紫丁香叶中丁香苦苷时空变化规律的研究

1、紫丁香叶中丁香苦苷时空变化规律的研究【关键词】紫丁香；丁香苦苷；时空变化规律；高效液相色谱Abstrat：bjetiveTprvidesientifibasisfrexplitingneresurefSyringablataLind1.,theregularityfhangensyringpirsideinleavesfS.blataithitsdifferentnthsandsitesasstudied.ethdsHPLethdasappliedteasurethententfsyringpirsideindifferentnthsandparts.ResultsThesyringpirsi

2、deinleavesfS.blata.indifferentstagesandpartsayhaveregularhangesinntent.nlusinTheresultsfthestudyanprvidereferenesfrtheprdutin,establishingthequalitystandardandtheseletinfptiuharvestingtiefS.blataLind1.1材料与方法1.1材料紫丁香SyringablataLind1.叶采自黑龙江中医药大学校园内，经黑龙江中医药大学中药资源与开发教研室王振月教授鉴定为SyringablataLindl。丁香苦苷从植物

3、紫丁香叶中提取别离得到，经波谱分析鉴定构造，归一化法计算，含量在98%以上。1.2仪器与试剂1.3取样方法1.3.1同一植株不同生长时期紫丁香叶的取样方法选取同一紫丁香植株的中间局部的枝条进展随机采样，对其进展标记，分别在5月10日、5月16日、6月20日、7月20日、9月1日、9月20日、10月3日、10月8日进展采样，取样时从整个枝条上均匀摘取叶片(不含叶柄),混合后作为该时期的样品。1.3.2同一生长时期不同空间紫丁香叶的取样方法按高度不同将紫丁香树冠依次划分为上、中、下3局部，按照阳光照射的位置将树的东面和南面划分为阳面，剩余为阴面，详细划分见图1。2结果2.2对照品溶液的制备精细称取

4、丁香苦苷对照品适量，溶于甲醇配制成浓度依次为0.005，0.05，0.10，0.20，0.30，0.40gl-1的标准溶液，分别精细汲取标准溶液，注入高效液相色谱仪，以进样量X(g)为横坐标，峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：Y=13009844.2927X31673.0572，r=0.9995(0.254.0g)。转贴于论文联盟.ll.2.3供试品溶液的制备取5g紫丁香叶粉(60减压枯燥至恒重)，精细称定，加50l蒸馏水浸泡30in，沸水浴加热回流3次(均50l/次，回流1h)，滤过，滤液合并，减压浓缩至10l，调70%醇沉静置24h后离心取上清液，减压回收乙醇至10l，醋酸乙酯

5、萃取3次，10l/次，合并萃取液并回收至干，残渣用甲醇溶解并定容至25l。0.45微孔滤膜滤过，备用。2.4精细度实验取同一份对照品溶液，连续进样5次，结果丁香苦苷峰面积的积分值的RSD为2.17%，说明精细度良好。2.5稳定性实验取同一份供试品溶液，分别在0，2，6，18和24h检测，结果丁香苦苷峰面积的RSD为1.97%，说明样品在24h内稳定。2.6重复性实验取9月20日采集的紫丁香叶5份，按供试品溶液方法制备溶液，结果丁香苦苷峰峰面积的RSD为1.98%，结果说明重复性良好。2.7加样回收率实验精细称取含量的9月20日紫丁香叶粉末1g，参加对照品适量，按“2.3项下制备供试品溶液，计算

6、回收率。结果丁香苦苷的平均回收率为99.32%，RSD为2.15%。说明加样回收率良好。2.8样品采收及测定为探究不同时期紫丁香叶中丁香苦苷含量的动态变化规律，作者参照紫丁香的生长发育期，根据“1.3.1的方法进展采样，采用统一方法枯燥，备用；为探究不同空间紫丁香叶中丁香苦苷含量的动态变化规律，作者根据“1.3.2的方法进展采样，分别对10月3日的紫丁香叶阴阳面的上、中、下部位的丁香苦苷含量进展了测定。按“2.3项制备的供试品溶液在上述色谱条件下进样，分析紫丁香叶中丁香苦苷时空变化规律，其结果见图34。3讨论3.1对同一紫丁香植株在不同生长时期紫丁香叶中丁香苦苷含量的差异进展研究时,关键是取样

7、技术。本研究中的取样方法,根据研究目的最大限度地遵守单一差异原那么,使测定结果的差异仅与紫丁香叶的取样时间有关,最大限度地消除了误差来源。本实验通过对不同生长期紫丁香叶中丁香苦苷的含量测定，显示了其丁香苦苷在不同生长期的含量变化。结果说明不同生长时期紫丁香叶中丁香苦苷的含量存在较大差异，其中丁香苦苷含量在5月10日、6月20日、9月20日均较高，这可能是因为丁香苦苷在不同生长阶段随季节变化而发生转化，其间转化的条件可能是外界的生态因子，这有待于进一步证实。尽管5月10日紫丁香叶中丁香苦苷含量较高，但此时正值紫丁香的芽期，叶子的生物量明显低于后两个时期；而6月20日紫丁香叶长齐前后、9月20日紫丁香叶将枯槁脱落前叶子的含量和生物量均较高，因此，仅从丁香苦苷的含量和叶子的生物量角度看，在紫丁香叶长齐前后或紫丁香叶将枯槁脱落前均可采收，这与紫丁香叶民间用药习惯相符。但仅以紫丁香叶中的某一个成分在不同时期的含量变化来确定其采收期具有局限性，须结合其它活性成分的含量变化来综合考虑。3.2本实验通过对同一时期不同空间紫丁香叶中丁香苦苷进展了含量测定，显示了不同空间紫丁香叶样品丁香苦苷的含量存在较大差异。其中处于阳面叶子中的丁香苦苷含量均明显高于同一空间位置