川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤保护作用的实验研究

1、川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤保护作用的实验研究【关键词】川芎嗪；,肠缺血再灌注损伤；,小肠；,肝脏摘要：目的讨论川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤的保护作用。方法选用安康istar大鼠24只，随机分成3组每组8只：假手术对照组、缺血再灌注组、川芎嗪治疗组。夹闭大鼠肠系膜上动脉SA60in造成缺血，再灌注2h后取出肝组织制成匀浆，测定超氧化物歧化酶SD、谷胱甘肽过氧化酶GSHPX、丙二醛DA、a2+g2+ATP酶的含量及肝形态细胞学变化。结果川芎嗪治疗组肝组织DA含量明显低于缺血再灌注组P0.01，SD，GSHPX，a2+g2+ATP酶的含量均明显高于缺血再灌注组P0.01，肝细胞形态学异常变化明

2、显减轻。结论川芎嗪能减少大鼠脂质过氧化，改善ATPase功能，减轻大鼠肠缺血再灌注所致肝脏损伤。关键词：川芎嗪；肠缺血再灌注损伤；小肠；肝脏PrtetiveEffetsfTetraethylpyrazinenHepatiDaageInduedbyIntestinalIsheiareperfusininRatsAbstrat:bjetiveTexplretheprtetiveeffetsftetraethylpyrazinenhepatidaageinduedbyintestinalisheiareperfusininrats.ethdsDividetheratsrandlyintthreegr

3、ups:shaperatedgrup,untreatedisheiareperfutin(I/R)grup,pretreatentithtetraethylpyrazinebefreI/R(Te).Superiresenteriarteryaslippedfr60intauseishiia,andthenunlippedtakereperfusinfr2hursafterreperfusin,thelivertissueseregatheredandhgenizedrespetively,andthententsfSD,GSHPX,DAandATPase,andrphlgialhangesfh

4、epatytesereassayed.ResultsThententsfDAinliverinTegrupserelessthanthatinI/RgrupP0.01,thententsfSD,GSHPXanda2+,g2+,ATPaseinTegrupserehigherthanthseinI/RgrupP0.01,andtheabnralrphlgialhangesfhepatytesdiinishedrearkably.nlusinTetraethylpyrazineanreduelipidperxidatin,iprveATPaseativityanddereasetheinjuryf

5、livertissueintheratsafterintestinalisheiareperfusin.Keyrds:Tetraethylpyrazine;Isheiareperfusininjury;Gut;Liver肠缺血再灌注isheiareperfusin，I/R是机体遭受严重创伤、大手术、烧伤、感染等刺激后发生较早的病理过程之一，可引起肝、肾、肺等远隔器官的损伤1。目前认为，缺血再灌注损伤产生的机理主要与氧自由基大量生成导致组织器官脂质过氧化有关2。川芎嗪Tetraethylpyrazine，TP是从川芎中提出的一种生物碱，具有解痉、扩管、降压等广泛的生物作用，主要应用于心血管疾病的

6、治疗3。本研究旨在讨论川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注肝损伤的保护作用，并讨论其可能机制。1材料与方法1.1药品及试剂川芎嗪注射液40g/2l无锡市第七制药消费，批号H32023383。SD，GSHPX，DA，a2+g2+ATPase试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.2实验动物选用安康雄性istar大鼠24只，体重250g，由咸宁学院动物室提供。随机分为3组。1.3模型制备及动物分组10%水合氯醛0.35l/100g腹腔注射麻醉后，仰卧固定，取腹部正中切口，暴露肠系膜上动脉SA用无损伤动脉夹夹闭其根部导致缺血，松夹即为再灌注，在各设定时相点经髂动脉取血并迅速放血致死，取肝左中叶组织匀浆，同时取少

