乙肝二对半定量检课件

1、乙肝二对半定量检测临床应用检验科 刘姮梅 程实 戴万荣乙肝二对半定量检1乙肝二对半定量检测临床应用检验科 刘姮梅 程实 戴万乙肝二对半定量检2乙肝二对半定量检2一、乙肝二对半定量检测不但极大地提高了检测的灵敏度和精密度，而且还可以用于评估注射乙肝疫苗后免疫效果乙肝二对半定量检3乙肝二对半定量检3 以乙肝病毒表面抗原为例，定性检测灵敏度是0.51.0ng/ml，定量检测灵敏度为0.050.1ng/ml。因此，乙肝二对半定量检测对低表达的表面抗原和病毒发生变异也有较好的检出率，对有效缩短急性乙型肝炎的窗口期、了解输血前、术前和孕妇产前乙肝病毒感染状况和预防效果评价也有重要的意义。乙肝二对半定量检4

2、 以乙肝病毒表面抗原为例，定性检测灵敏度是0.51.急性乙肝2.慢性乙肝3.乙肝病毒发生变异，表达量较低4.手术前、输血前和孕妇产前检查乙肝二对半定量检51.急性乙肝乙肝二对半定量检55.高危人群防护和及时发现治疗高危人群包括：母亲是HBV感染者其所分娩的子女；配偶、性伴侣是HBsAg阳性者；HBsAg阳性者的家庭成员；医护人员和实验室工作人员、经常接受血液或血液制品者；血透病人和器官移植者；静脉内注射毒品者和性传播疾病者；免疫功能低下者；易发生外伤者等乙肝二对半定量检65.高危人群防护和及时发现治疗高危人群包括：乙肝二对半定量检 这些人群多是长期少量感染，并刺激机体产生一定的免疫力，可能呈低

3、浓度感染，特别应当引起人们的足够重视，密切关注并采取措施防止发展成乙肝或慢性携带者。乙肝二对半定量检7 这些人群多是长期少量感染，并刺激机体产生一定6.了解对HBV感染抵抗力状况和评估注射乙肝疫苗后免疫效果乙肝二对半定量检86.了解对HBV感染抵抗力状况和评估注射乙肝疫苗后免疫效果乙二、乙肝二对半定量检测能对乙肝患者的诊断、病程、治疗、预后起到一个全程动态监测和疗效观察的作用乙肝二对半定量检9二、乙肝二对半定量检测能对乙肝患者的诊断、病程、治疗、预后起1、HBsAg定量检测的主要临床意义 血清中HBsAg含量与肝组织内cccDNA水平有直接的相关性，是HBV复制的参考指标国内外学者研究表明，H

4、BsAg的含量与肝组织内乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）水平有直接的相关性，用HBsAg定量可以间接反映HBV感染的肝细胞内的cccDNA水平。乙肝二对半定量检101、HBsAg定量检测的主要临床意义 血清中HBsAg含量 乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNA）是HBV前基因组RNA转录产物最原始的模板，也是乙肝病毒持续感染的关键因素，因此，它是乙肝病毒复制最特异的指标，其准确性超过目前常用的HBV-DNA检测。肝活检结果显示，肝内HBV cccDNA与血清HBsAg及血清HBV-DNA水平呈显著相关。在评估基线病毒学标志与治疗后病毒学应答相关性的研究中，研究者发

5、现，血清HBsAg水平与HBV cccDNA有较好的相关性，基线时低水平HBsAg可较好预测抗病毒治疗慢性乙肝（CHB）的持续病毒学应答，这也反映了HBsAg定量检测的重要性和可行性。因此HBsAg水平可作为衡量HBV感染肝细胞数量的标志。更重要的是，乙肝治疗降低HBsAg水平意味着可降低肝内的ccc DNA水平。 乙肝二对半定量检11 乙肝病毒共价闭合环状DNA（HBV cccDNAHBsAg水平与HBV感染自然史有关，与HBVDNA总体相关，但与HBeAg阴性CHB的相关性较差 免疫耐受期 免疫清除期 非活动或低（非）复制期 再活动期HBsAg水平 最高 开始下降 最低 再度升高，但升高倾

