山茱萸不同工艺炮制品中马钱素含量比较

1、山茱萸不同工艺炮制品中马钱素含量比拟【摘要】目的比拟山茱萸不同炮制品中马钱素含量。方法高效液相色谱法。结果各炮制品中的马钱素含量相对于生品含量有所降低。结论不同的炮制方法对山茱萸中的马钱素含量有明显影响。【关键词】山茱萸；炮制；马钱素；高效液相色谱法TheparisnfthententsfLganininFrutusrnibyDifferentPressesKeyrds：Frutusrni;Press;Lganin;HPL山茱萸具有补益肝肾、涩经固脱之成效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿、尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症，是成药六味地黄丸、八味地黄丸等的重要原料。目前认为山茱萸中

2、所含的熊果酸、齐墩果酸、山茱萸苷、马钱素、没食子酸、莫诺苷等为其主要活性成分1，具有降低血糖、增强免疫、利尿、降压、抗炎等药理作用2。?中国药典?2022版规定测定马钱素含量作为山茱萸药材质量控制指标3。山茱萸临床和入中成药多用其炮制品，并认为山茱萸生用以敛阴止汗力强，蒸制后以补肾涩精，固精缩尿力胜，酒炙后借酒力温通，助药势，降低其酸性，滋补作用强4。马钱素作为山茱萸中水溶性有效成分之一，其构造属于环烯醚萜苷类成分，炮制加热和加辅料对其含量肯定有一定影响，但目前尚未见到有关报道。本研究以马钱素为考察指标，比拟不同炮制方法对其含量的影响，以期为制定山茱萸合理的炮制工艺提供实验根据。1器材1.1仪

3、器与试剂BS210S型电子天平北京赛多利斯天平；高效液相色谱仪：L-2022A(SHIADZU)；检测器SPD-10A；工作站：lassVP；H66025T超声清洗机无锡超声电子设备厂；101A-2型枯燥箱中华人民共和国上海市实验仪器总厂；LDZX-40BI型立式自动电热压力蒸气灭菌器上海申安医疗器械厂。马钱素对照品由北京格润得科技公司提供，纯度在98%以上；黄酒河南濮阳亚光酒厂；甲醇天津四友生物、乙腈(杭州百林)为色谱纯；氯仿、无水乙醇等均为分析纯。1.2药材由宛西制药股份公司提供，产于河南西峡县山茱萸GAP种植基地，经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定为山茱萸科植物山茱萸rnusffiin

4、alisSiet.etZn.的枯燥成熟果肉。2方法2.1样品制备根椐?中国药典?净制要求，取山茱萸样品，除去杂质和残留的果梗和核，即为净山茱萸，再按不同炮制方法的要求炮制成为以下实验样品。2.1.1生品取山茱萸样品，除去杂质和残留的果梗和核，放置备用。2.1.2加压酒蒸品取净山茱萸100g，缓慢参加40l黄酒搅拌均匀，加盖密闭闷润20in后将样品放入压力锅中蒸制，待温度升至115后，保持该温度1h，取出摊于瓷盘中，于烘箱中80烘3h至干，取出，置枯燥器中放凉备用。2.1.3酒蒸品取净山茱萸100g，缓慢参加40l黄酒搅拌均匀，加盖闷润40in，置于滤布上摊开，放在蒸笼上蒸3h后，于烘箱中80烘

5、3h至干，取出，置枯燥器中放凉备用。2.1.4酒炖品取净山茱萸100g，缓慢参加20l黄酒搅拌均匀,加盖闷润60in，置不锈钢锅中，隔水炖3h，摊于瓷盘中，于烘箱中80烘3h至干，取出，置枯燥器中放凉备用。2.1.5清蒸品取净山茱萸100g，置于滤布上摊开，放在蒸笼上蒸3h后，取出摊于瓷盘中，于烘箱中80烘3h至干，取出，放于枯燥器中放凉备用。2.2山茱萸不同炮制品中水分含量比拟按照?中国药典?规定方法3分别称取山茱萸炮制品粗粉3g，平铺于枯燥至恒重的扁形称量瓶中，精细称定，翻开瓶盖，在105枯燥5h，将瓶盖盖好，移至枯燥器中，冷却30in，精细称定重量，再在上述温度枯燥1h，冷却，称重，至连

