肝愈胶囊的质量标准研究

1、肝愈胶囊的质量尺度研究【摘要】目的创立操纵肝愈胶囊的质量尺度。要领对肝愈胶囊中重要身分丹参、栀子、黄柏、黄芪、五味子举行了薄层色谱区分；接纳高效液相色谱法测定黄芩苷的含量。结果薄层色谱法可以对该制剂中的丹参、栀子、黄柏、黄芪、五味子作出正确区分；黄芩苷的线性范畴为0.120.58g，r=0.9997，均匀加样接纳率为99.06，RSD为1.40(n=5)。结论要领敏捷、轻便、重现性好，可作为该制剂的质量尺度。【关键词】肝愈胶囊黄芩苷薄层色谱高效液相色谱Keyrds:Ganyuapsule;Baialin;TL;HPL肝愈胶囊由黄芩、丹参、栀子、黄柏、黄芪、五味子等中药构成，具有清热解毒、益气活

2、血的成果。主治气阴两虚型肝炎。为操纵本品的内涵质量，本实行接纳TL，HPL等要领对其举行质量尺度研究。1仪器与试药2要领与结果2.1薄层区分取本品内容物3g，研细，加乙醚20l，超声处置惩罚20in，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1l使溶解，作为供试品溶液。另取丹参比较药材粗粉1g和按处方量从中撤除丹参药材的阴性比较品粗粉4g，别离同法制成比较药材溶液和阴性比较液。再取丹参酮A比较品，加醋酸乙酯制成每毫升含0.5g的溶液，作为比较品溶液。照薄层色谱法实行1，汲取上述4种溶液各6l,别离点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯191为睁开剂，睁开，取出，晾干，供试品色谱中，在与比较药材和比较品色谱

3、相应的位置上，显雷同颜色的斑点，而阴性比较色谱在相应的位置上无此斑点。见图1。取本品内容物3g，加乙醇20l，超声处置惩罚20in，滤过，滤液浓缩至约2l，作为供试品溶液。另取栀子比较药材粗粉1g和按处方量从中撤除栀子的阴性比较品粗粉3g，别离加乙醇10l和20l,同法制成比较药材溶液和阴性溶液。再取栀子苷比较品，加乙醇制成每毫升含2g的溶液，作为比较品溶液。汲取上述溶液各5l，别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水5511为睁开剂，睁开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清楚。供试品色谱中，在与比较药材和比较品色谱相应的位置上

4、显雷同颜色的斑点，而阴性比较色谱中无相应的斑点。见图2。取本品内容物2g，加甲醇20l,超声处置惩罚20in，滤过，滤液浓缩至2l，作为供试品溶液。另取黄柏比较药材粗粉0.2g和按处方量从中撤除黄柏的阴性比较品粗粉2g，别离加甲醇10l和20l,加热回流提取15in，过滤，滤液浓缩至干，各加1l甲醇使溶解，别离作为比较药材溶液和阴性比较溶液。再取盐酸小檗碱比较品，加甲醇制成每毫升含0.5g的溶液，作为比较品溶液。汲取上述溶液各3l,别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液631.51.50.5为睁开剂，置氨蒸气饱和的层析缸内，睁开，取出，晾干

5、，置紫外光灯365n下检视。供试品色谱中，在与比较药材及比较品色谱相应的位置上，显雷同的荧光斑点。见图3。取本品内容物4g，加正丁醇30l，超声处置惩罚1h，滤过，滤液用1%氢氧化钠溶液洗涤3次，20l/次，弃去碱液，用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇浓缩至干，残渣加甲醇1l使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪比较药材粗粉1g和按处方量从中撤除黄芪的阴性比较品粗粉4g，别离加正丁醇15l和30l，同法制成比较药材溶液和阴性比较溶液。再取黄芪甲苷比较品，加甲醇制成每毫升含1g的溶液，作为比较品溶液。汲取供试品溶液和阴性比较品溶液各8l，比较药材溶液6l，比较品溶液4l，别离点于同一以羧甲基纤

