热原检查标准操作规程

1、热原检查标准操作规程1 检验依据：中华人民共和国药典2005年版（一部 二部）2 检验方法 2.1 仪器及用具智能热原仪及探头恒温干燥箱兔试验固定器 砂刀片1个 白瓷盆1个 灭菌饭盒1个 定时钟 镊子1把 毛巾2块 台秤 棉球5ml量筒3个 2 ml注射器6个 25ml量筒1个 10 ml注射器4个 100ml量筒2个 5号注射针头6个100ml烧杯1个 6号注射针头4个100ml容量瓶3个 100ml广口瓶2个100ml试剂瓶1个 玻璃棒3根 贴瓶签2张 2.2 化学试剂2.2.1 分析纯：乙醇、葡萄糖注射液、甲酚皂溶液、丙三醇2.2.2 75%酒精棉：用100ml量筒量取乙醇75ml，转移

2、至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，盖上瓶塞，摇匀，然后倒入装有棉球的广口瓶中浸透，即可，贴上瓶签，备用。2.2.3 2%来苏儿：用5ml量筒量取甲酚皂溶液2ml，转移至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，盖上瓶塞，摇匀，然后倒入试剂瓶中，贴上瓶签，备用。2.2.4 50%甘油：用100ml量筒量取丙三醇50ml，转移至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，盖上瓶塞，摇匀，然后倒入装有棉球的瓶中浸透，贴上瓶签，备用。2.3 操作原理：将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。2.4 操作方法2.4.1 供试家兔的要求

3、供试用的家兔应健康无伤，体重1.73.0kg，雌兔应无孕。预测体温前7日即应用同一饲料饲养，在此期间内，体重应不减轻，精神、食欲、排泄等不得有异常现象。未经使用于热原检查的家兔；或供试品判定为符合规定，但组内升温达0.6的家兔；或3周内未曾使用的家兔，均应在检查供试品前37日内预测体温，进行挑选。挑选试验的条件与检查供试品时相同，仅不注射药液，每隔30分钟测量1次体温，共测8次体温，8次体温均在38.039.6的范围内，且最高与最低体温的差不超过0.4的家兔，方可供热原检查用。用于热原检查后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少应休息2天方可供第2次检查用。如供试品判定为不符合规定，则组内全部家

4、兔不再使用。每一家兔的使用次数，用于一般药品的检查，不应超过10次。2.4.2 试验前的准备2.4.2.1 家兔的处理在作热原检查前12日，供试用家兔应尽可能处于同一温度的环境中，试验室和饲养室的温度相差不得大于5，实验室的温度应在1728，在试验全过程中，应注意室温变化不得大于3，避免噪音干扰。家兔在试验前至少1小时开始停止给食，并置于兔实验固定器上，直至试验完毕。家兔体温测试时，按“智能热原仪操作规程”操作，将探头插入家兔肛门的深度和时间，各兔应相同（注：在探头插入家兔肛门前将探头插入装有50%甘油的瓶中，润滑一下）。深度一般约6cm，时间不得少于1分半钟，每隔30分钟测量体温1次，一般测

5、量2次，两次体温之差不得超过0.2，以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔，正常体温应在38.039.6的范围内，且各家兔正常体温之差不得超过1。2.4.2.2 器皿的处理：试验用的注射器、针头及一切供试品溶液接触的器皿均应装入霉菌饭盒内，于“恒温干燥箱操作规程”（SOP.QC-YQ-15）中，用250干燥30分钟或用180干燥2小时，也可用其他适宜的方法除去热原。 2.4.3 检查法 2.4.3.1 供试品溶液的稀释与配制取毛巾浸洗于装有2%来苏儿溶液的白瓷盆中，拧干后，将检验用的一切物品及桌面擦拭一遍，并擦拭双手，稍干。再用75%酒精棉将安瓿颈部及双手再擦拭一遍，用砂刀片将

6、安瓿颈部割开，用除热原注射器及注射针头吸取一定量的供试品或按规定的浓度用注射用水稀释，混匀后注射。2.4.3.2 注射供试品：取适用的家兔3只，测定其正常体温后15分钟内，自耳静脉缓缓注入规定剂量并温热至约38的供试品溶液，然后每隔30分钟按“2.4.2.1”所述方法测量其体温1次，共测6次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度（）。 2.5 结果判断2.5.1 符合以下任一条件的，均认为供试品的热原检查符合规定。2.5.1.1 在初试3只家兔中，体温升高均低于0.6，并且3只家兔体温升高和低于1.4。2.5.1.2 在复试的5只家兔中，体温升高0. 6或0.6以上的家兔

7、仅有1只，并且初试、复试合并8只家兔的体温升高总和为3.5或3.5以下。2.5.2 出现以下任一现象的，均认为供试品的热原检查不符合规定。2.5.2.1 在初试的3只家兔中，体温升高0.6或0.6以上的家兔超过1次。2.5.2.2 在复试的5只家兔中，体温升高0.6或0.6以上的家兔超过1次。2.5.2.3 在初试、复试合并8只家兔的体温升高总和超过3.5。2.6 注意事项2.6.1 热原试验室内外均应保持安静，避免强烈直射的日光或灯光及其他刺激。2.6.2 在试验全过程中，避免家兔骚动，以保持体温稳定，在停止给食过程中可酌量给予饮水。2.6.3 升温规律。含有热原的供试品，注入12h升温最高，若第3h测温仍升高0.6或以上时，应重复试验。2.6.4 凡药典