非粮淀粉免蒸煮酒精发酵工艺的基础技术研究

1、第一章 绪论其次章 传统酒精发酵工艺争辩淀粉液化工艺-淀粉酶活测定 1 Ug-1 表示。 500mL 棕色容量瓶中加水定容至刻度。b.稀碘液:1.00mL10g250mL；试剂随配随用。c.2%淀粉液:沸水250mL250mL48h。d.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液(pH=6.0):1000mL，配好后用pH计校正。pH=6.0 的磷酸缓冲液溶解，并用玻棒3 滤液供测定使用。5mL pH= 6.025mm200mm7045min，然后加稀释好0.5mL，马上记录时间。充分摇匀，定时用滴管取出反响液0.5mL，滴于为反响终点，并记录时间。酶活计算 5010min，然后加稀释 5 mL660 nm波

2、长下比色，快速测定吸光活力。 酶活计算 X=Cen液化反响终点测定测定液化反响终点(碘反响) 在 -淀粉酶的作用下，随着水解程度的加深，其碘色反响发生如下变化：蓝紫红浅红不显色(即碘原色)。淀粉液化50.0g 1g:3.0mL500mL 的pH 5.56.910U/g 淀粉酶，0.5g CaCl2，于沸淀粉糖化工艺葡萄糖淀粉酶活测定 1mg1 个酶活单位U/g。糖化反响终点测定糖化终点测定(无水乙醇检验) 取糖化液数滴，滴入无水乙醇中，看是否生成白色絮状物。假设无白色絮状物生成，说明糖化比较彻底。淀粉糖化pH 4.04.5，自然冷却至 60150U/g。淀粉糖化液酒精发酵酵母培育菌种与培育基)

3、。平板保藏及活化培育基20种子培育基(g/L)2020，酵母膏 10pH。(葡萄糖分开灭菌后再参与)种子活化方法50 mL/250 mL 于摇床上活化 24 h。种子培育基的摇瓶培育法将活化后的种子液以 10 %的接种量接入到 50 mL/250 mL 的种子培育基 12 h。酒精发酵pH 4.85.00.5高压灭菌。待1030取液体测量酒精的体积分数和糖含量。第三章 球磨机械活化对酒精发酵的影响球磨处理对淀粉颗粒性质的影响淀粉颗粒外表形貌观看1054 于扫描电子显微镜中观看，拍摄具有代表性的淀粉颗粒形貌(张本山，2022)。:10g 90mL 蒸馏水中，室温下浸泡 1h 后离心收集沉淀物，室

4、温晾干后按上述步骤进展颗粒形貌分析。晶体特性测定和晶度计算淀粉颗粒偏光性的测定球磨处理对淀粉微观构造的影响分子聚合度的影响2mol/mL的KOH溶液去离子水，用0.1mol/mL的HCl溶液将pH值调至6.07.0，加水定容至50mL。取10mL于100mL容量瓶，参与80mL去离子水和2mLI2-KI溶液(I2 2mg/mL和KI20mg/mL)，定容至100mL，马上混匀。用紫外分450800nm。-45080 0 nm，测定最大吸取峰；淀粉是不同分子质量同系的混合物，所以表示时用平均聚合度D 1 0.0015580 .01025 分子基团的影响maxDP红外光谱分析法 KBr 研磨均匀，

5、105 烘干后压制外光谱图。核磁共振分析法 (重水) 中，置于核磁共振仪，得到相应的氢谱 (1HNMR) 和碳谱 (13CNMR)。基团含量羟基含量测定承受羟胺法 (高嘉安，2022) 测定羟基含量。羟胺试剂的配制25.00g 盐酸羟胺 (分析纯) 溶于蒸馏水中，参与 0.5mol/L NaoH 溶液500mL2 天应重配制。测定步骤 5.000g (绝干) 100mL蒸馏水煮沸，使淀粉完全糊化。冷却至40，调pH3.2500mL带玻璃塞三角瓶中，准确参与 60mL 羟胺试剂，加塞，在 40水浴中保持 4 h。用0.1000mol/LHCI标准溶液快速滴定到 pH3.2，记录消耗的体积(mL)

6、数。称取同样质量的原淀粉进展空白滴定。依据下式计算羟基含量：羧基含量测定ISO11214 (1996) 5.00g 样品，参与25mL 0.lmol/L HCI20min 后用多孔漏斗过滤，经蒸馏水洗至无氯离300mL20min，0.05mol/L Na0H 标准溶液进展滴定至酚酞终点，记V下消耗的体积 。用原淀粉作空白试样，不需抽滤和洗涤，经糊化后用碱滴定，VlV2。依据下式计算羧基含量：直链分子含量的影响试剂及仪器：无水乙醇；0.1mol/LHCl,100mL:5mL2mol/LHCl；0.1mol/LNaOH,100mL:0.4gNaOH；0.5mol/LNaOH,100mL:2gNaO

7、H；2-KI碘试剂，100 m：2 g KI 0.2 g 2。Fluka公司。仪器：pH计；分光光度计；分析天平；步骤： 50 ml 1 mL10 mL 0.1M NaOH10 min溶解淀粉，用蒸馏水定容摇匀。用同样方法配制直链淀粉标准溶液。准确吸取标准溶液于 50mL容量瓶中，按表所示比例混合：编号12345678直链淀粉/mL00.20.30.40.50.60.70.8支链淀粉/mL2.52.32.22.121.91.80直链淀粉含量/%081216202428100 HCLpH 3.00.5 mL I2-KI碘试剂10 620 nm 溶液，绘制标准曲线。100 mg, 1 mL 10

8、mL 0.5M 10 2.5 20 mL 0.1 M HCl pH 3.0，0.5 mL I2-KI，定容摇匀，静置10 min620 nm下，测吸光度。并用标准曲线计算直链淀粉含量。球磨处理对淀粉理化性质的影响颜色的影响溶解度和膨胀度的影响50mL对应温度的蒸馏水，快速振荡混匀并持续 30min。3000r/min20 min105烘干至恒重后称重，即得到被溶解的淀粉量，计算式如下:酸度的影响194mL并把烧杯置于沸水浴中，搅拌淀粉乳直至糊化在冷水浴中马上冷却到室温(大约单位(张燕萍，2022)。总糖、复原糖含量的影响30minDNS 法测总糖董晓燕，2022)。 生物传感分析仪测定上清液中葡萄糖的浓度。糊化特性的影响承受粘度计进展快速测定，用TCW软件分析。依据中华人民共和国粮食行业标准(2022)操作规程，淀粉样品含水量为 14%时，样品量为 3.00g，蒸馏水12/min95(3.75min)；952.5min12/min50(3.75min)；50下保持2min10s 960r/min160r/min热力学特性的测定用差示量热扫描法测量不同淀粉的热特性。具体方法 :用样品铝盒称取约4.0mg 样品，按质量比为 1:2 的比例参与去离子水，密封后放置平衡 4h，以空盒作为参比，30加热扫描至 100，扫描速率为 5/min，样品室氮气流量为30mL/min。(赵凯，20