正交试验法优化淫黄颗粒的提取工艺

1、正交试验法优化淫黄颗粒的提取工艺【摘要】目的优化淫黄颗粒的提取工艺。方法采用正交试验法，以提取液中淫羊藿苷的含量为考察指标，对影响水煎提取效果的加水量、浸泡时间、煎煮时间、次数等4个因素进展研究。结果淫黄颗粒的最正确提取工艺为A2B23，即加水量为8倍，提取3次，每次1.5h。结论该实验所优选的工艺稳定，可行。【关键词】淫黄颗粒总黄酮淫羊藿苷提取工艺正交试验Abstrat:bjetiveptiisetheextrattehnialfYinhuangGranules.ethdTakerthgnaltest,takearriinntentinextratasbservatinindex,study

2、the4fatrsfateraunt,sippingtie,detingtieandtiesinflueningthedetinextratresult.ResultThebestextrattehnialisA2B23,i.e.8tiesfrater,3tiesfextrat,1.5h/tie.nlusinTheexperientshsthetehnialisstableandavailable.Keyrds:YinhuangGranules；ttalflavnes；iariin；extrattehnial；rthgnaltest淫黄颗粒系以淫羊藿为君，配伍黄芪而制成的中药复方制剂，具有补气

3、健肾之成效，主要用于肾病综合征的治疗。为确保该制剂的临床疗效，本文采用正交设计方法，以干膏收率和总黄酮提取率为指标，对淫黄颗粒水提取工艺进展优化研究。1仪器与材料2方法与结果2.1正交试验设计选用L9(34)正交表，以干膏收率和总黄酮提取率为考核指标，考察水提取中的加水量A、煎煮时间B和煎煮次数三个因素，每个因素设三程度。其因素程度见表1。表1正交试验因素程度表略2.2样品提取液的制备按处方配比称取药材适量，按正交试验表进展水提取，药液经滤纸滤过，滤液浓缩至12药材药液，备用。2.3干膏收率的测定精细量取上述提取液50l，浓缩至一定体积，移置于已枯燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105枯燥

4、至恒重，计算干浸膏收率。结果见表2。2.4总黄酮含量的测定2.4.1对照品溶液的制备精细称取淫羊藿苷对照品10.0g，置25l容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得每l含淫羊藿苷0.4g。2.4.2测定波长的选择2.4.3标准曲线的制备精细量取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4l，分别置10l容量瓶中，各加0.1l/L三氯化铝溶液1.0l，混匀，加甲醇稀释至刻度，摇匀，于70恒温水浴中放置10in，取出后室温放冷，于412.0n的波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线图1，得标准曲线：y=0.0125+0.0068(r=0.99

5、99)。淫羊藿苷在7.8454.88g/l浓度范围内呈良好的线性关系。转贴于论文联盟.ll.2.4.4重现性试验精细量取同一批提取液6份，按含量测定方法制备，并按标准曲线法测定吸收度，RSD=0.94%，重现性良好。2.4.5加样回收率试验取含量的提取液6份，参加不同量的淫羊藿苷对照品，按含量测定方法制备，并按标准曲线法测定吸收度，计算加样回收率，结果见表3。平均回收率为101.12%，RSD=0.85%表3回收率试验结果略2.4.6含量测定精细量取正交试验提取液1l，置蒸发皿中，水浴上蒸干后，残渣加甲醇溶解，移入10l容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精细汲取样品溶液2l，置10l容量瓶中，

6、照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1l/L三氯化铝溶液1.0l起依法测定吸收度，根据标准曲线计算黄酮含量和总黄酮提取总量，结果见表2。表2正交试验设计及干膏收率和总黄酮提取率略2.5结果分析正交试验结果进展方差分析，结果见表4和表5。以干浸膏得率为考察指标，表32中极差R值大小显示，各因素作用主次为BA；方差分析结果说明：因素的影响有极显著性差异P0.05，A因素和B因素那么均无显著性影响P0.05，以A3B23组合为佳。以总黄酮提取率为考察指标，表32中极差R值大小显示，各因素作用主次为AB；方差分析结果说明：A因素和B因素的影响无显著性差异P0.05，而因素的影响有显著性差异P0.05，

7、以A2B33组合为佳。表4浸膏得率方差分析表略表5总黄酮提取率方差分析表略2.6验证试验考虑到总黄酮提取率这一指标较重要，同时兼顾省时节能，故拟确定水提取工艺为：A2B23。但从表3、5可见，提取次数对总黄酮提取率影响较大，故进一步比拟A2B23和A2B24。取同一批药材，根据处方比例称取药材，按A2B24和A2B23进展比照验证试验，按上述方法测定浸膏得率及总黄酮含量，结果见表6。表6验证试验结果略由表6可见，以浸膏得率及总黄酮提取率为指标，按A2B23和A2B24进展试验，结果显示两者几无差异，故确定水提取工艺为A2B23，即加水量为8倍，提取3次，每次1.5h。3讨论方中君药淫羊藿具有补肾阳、强筋骨、祛风湿成效，其主要有效成分是淫羊藿苷和淫羊藿次苷等黄酮类化合物。黄芪为方中辅药，具有补气升阳、益卫固表、利水消肿、托毒排脓、敛疮生肌之成效，含皂苷类、多糖类、黄酮类及氨基酸类等，其中皂苷和多糖类被认为系主要有效成份。根据方中各药的有效成分及其溶解性能，设计确定采用水提工艺。淫黄颗粒系复方制剂，成分复杂。因此，除以干膏收率为考核指标外，同时选择以淫羊藿苷为对照品，测定总黄酮的含量，以综合评价工艺的合理性。结果显示，本方法简便、准确、灵敏