大鼠急性缺血性肾功能衰竭血管内皮生长因子水平的变化

1、大鼠急性缺血性肾功能衰竭血管内皮生长因子程度的变化【摘要】目的讨论大鼠肾脏缺血/再灌注损伤(IRI)后不同时段血管内皮生长因子(VEGF)浓度的变化在急性肾衰竭(ARF)中的发病机制。方法建立大鼠肾脏IRI模型，采用ELISA法检测IRI术后不同时间段血、尿VEGF程度，并与肾功能做相关分析。结果手术组术后6h血清尿素氮(BUN)、肌酐(Sr)、血钾显著升高，至术后48h达顶峰，从术后72h开场回落(P0.05)。手术组术后6h血清VEGF显著升高，术后12h达顶峰，从术后24h开场下降至正常;手术组术后6h尿液VEGF显著升高(P0.01)，至术后24h降至低于假手术组，从术后48h开场上升

2、。血VEGF程度与尿VEGF程度呈正相关，与血钾、BUN、Sr程度无显著相关(P0.05)。结论血、尿VEGF升高程度可以作为ARF大鼠肾脏IRI早期肾脏缺血缺氧的监测指标。【关键词】血管内皮生长因子;大鼠;肾脏;缺血/再灌注损伤【Keyrds】Vasularendthelialgrthfatr(VEGF);Rat;Renal;isheia/reperfusininjury(IRI)研究发现血管内皮生长因子(VEGF)有增加血管通透性、促进内皮细胞增殖、血管生成修复等功能1。肾脏具有非常丰富的毛细血管网，肾脏疾病常伴有微血管的损害，推测VEGF在肾脏疾病时可能发挥重要作用。本文在建立大鼠肾脏缺

3、血/再灌注损伤(IRI)模型的根底上，检测IRI术后不同时段血、尿VEGF程度，并与肾功能做相关分析，以理解VEGF在肾脏IRI中的作用，为ARF发病机制以及治疗提供理论根据。1材料与方法1.1实验分组实验选用安康雄性istar大鼠60只，体重(268.98.94)g，随机分成假手术组和模型组，每组各30只。各组大鼠再随机分成手术后6、12、24、48、72h5个不同时段，每组6只，各组大鼠在体重上均有可比性。1.2实验方法参照文献2，3的方法，每组大鼠均以10%水合氯醛按35l/kg腹腔内注射麻醉后，采取经背双侧肋弓下缘距脊柱约0.5处行约长1.5的纵行切口，钝性别离并暴露双侧肾脏，模型组小

4、心别离双侧肾动脉，用无创性动脉夹夹闭双侧肾动脉，双侧肾脏颜色先由鲜红色变苍白，然后转为暗红色，60in后松夹恢复灌注，肾脏颜色再变成鲜红色，确定肾脏恢复血流后逐层关腹并缝合切口，建立肾脏IRI模型，术后大鼠自由摄食和饮水。假手术组暴露双侧肾脏后，覆盖浸有生理盐水的纱布，60in后去除纱布后逐层关腹，缝合切口，术后大鼠自由摄食和饮水。1.3标本采集及检测分别于术前、术后6、12、24、48和72h行大鼠称重，采血及留取6h尿液。全自动生化分析仪检测血BUN、r、钾，ELISA法检测血、尿VEGF浓度。1.4统计学分析应用SPSS12.0统计软件，数据以xs，组间比拟均采用单因素方差分析，指标间互

5、相关系采用Pearsn直线相关分析。2结果2.1血清各生化指标的检测2.1.1各组手术前后血清钾的变化模型组各时间点术后血钾与术前及相应时间点假手术组比照均显著升高(P0.05);术后6、12、24、48h组术后血钾随时间延长逐渐增高(P0.05);术后72h组术后血钾低于手术48h组，但仍高于手术6和12h组(P0.05)，见表1。2.1.2各组手术前后血清BUN、Sr的变化模型组各时间点术后血清BUN、Sr与术前及相应时间点假手术组比照均显著升高(P0.05);模型组6、12、24、48h组术后血清BUN、Sr随时间延长逐渐增高(P0.05);术后72h组血清BUN、Sr低于术后48h组，

