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文档简介

1、关于实验五血清中谷丙转氨酶的测定第1页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三一、实验目的掌握血清丙氨酸氨基转移酶活性测定的基本原理。了解血清丙氨酸氨基转移酶的测定方法及临床意义。第2页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三510nm光吸收法测定相对血清ALT活力二、实验原理 丙氨酸氨基转移酶(ALT)催化丙氨酸与-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反应形成相应的2,4-二硝基苯腙，呈黄色，后者在碱性条件下呈红棕色。（1）丙氨酸+-酮戊二酸 丙酮酸+谷氨酸 ALT （2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黄色)丙

2、酮酸2,4-二硝基苯肼（3）苯腙硝醌化合物NaOH（黄色）（红棕色）第3页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三三、实验器材材料：人血清试剂：谷丙转氨酶测定试剂盒用具：分光光度计，微量移液枪，试管，试管架，恒温水浴锅第4页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三（1）取3支试管，按下表加入试剂:试剂试剂空白管标准管样品管基质液(uL)200200200标准液(uL)50.0血清样品(uL)50.0蒸馏水(uL)50.0混合37水浴放置30min显色剂(uL)20020020037水浴放置20min稀释NaOH(uL)200020002000四、实验步骤冷却至室温后

3、，510nm处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及样品管光密度值。第5页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三（2）计算： 依据朗伯-比尔定律： A=KLC 标准管谷丙转氨酶活力：57U/L 样品管谷丙转氨酶活力（U/L）样品管光密度值 标准管光密度值57U样=A样A标U标第6页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三参考值谷丙转氨酶 血清参考值：0 50U/L 第7页，共9页，2022年，5月20日，22点11分，星期三正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。每次测定时都需用试剂空白溶液调零，不能用蒸馏水代替微量移液枪的正确使用注意事项第8页，共9页，2022年，5月20

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