6、 向低于免疫清除期 乙肝二对半定量检12HBsAg水平与HBV感染自然史有关，与HBVDNA总体相HBsAg清除是目前慢性乙肝治疗的最高目标，也是乙肝自然恢复过程人体免疫系统控制HBV取得最佳效果和获得最接近治愈状态的指标。 目前临床上有许多指标用于检测慢性乙肝的治疗应答，如ALT水平、HBV-DNA水平、HBeAg血清学转换率以及HBsAg清除率等，ALT正常化、HBV-DNA抑制至不可测、HBeAg血清学转换以及HBsAg清除便成为治疗慢性乙肝的目标。其中HBsAg清除是乙肝自然恢复过程中人体免疫系统控制病毒取得最佳的效果，也被认为是可以获得最接近治愈的状态，因此HBsAg清除成为慢性乙肝

7、最高治疗目标。乙肝二对半定量检13HBsAg清除是目前慢性乙肝治疗的最高目标，也是乙肝自然恢 一项309例代偿性肝硬化患者的前瞻性队列研究，平均随访68个月，结果显示：32例患者达到HBsAg清除，其中3% HCC和死亡；而未发生HBsAg清除的患者中，有11%发展为HCC、20%死亡。与未发生HBsAg清除的患者相比，伴HBsAg清除的患者HCC的发生率显著降低，生存率显著延长，表明HBsAg清除可降低肝癌发生或肝病相关性死亡的危险。 乙肝二对半定量检14 一项309例代偿性肝硬化患者的前瞻性队列研究， 研究表明，发生HBsAg清除的患者，肝脏炎症和肝纤维化程度显著改善。如果HBsAg清除发

8、生于患者45岁以前，肝硬化发生之前或不存在丙肝病毒/丁肝病毒共同感染时，则其临床结果如肝硬化、肝癌及死亡的发生率几乎为0，但如果HBsAg清除发生在45岁以后（感染时间长）、肝硬化或合并丙肝病毒/丁肝病毒感染时，仍有肝病并发症发生的可能。因此HBsAg清除应当越早越好。 乙肝二对半定量检15 研究表明，发生HBsAg清除的患者，肝脏炎症和肝HBsAg可能是较HBVDNA水平更能反映CHB患者病程程度的一种间接指标病理研究提示，HBsAg与炎症分期和肝脏纤维化程度呈负相关关系。随着炎症和纤维化反应的加重，HBsAg呈阶梯状下降，但HBVDNA水平无明显变化，提示HBsAg较HBV-DNA水平更能

9、反映患者的病理程度。轻-中度CHB：G2S1组38392.4542747.74，G2S2组32193.2541322.70 重度CHB： G3S4组7214.528517.78， G4S4组1709132428.95 乙肝二对半定量检16HBsAg可能是较HBVDNA水平更能反映CHB患者病程 HBsAg定量检测是指导慢性乙肝患者抗病毒治疗的新工具基线HBsAg较低水平患者获得持续应答的敏感性增强。基线的HBsAg定量水平小于10000IU/ml和疗程中HBsAg降幅1log10IU/ml和疗程结束时HBsAg低于10IU/ml的均有较持久的免疫应答 乙肝二对半定量检17 HBsAg定量检测是

10、指导慢性乙肝患者抗病毒治疗的新工具治疗12周时低水平的HBsAg可预测治疗有良好的应答。 治疗12周时HBsAg1200IU/ml 或12周时HBsAg定量下降至60%基线预测治疗有良好的应答，且是治疗后HBeAg血清学转换的独立的预测因素。 乙肝二对半定量检18治疗12周时低水平的HBsAg可预测治疗有良好的应答。 乙治疗24周时HBsAg下降明显者，可获得更高持久免疫控制。 24周时HBsAg含量较基线下0.51logIU/ml或24周时HBsAg含量1500IU/ml患者可预测治疗后半年、1年、2年有良好的持续应答和对未来HBsAg清除有高度预测作用。乙肝二对半定量检19治疗24周时HB

11、sAg下降明显者，可获得更高持久免疫控制。治疗48周HBsAg定量低水平者，停药后可获得更高持久免疫控制。 48周HBsAg水平10IU/ml 可获得停药后有较48周时HBsAg自基线下降100IU/ml 好的HBsAg清除率乙肝二对半定量检20治疗48周HBsAg定量低水平者，停药后可获得更高持久免疫应用HBsAg定量预测有无良好或持久的治疗应答方法自基线和治疗中不同时间的HBsAg水平预测有无良好或持久的应答 基线水平10000IU/ml，治疗至12周或24周的HBsAg水平12001500IU/ml和48周10IU/ml 用HBsAg水平自基线降低幅度预测有良好或持久的应答 12周时下降