6、但仍高于术后6h组(P0.05)，见表1。2.2血VEGF检测模型组术后6、12h血清VEGF与术前及相应时间点假手术组比照均显著升高，且12h组高于6h组(P0.05);模型组术后24、48、72h血清VEGF与术前及相应时间点假手术组术后比照差异无统计学意义(P0.05)，见表2。2.3尿VEGF检测模型组术后6、12h组尿液VEGF与术前及相应时段假手术组比照均显著升高，且12h组高于6h组(P0.05);模型组术后24h尿液VEGF与术前及相应时间点假手术组术后显著降低(P0.05)，见表2。表1各组大鼠不同时段血清BUN、Sr、K变化1)与同组术前比拟，2)与假手术组同时间点术后比拟

7、：P0.01;3)与模型组前一时间点比拟：P0.05;4)与模型组72h组比拟：P0.01表2各组大鼠不同时段血、尿VEGF变化1)与同时间点术前比拟，2)与假手术组同时间点术后比拟，3)与同组内前一时间点比拟：P0.052.4血、尿VEGF程度及其与肾功能的相关分析Pearsn直线相关分析显示，血VEGF程度与尿VEGF程度表达呈正相关(r=0.528，P0.01)，而与血钾、BUN、Sr无显著相关(P0.05)。转贴于论文联盟.ll.3讨论研究发如今肾脏VEGFRNA和蛋白质可以不同程度地表达在正常肾小球脏层上皮细胞、远端小管和集合管上，还少量表达在近端小管上46。ebb7等研究发现类固醇

8、敏感性肾病综合征(SSNS)的儿童血、尿VEGF的程度较缓解期SSNS及正常对照组无明显升高。本实验研究发现肾脏IRI术后6h血清VEGF程度已经显著升高，至12h到达顶峰，于24h开场下降并达术前程度。对于肾脏部分IRI后血清VEGF升高的机制目前尚未完全明确，肾脏IRI引起的炎症级联反响是肾损伤的一个重要因素，血白细胞和其他炎症细胞的激活和粘附因子的释放是组织损伤的关键反响，而白细胞的活化与血清VEGF浓度明显相关8，因此血清VEGF升高可能与血白细胞的活化有关。此外是否缺血缺氧后肾脏组织肾小球上皮细胞和肾小管细胞分泌VEGF增加并释放入血，以及ARF时肾小球滤过率的下降可能也参与血清VE

9、GF程度的升高。我们还观察到大鼠肾功能损害于手术后48h才到达顶峰，而血VEGF于手术后24h已经降至术前程度。即在肾IRI术后24h以后，随着肾功能的减退，血VEGF并不升高。提示在肾缺血缺氧早期，肾损害程度较轻时，肾小管上皮细胞分泌VEGF增多并释放入血，而导致血VEGF程度升高，而在肾损害继续加重后，肾小管上皮细胞脱落坏死，肾小管上皮细胞数绝对量减少，而不能分泌VEGF，而使得血VEGF程度无明显升高。因此我们推测是否肾部分IRI大鼠血VEGF程度与肾小管分泌VEGF的量有关?我们的研究显示尿VEGF于术后6h明显升高，术后12h降至术前程度，并继续降低，至24h明显低于术前程度，然后又逐渐上升至术前程度。推测术后6h尿VEGF明显升高为肾脏缺血再灌注早期肾脏部分肾小管上皮细胞缺血缺氧后诱导VEGF合成明显增多并排泌到管腔而使得尿中排出VEGF增多所致，另外此时血VEGF程度升高后从肾小球滤过VEGF增多亦可以使尿VEG