绵茵陈药材高效液相色谱指纹图谱研究

1、绵茵陈药材高效液相色谱指纹图谱研究【摘要】目的建立绵茵陈药材的HPL指纹图谱，为其质量控制提供根据。方法采用反相高效液相色谱法，并进展相应的方法学考察，对不同产地和批次绵茵陈药材进展质量评价。结果采用Krasil182504.6，5色谱柱，流动相以乙腈和体积分数为0.2的磷酸水溶液进展梯度洗脱，柱温35，流速1.0Lin-1，检测波长327n；该方法稳定性、精细度、重复性良好,可用于绵茵陈药材的指纹图谱测定；不同批次的绵茵陈药材在图谱上存在一定的差异。结论该结果可为绵茵陈药材的质量控制提供根据。【关键词】绵茵陈；高效液相色谱法；指纹图谱Abstrat:bjetiveTestablishHPLf

2、ingerprintsfHerbaArteisiaespariaeandfferseinfratinfrthequalityntrlfHerbaArteisiaespariae.ethdsandResultsThefingerprintsfHerbaarteisiaespariaefrdifferenthabitatsandbathesereestablishedbyreversed-phasehighperfraneliquidhratgraphy.ThesapleasanalyzednaKrasil182504.6，5lunundergradientelutin.Thebilephasen

3、sistedfaetnitrileandH2(0.2%H3P4)andtheflrateas1.0Lin-1.Thedetetinavelengthas327n.Thestability,aurayandredibilityfthisethderegd.nlusinThisethdffersseinfratinfrthequalityntrlfHerbaArteisiaespariae.Keyrds:HerbaArteisiaespariae;HPL;HPL;fingerprints茵陈为菊科植物滨蒿Arteisiaspariaaldst.etKit.或茵陈蒿Arteisiaapillarie

4、sThunb的枯燥地上局部。其中春季采收的习称“绵茵陈，具有清湿热、退黄疸的成效1。文献报道，不同产地和采收期的茵陈药材质量差异较大2-3。本实验采用反相高效液相色谱法对绵茵陈药材建立指纹图谱，并进展相应的方法学考察，初步考察市售不同批次绵茵陈药材的质量差异，为绵茵陈药材的质量控制提供根据。2方法与结果2.1品种鉴定指纹图谱所用的不同批次绵茵陈药材均购于广州市药材公司、广州清平药材市尝广州致信药业，其产地分别为江西市售1、山西市售2、山东市售3、安徽市售4、河南市售5、山西市售6、陕西市售7、山东市售8、宁夏市售9、安徽市售10。根据?中国药典?2022版一部茵陈性状项下的规定，与?中华人民共

5、和国药典中药彩色图谱集?、?新编中药志?中照片与描绘，经广东药学院中药鉴定教研室刘基柱教师鉴定为菊科植物滨蒿Arteisiaspariaaldst.etKit或茵陈蒿ArteisiaapillariesThunb春季采收的枯燥幼苗。2.2供试品溶液的制备取本品粉末约0.5g，精细称定，参加体积分数为80的乙醇100L，置水浴上加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣用体积分数为80的乙醇溶解，置25L棕色量瓶中，加体积分数为80的乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.3对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精细称定,置棕色量瓶中，加甲醇制成每1L含40g的溶液，即得。转贴于论文联盟.ll.

6、2.4色谱条件Krasil182504.6，5色谱柱，流动相采用二元体系，流动相A为乙腈，流动相B为体积分数为0.2的磷酸水溶液，梯度洗脱程序：0in5A,10in10%A，45in25A；柱温35，流速1.0Lin-1，检测波长327n。2.5指纹图谱试验的方法学验证2.5.1绿原酸标准曲线的制备取绿原酸对照品溶液40.8g/L，分别进样2、4、6、8、10、16、20L，按照上述色谱条件进展测定，以绿原酸质量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程为：Y=2553.1X+2.8847,r=0.9999，说明绿原酸在0.08160.816g范围内线性关系良好。2.5.2稳定性试验取同一份供试品溶

7、液，分别在0、1、2、4、8和12h进展检测，直观指纹图谱全貌无明显变化，经中药色谱指纹图谱相似度评价软件国家药典委员会2022A，以下同计算，与对照图谱比拟，相似度均大于0.9，各共有峰相对峰面积和相对保存时间的RSD分别为1.41、1.22，说明在12h内供试品溶液具有良好的稳定性。2.5.3精细度试验取同一份供试品溶液，连续进样6次，进展检测，直观指纹图谱全貌无明显变化，经相似度评价，相似度均大于0.9，各共有峰相对峰面积和相对保存时间的RSD分别为0.42、0.31，说明该方法精细度良好。2.5.4重复性试验取同一种药材样品6份，按照供试品溶液的制备和检测方法进展检测，直观指纹图谱全貌

8、无明显变化，经相似度评价，相似度均大于0.9，各共有峰相对峰面积和相对保存时间的RSD分别为1.13、1.20，说明该方法重复性良好。2.6HPL指纹图谱建立与相似度评价取不同批次市售绵茵陈药材共10批，按照供试品溶液的制备和检测方法进展检测，对数据进展分析，以10批药材的均值生成对照图谱，经相似度评价软件计算不同药材与对照图谱之间的相似度。结果说明各批药材相似度均在0.9以上，证明相似度良好见图1。比拟获得的色谱图，共确定15个共有峰，其中4号峰为绿原酸峰，将其作为参照物峰，理论板数均不低于6000见表1。略3讨论3.1绵茵陈药材的化学成分主要包括香豆素类、色原酮类、黄酮类、香豆酸及其他有机

9、酸类等3，其中以绿原酸为主的有机酸类及香豆素类成分为主要有效成分，因此选择这些成分为本品色谱指纹图谱的分析对象。3.2检测波长的选择鉴于绵茵陈中的主要有效成分为绿原酸及香豆素类，均在327n左右有最大吸收，且其他一些黄酮类成分在该波长下也有一定的吸收，同时对不同波长(203、254、320、327n)的HPL图谱进展比拟，结果证明在327n波长下基线平，峰形较好，各峰峰面积值最大，因此确定检测波长为327n。3.3柱温的选择考察了15、25、35柱温对色谱别离效果的影响，结果说明，15时出峰较晚，基线不平，25和35时别离效果无明显区别，35时别离效果佳，同时保存时间较短，因此最终确定柱温为35。3.4实验中还考察了不同厂家和型号的色谱柱以及不同的HPL色谱仪器对绵茵陈药材指纹图谱的影响，结果各种色谱柱在不同的仪器上所测得的图谱没有明显差异。说明该实验所建立的方法具有较好的系统适应性和稳定性。3.5实验中共对13批不同绵茵陈药材进展了考察，相似度计算结果发现有3批市售5、市售8和市售13相似度小于0.9。市售5绵茵陈各成分含量非常低且出峰个数较少；市售8和市售13绵茵陈在各峰比例上与对照图谱存在较大区别，而且绿原酸含量较低分别为0.10和0.03。结果提示不同批次的绵茵陈药材在质量上存在较大的差异。【参考文献】1国家药典委员会.中