12、至60%基线水平，24周时下降幅度 0.51logIU/ml、48周时自基线下降100IU/ml乙肝二对半定量检21应用HBsAg定量预测有无良好或持久的治疗应答方法自基线和延长治疗提高持久免疫控制聚乙二醇干扰素规范治疗48周，至24周时HBsAg定量下降10%，17%的患者在停药后1年维持应答； 聚乙二醇干扰素规范治疗96周，至24周时HBsAg定量下降10%，58%的患者在停药后1年维持应答；乙肝二对半定量检22延长治疗提高持久免疫控制乙肝二对半定量检22监测拉米夫定等核苷酸类药物治疗中的耐药突发 当乙肝病毒出现YMDD（酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸）突变出现的时候，通常在生化指标出

13、现异常之前血清HBsAg浓度和HBV DNA滴度增加。在YMDD突变出现之后，血清HBV DNA持续升高，然而HBsAg的增加是瞬间的，与ALT的升高相似。在大部分病人中，血清HBsAg的增加是由于HBV DNA的增加。然而在某些病人中，血清HBsAg在HBV DNA增加几个月之前便增加。因此，在用拉米夫定等核苷酸类药物抗病毒治疗时，除了监测HBV DNA水平之外，同时监测血清HBsAg浓度或许能够有利于较早地发现在拉米夫定治疗中的耐药突变。乙肝二对半定量检23监测拉米夫定等核苷酸类药物治疗中的耐药突发 当乙肝病毒2、乙肝病毒表面抗体（抗-HBs）定量检测的主要临床意义 抗-HBs定量检测能够

14、对是否真正具有中和HBV的免疫力作出正确评价，对乙肝高危人群的预防起监督和指导作用。 抗-HBs即乙肝抗体，是乙肝的保护性抗体，是受乙肝病毒感染后痊愈或治愈的象征。抗-HBs浓度越高，保护力越强，持续时间也就越长。乙肝二对半定量检242、乙肝病毒表面抗体（抗-HBs）定量检测的主要临床意义 目前普遍认为普通人群抗-HBs浓度值10IU/ml，就有足够的保护作用；高危人群抗-HBs浓度值100IU/ml，具有足够的保护作用；肝移植、血液透析以及免疫抑制等病人应定期检测抗-HBs浓度值，每次检测值100IU/ml为宜。 乙肝二对半定量检25 目前普遍认为普通人群抗-HBs浓度值10IU/抗-HBs

15、浓度测定还可以用于评估注射乙肝疫苗后的免疫效果。 无应答者：抗体浓度1mIU/ml，无保护性抗体，非特异性结合反应，约占接种者的5%，继续加大剂量或更换疫苗厂家全程（3针）免疫注射；低应答者：抗体浓度为110mIU/ml，保护作用比较弱，必须加强2针疫苗注射；中应答者：抗体浓度为10100mIU/ml，已有一定的保护力，约占接种者65%，须加强1针疫苗注射；高应答者：抗体浓度100mIU/ml，免疫效果最好，约占接种者20%，不需要加强注射。乙肝二对半定量检26抗-HBs浓度测定还可以用于评估注射乙肝疫苗后的免疫效果。 对意外接触HBV感染者的血液和体液后，可按照一下方法处理血清学检测 应立即

16、检测HBV DNA、HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、ALT和AST，并在3和6个月内复查。主动和被动免疫 如已接种过乙型肝炎疫苗，且已知抗-HBs 10 mIU/mL者，可不进行特殊处理。如未接种过乙型肝炎疫苗，或虽接种过乙型肝炎疫苗，但抗-HBs 10 mIU/mL或抗-HBs水平不详者，应立即注射HBIG 200400 IU，并同时在不同部位接种一针乙型肝炎疫苗(20g)，于1和6个月后分别接种第2和第3针乙型肝炎疫苗(各20 g)。乙肝二对半定量检27对意外接触HBV感染者的血液和体液后，可按照一下方法处理血3、乙肝二对半定量检测HBeAg和抗-HBe的主要临床意义HBe