7、许肝左中叶组织行光、电镜观察。将24只大鼠随机分为3组，每组8只。假手术对照组sha：仅暴露SA而不夹闭，共3h完毕实验后取材；缺血灌注组I/R：夹闭SA60in后松夹2h再取材；川芎嗪治疗组TP：夹闭SA前15in经舌下静脉注射川芎嗪8g/kg余同I/R组。1.4指标测定SD活性用邻苯三酚自氧化法检测4，DA含量测定用改进硫代巴比妥酸TBA比色法测定5，5.5,二硫对二硝基苯甲酸DTNB比色法测定GSHPX6，定磷法测定a2+g2+ATP酶7。光镜检查：取肝组织经10%甲醛固定，石腊包埋切片，HE染色，观察切片。电镜检查：肝组织用生理盐水漂洗后2.5%戊二醛固定，送电镜室，经四氧化锇双固定，

8、脱水、包埋、切片等操作后，在日立H600透视电镜下观察并拍片。1.5统计学分析所有数据均以s表示，组与组之间采用t检验。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1肝组织中SD，GSHPX及DA含量的变化大鼠肠缺血再灌注后肝组织SD，GSHPX活性下降，而DA含量明显上升，与假手术对照组比拟有显著性差异P0.01。川芎嗪治疗组肝组织中DA含量明显低于缺血再灌注组P0.01，SD，GSHPX的含量均明显高于缺血再灌注组P0.01。见表1。表1各组大鼠肝组织SD，GSHPX，DA，a2+g2+ATP酶的测定结果略与假手术对照组比拟，P0.01；与缺血再灌注组I/R比拟，*P0.01;n=82.2肝组织ATP

9、酶活性变化大鼠肠缺血再灌注后肝组织a2+g2+ATP酶活性下降，与假手术对照组比拟有显著性差异P0.01。川芎嗪治疗组肝组织中a2+g2+ATP酶活性明显高于缺血再灌注组P0.01。结果见表1。2.3肝细胞形态学改变光镜下假手术对照组肝小叶正常，肝细胞索明晰，围绕中央静脉呈放射状排列；缺血再灌注组肝小叶构造正常，肝细胞水肿，肝窦淤血变窄；川芎嗪治疗组肝小叶构造正常，肝细胞索及肝窦排列整齐，未见肝细胞水肿。电镜下假手术对照组肝细胞器正常；缺血再灌注组肝细胞有空泡形成，线粒体肿胀，胞浆疏松化，局部肝细胞核固缩、变小；川芎嗪治疗组肝细胞损伤减轻，内未见空泡，线粒体稍肿胀。3讨论肠缺血再灌注致肝损伤的

10、机制尚不完全清楚，目前认为与内毒素、血小板激活因子、肿瘤坏死因子、前列腺素、补体、氧自由基、白三烯、粒细胞介导、钙超载和基因异常表达有关。自由基损伤是器官组织损伤尤其是肠缺血再灌注损伤的主要机制之一，因此拮抗自由基损伤对防治肠缺血再灌注致多器官损伤具有重要意义。本实验结果显示，大鼠肠缺血再灌注后肝组织SD，GSHPX活性下降，而DA含量明显上升，a2+g2+ATP酶活性下降，说明缺血再灌注损伤大鼠体内有大量氧自由机产生，内环境紊乱，造成肝组织的损伤。川芎嗪治疗组肝组织中DA含量明显低于缺血再灌注组P0.01，SD，GSHPX，a2+g2+ATP酶的含量均明显高于缺血再灌注组P0.01，提示川芎

11、嗪能抑制脂质过氧化反响，进步ATP酶活性，稳定内环境，减少钙超载，这可能是川芎嗪对大鼠肠缺血再灌注后肝损伤有保护作用的主要机理，其详细机制有待进一步深化。参考文献：1杨汉,金丽娟.库普弗细胞功能状态对肠缺血再灌注肝、脾、胸腺细胞凋亡的音响J.解放军医学杂志,1999,24(4):86.2NEilGrangerD.Isheia-reperfusininjury.Rlefxygen-derivedfreeradialsJ.AxtaphysilSand,1986，126(548Suppl):47.3杨光田,王迪浔.实验动物复苏及缺氧时川芎嗪对心脑的作用J.中国急救医学,1997,17(1):7.4邓碧玉,彭勤生,李文杰.改进的连苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活性的方法J.生物化学与物理进展,1991，18(2):163.5向荣,王鼎年.过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度法的改进J.生物化学与生物物理进展,1990，17(3):241.6夏奕明,朱连珍