6、续两次称重的差异不超过5g为止。根据减失的重量，计算山茱萸不同炮制品中水分的含量。结果见表1。表1山茱萸不同炮制品中水分的含量结果略从山茱萸不同炮制品中水分含量可以看出，所有炮制品中含水量都在7%13%以内，符合?中国药典?规定。此外，实验中所有炮制样品中的马钱素含量都按枯燥品计算。2.3HPL法测定马钱素含量2.3.1色谱条件色谱柱为DS柱4.6250(大连依利特)；乙腈-水1585为流动相；检测波长240n；柱温25；流速1l/in；分析时间20in。2.3.2对照品溶液的制备精细称取马钱素对照品0.46g置2l容量瓶中，加甲醇(色谱纯)使溶解并定容至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤0.45,即得

7、浓度为0.23gl-1马钱素对照品溶液。转贴于论文联盟.ll.2.3.3标准曲线绘制依次自动进样马钱素对照品溶液1，3，5，7，9l于高效液相色谱仪中，按上述色谱条件测定,并对结果进展分析。以峰面积积分值为纵坐标，对照品含量为横坐标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=1274329.13X-17626.1，r=0.9999。结果说明在0.231.15g范围线性关系良好。见表2和图1。表2山茱萸马钱素标准曲线数据略2.3.4精细度实验连续自动进样马钱素对照品溶液5l，按前述条件测定峰面积积分值，计算RSD值，结果说明精细度良好RSD=0.097%。结果见表3。表3精细度考察结果略2.3.5稳定性实验

8、分别在0，2，4，6，8，10h自动进样马钱素对照品溶液5l，照前述色谱条件测定峰面积积分值计算RSD值，结果说明马钱素在10h内稳定性良好,RSD=0.15。结果见表4。表4稳定性考察结果略2.3.6重复性实验称取山茱萸同一样品粗粉5份各约1g，精细称定，按照供试品溶液制备方法和色谱条件，制备供试品溶液并注入高效液相仪，计算含量，RSD=1.63。结果见表5。表5重复性实验结果略2.3.7加样回收率实验取马钱素含量的山茱萸粉末约0.5g，精细称定，共5份，分别参加马钱素对照品，以下按供试品溶液制备项下操作，得到5份加样回收供试液。自动进样各加样供试液10l，测定，用外标法根据峰面积积分值进展

9、计算。结果见表6。表6加样回收率实验结果略每份参加对照品4.040g，样品含量8.0810gg-1。2.3.8供试品溶液的制备各取样品粗粉约1g，精细称定，置具塞三角瓶中，参加30%甲醇10l，超声提取15in，倾出上清液抽滤，重复上述操作4次，用适量30甲醇清洗残渣,合并滤液，定容至50l容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。2.3.9样品含量测定取各供试品溶液分别自动进样5l，测定马钱素峰面积积分值，计算样品含量。对照品和样品色谱图见图24。结果见表7。表7不同炮制品中的马钱素含量略熊果酸含量和马钱素含量均是以枯燥品计，且是两次测定的平均值从表7可知，马钱素含量相对于生品含量均有所降低，由高到低

10、依次为生品酒炖品加压酒蒸品酒蒸品清蒸品。3讨论3.1山茱萸由于药用历史悠久，炮制方法较多，本实验所采取的是临床常用的炮制方法，加压酒蒸、清蒸、酒炖、酒蒸等炮制工艺中的加酒量、闷润时间、炮制时间，均经正交实验优选确定。由于实验内容较多，篇幅所限，正交实验的研究过程没有报道。3.2实验结果说明，不同炮制方法和参加的辅料对马钱素含量有一定影响，其炮制品中马钱素含量相对于生品均有所降低，且以清蒸品含量最低。马钱素含量降低的原因可能是马钱素属于环烯醚萜苷类，在一定条件下易发生水解，炮制加热和参加辅料对其能产生一定影响的缘故。【参考文献】1潘扬,王天山.植物山茱萸化学成分的研究概况J.南京中医药大学学报,1998,14(1):61.2郭富礼,张振凌.山茱萸不同炮制品中熊果