6、维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水102011510以下安排的下层溶液为睁开剂，睁开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，置105烘至斑点显色清楚，供试品色谱中，在与比较药材色谱和比较品色谱相应的位置上，显雷同颜色斑点。见图4。取本品内容物5g，置索氏提取器中，加氯仿30l，回流提取3h，接纳氯仿，残渣加氯仿2l使溶解，作为供试品溶液。另取五味子比较药材粗粉2g和按处方量从中撤除五味子的阴性比较品粗粉5g,别离置索氏提取器中，各加氯仿15l和30l，同法制成比较药材溶液和比较品溶液。再取五味子乙素比较品，加氯仿制成每毫升含1g的溶液，作为比较品溶液。汲取供试品溶液、比较

7、药材溶液和阴性溶液各5l，比较品溶液3l，别离点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石油醚3060-甲酸乙酯-甲酸1551的上层溶液为睁开剂，睁开，取出，晾干，置紫外光灯254n下检视。供试品色谱中，在与比较药材色谱及比较品色谱相应的位置上，显雷同的荧光斑点。见图5。2.2含量测定色谱柱Krasil182004.6,5,活动相：甲醇-水-冰醋酸55450.5流速1.0l/in；检测波长280n；柱温25；理论板数按黄芩苷峰计应不低于1500。细密称取枯燥至恒重的黄芩苷比较品2.92g，置50l量瓶中，加适量甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，制成每毫升含0.00584g的比较品溶

8、液。别离细密汲取比较品溶液2，4，6，8，10l，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以黄芩苷进样量微克数为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，得不停线，盘算回归方程为Y=2.43106X-3.74104，r=0.9997n=5.结果表白黄芩苷在0.11680.5840g范畴内线性干系精良。取本品10粒，倾出内容物，研细，取3.0g细密称定，置具塞锥形瓶中，细密参加70%乙醇50l,称定重量，超声处置惩罚功率250，频率40kHz30in，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，细密量取续滤液2.0l，置10l量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀后过0.45微孔滤膜，滤液作为供试

9、品溶液。细密汲取浓度为0.00584g/l的黄芩苷比较品溶液5l，重复进样5次，均值为609299，RSD=0.90%n=5，结果表白仪器细密度精良。细密汲取供试品溶液5l，注入液相色谱仪，别离于0，1，3，7，12h测定峰面积。结果表白峰面积的RSD为0.90%，表白供试品溶液在12h内根本不变。取样品和按处方比例不含黄芩的诸药，按制剂工艺别离制成供试品溶液和阴性比较液，细密汲取比较品溶液、供试品溶液、阴性比较品溶液各5l，别离注入液相色谱仪，依法测定，结果阴性比较品溶液在与黄芩苷比较品溶液雷同保存时间处无色谱峰，表白无滋扰。见图6。取同一批号样品，按供试品制备要领平行制备5份，依法测定黄芩

10、苷峰面积，别离盘算含量，RSD为1.24%，表白重复性精良。接纳加样接纳法，细密称取黄芩苷含量的同一批号样品(040105)5份，1.6g/份，别离细密参加黄芩苷比较品8g，按含量测定要领操纵测定，盘算，均匀接纳率为99.06%，RSD为1.4%。结果见表1。表1接纳率观察数据略取3批样品依法制备供试品溶液，细密汲取比较品溶液和供试品溶液各5l，别离注入液相色谱仪，测定峰面积，盘算样品中黄芩苷的含量。结果见表2。表2样品含量测定命据略3讨论在黄柏的薄层色谱区分实行中，黄柏区分项下1的睁开剂，醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水10611举行实行，结果分散结果欠好，Rf值较小，相邻斑点分不开。厥后选用黄连区分项下的睁开剂，颠末屡次调解，把睁开剂中的水换成浓氨试液，即睁开剂为苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液(631.51.50.5)结果较好，结果较不变。活动相的选择“双黄连颗粒项下1黄芩苷含量测定的活动相，试验结果创造黄芩苷达不到基线，保存时间较短，经调解将甲醇比例增大些，醋酸比例缩小，那么到达基线分散、保存时间符合，故活动相选用甲醇-水-冰醋酸55450.5。接纳参考文献1要领对