17、Ag：是乙肝患者传染性强的标志之一，HBeAg阳性表明体内有大量HBV-DNA复制； 也是乙肝由急性发展为慢性的指标 ；慢性肝炎中HBeAg持续高浓度提示HBV持续感染，而且发展肝硬化的概率比较高 ；孕妇高浓度HBeAg可能增加母婴垂直传播的机会 乙肝二对半定量检283、乙肝二对半定量检测HBeAg和抗-HBe的主要临床意义H抗-HBe：抗-HBe主要存在于HBsAg阳性携带者及迁延稳定或恢复期乙型肝炎患者的血清中，一般认为抗-HBe也是乙肝病情稳定的标志 HBeAg阳性慢性肝炎 ，定量检测能明确HBeAg向抗-HBe转化的时期，即表现为HBeAg浓度的下降和抗-HBe浓度升高的过程 抗-HB

18、e阳性慢性肝炎主要由前C基因突变株HBV感染所致，也称异型慢性肝炎。始终不出现HBeAg，但HBV-DNA进行性复制。HBsAg亦在高浓度处变动。与前者HBeAg阳性慢性肝炎中的转化期比较，两对半定性检测均表现为小三阳，但后者主要表现在高HBsAg浓度，忽高忽低的ALT值和HBV-DNA始终阳性。这类病人往往对干扰素、拉米夫定治疗效果不佳。乙肝二对半定量检29抗-HBe：乙肝二对半定量检29血清HBeAg水平不同的慢性乙型肝炎患者的临床病理特点改变不同众多的研究发现，在HBeAg阳性的CHB病人中，无论血清HBV-DNA水平，低、中浓度HBeAg组的炎症活动度及纤维化分级均较高浓度HBeAg严

19、重且均呈负相关，而与HBeAg阴性CHB有更相似的临床特征乙肝二对半定量检30血清HBeAg水平不同的慢性乙型肝炎患者的临床病理特点改变定量检测HBeAg和抗-HBe是乙肝患者抗病毒治疗起点和终点的选择目标 治疗的监测和随访治疗前应检查：病毒血清学，包括HBsAg、HBeAg、抗-HBe和HBV DNA的基线状态和水平； 抗病毒治疗的三大治疗终点之一就是HBeAg/抗-HBe血清学转化。HBeAg或HBeAb血清转换是患者接受治疗后发生免疫应答的结果，是目前公认的治疗终点，是较高的抗病毒治疗目标。 乙肝二对半定量检31定量检测HBeAg和抗-HBe是乙肝患者抗病毒治疗起点和终定量检测HBeAg

20、是有效监测和评估抗病毒药物疗效的重要指标之一 如果患者的HBV DNA，尤其是HBeAg的定量呈现逐步和进行性下降时，判断可能出现HBeAg血清转换有重要意义。已经有一定程度的下降，建议继续观察治疗3个月，再根据患者应答情况决定是否调整治疗方案。 乙肝二对半定量检32定量检测HBeAg是有效监测和评估抗病毒药物疗效的重要指标HBeAg定量的预测价值优于HBVDNA定量的预测价值 治疗24周HBeAg水平 72周时的HBeAg转换率10PEIU/ml 52%10100PEIU/ml 20%100PEIU/ml 4%乙肝二对半定量检33HBeAg定量的预测价值优于HBVDNA定量的预测价值 乙肝基

21、线HBeAg水平和治疗24周的HBeAg水平下降幅度也可有效预测远期HBeAg血清学转换率HBeAg基线500PEIU/u 52周时HBeAg血清学转换率57.1%12周时HBeAg水平较基线 52周时HBeAg血清学转换率88.5%降低超过1logPEIU/ul 乙肝二对半定量检34基线HBeAg水平和治疗24周的HBeAg水平下降幅度也可有 因此，在对慢性乙肝患者的抗病毒治疗的监测和预测或判断是否出现持续应答时，应根据HBV-DNA和HBeAg定量检测的动态变化进行综合分析，对在治疗过程中HBeAg和HBsAg浓度明显下降的患者应鼓励继续治疗，以取得更好的疗效。 乙肝二对半定量检35 因此，在对慢性乙肝患者的抗病毒治疗的监测和预测4、乙肝二对半定量检测核心抗体（抗-HBc）的主要临床意义 抗-H