、肝脏中SD的活力，低落AGEs，DA的含量。结论快乐散大概通过低落体内AGEs的含量以及扫除自由基的作用来改进D-半乳糖诱导小鼠的学习影象本领。【关键词】快乐散高级糖基化终末产物抗氧化学习影象Keyrds:KaixinPder;AGEs;Antixidative;

2、Learninganderyabilities快乐散KXS是古代医籍?备急令媛要方?所纪录的益智类方剂之一，颠末昔人恒久的临床理论，证明有精良的益智作用。比年的研究表白，非酶糖基化和自由基在朽迈的产生生长中具有协同作用，因此同时拮抗非酶糖基化和自由基以堵截它们之间的恶性循环，成为抗朽迈研究的一个新的打破点。D-半乳糖诱导的朽迈少鼠模子可以明显增长小鼠体内血清AGEs含量，低落SD活力等1，因此，我们以快乐散研究工具，通过测定小鼠体内高级糖基化终末产物和自由基程度，分析快乐散抗朽迈的大概机制。1质料1.1药物快乐散由人参、远志、菖蒲、茯苓4味药构成。药材均购于南京市药材公司，经中国药科大学中药资

3、源学教研室秦民坚传授断定切合药用划定。快乐散根据人参10g，远志10g，菖蒲10g，茯苓20g的比例混淆后，加9倍重量的水提取两次，1h/次，两次水提液归并后减压浓缩至干，利用时用蒸馏水稀释至所需浓度。1.2试剂D-半乳糖D-Galatse，D-gal上海试剂二厂，批号050719；脑复康NFK，南京白敬宇制药，批号050811；超氧化物歧化酶SD试剂盒、丙二醛DA试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。1.3仪器四盲端六折角小鼠水迷宫，荧光分光光度计(aryElipse)，均由东南大学群众卫生学院提供。1.4动物雄性昆明种小鼠1822g，由中国药科大学动物中央提供。2要领与效果2.1分组造模及给

4、药小鼠随机分成6组，每组12只，即正常比较组，模子组，脑复康组0.4g/kg，快乐散高剂量组0.9g/kg、中剂量组0.3g/kg、低剂量组0.1g/kg。逐日灌胃1次，除正常比较组逐日腹腔注射等容量无菌生理盐水外，别的各组逐日腹腔注射3.75%D-gal150g/kg，一连6周2。2.2学习影象本领测试效果表白，D-半乳糖模子组小鼠影象本领显着低落，表现为在水迷宫内反响错误次数与游抵平台的时间较正常比较组明显增长P0.01，阳性药脑复康组以及快乐散高，中，低3个剂量都有显着的改进作用，而各用药组之间无明显性差异。效果见表1。表1快乐散对D-半乳糖模子小鼠在水迷宫试验中学习影象本领的影响(略)

5、2.3脑、肝脏AGEs含量的测定举动学实行竣事后第2天，摘取全脑、全肝，用无菌生理盐水制备10%的脑匀浆和肝匀浆，3000r/in离心10in，取上清液测定脑和肝脏的AGEs含量3，引发波长和发射波长别离接纳340n和430n，荧光相对强度以恣意荧光单元/毫克卵白表现，效果表白，模子组小鼠脑、肝脏的AGEs含量明显升高，而快乐散中、高剂量可以或许明显低落脑、肝脏AGEs含量的增长。效果见表2。表2快乐散对D-半乳糖模子小鼠脑、肝脏AGEs含量的影响(略)2.4SD，DA的测定取脑，肝脏匀浆上清液举行SD，DA的测定。效果表白，D-半乳糖模子组脑内SD活力明显低落，DA含量明显升高，快乐散高、中

6、剂量均能明显升高朽迈少鼠脑，肝脏的SD活力，快乐散高，中，低3个剂量都可以或许明显低落小鼠脑的DA含量，而快乐散的中，高剂量可以明显低落肝脏DA的含量。效果见表34。表3快乐散对D-半乳糖模子小鼠脑构造SD活力和DA含量的影响(略)表4快乐散对D-半乳糖模子小鼠肝脏SD活力和DA含量的影响(略)3讨论生物大分子如卵白质、脂质、核酸均可以在没有酶到场的条件下自觉的与一些复原糖反响天生不变的共价加成产物-高级糖基化终末产物，该反响历程称为非酶糖基化反响NEG。AGEs在构造中形成和沉淀后，引起构造的老化和成效阑珊。自由基可以诱发细胞膜或细胞器中不饱和脂肪酸产生过氧化作用，也是生物学朽迈的紧张缘故原

7、由之一。比年来的研究表白,非酶糖基化和自由基彼此促进，对朽迈的产生生长起着协同作用，非酶糖基化反响可以通过多种途径促进自由基介导的过氧化反响，如修饰SD等抗过氧化酶，直接产生过氧化阴离子，诱导形成AGE依靠的过氧化物泉源，从而加重对机体的损伤4；另一方面，lff等创造氧自由基在非酶糖基化的初始阶段即已产生，因此以为，非酶糖基化反响是开始于复原糖的自身氧化，即复原糖先经氧化作用天生烯二醇和二羰基并产生超氧阴离子、过氧化氢和羟自由基，二羰基再与游离氨基产生反响并形成AGEs5。同时氧化作用促使非酶糖基化反响向晚期反响生长，对AGEs的形成起到了结实的作用，是造成卵白质产生不成逆损伤的决定因素。本实

8、行证明，快乐散可以明显改进D-半乳糖模子小鼠的学习影象本领，低落小鼠脑和肝脏的AGEs含量，进步小鼠脑和肝脏的SD活性，低落DA程度，表白快乐散具有按捺高级糖基化终末产物的天生，扫除自由基的作用。本文效果提示快乐散大概通过扫除AGEs含量、抗氧化等的作用来发挥其益智和抗朽迈的作用。【参考文献】1XuSng,inginBa,DiandngLi,etal.AdvanedglyatininD-galatseindueduseagingdelJ.ehanissfAgEingandDevelpent,1999,108:239.2余资江，应大君，董世武，等.半乳糖急性致朽迈动物模子剂量的探究J.剖解学杂志,2022,28(4):42.3孙贺英，张宗玉.小鼠增龄历程中皮肤、尾腱非