忧虑康药对动物抑郁行为和血浆cAMP、cGMP的影响及毒性试验研究

1、忧虑康药对动物抑郁行为和血浆cAMP、cGMP的影响及毒性试验研究【摘要】目的观察忧虑康药浸膏对肾阴虚型抑郁模型大鼠行为学和血浆AP、GP的影响及毒性试验。方法采用灌胃甲状腺素合并慢性不可预见性应激制成肾阴虚抑郁动物模型后，随机分为空白对照组、模型组、六味地黄丸组、氟西汀组、忧虑康低、中、高剂量组，观察各组大鼠敞箱试验和液体消耗试验等行为学变化，采用放射免疫方法检测血浆AP、GP含量。并进展急性毒性试验，计算小鼠最大耐受量。结果肾阴虚抑郁模型大鼠敞箱试验和液体消耗试验各项指标均显著下降，血浆AP含量显著升高；忧虑康药能局部改善大鼠的抑郁行为，六味地黄丸和忧虑康均能显著降低大鼠血浆AP含量。小鼠

2、灌服忧虑康药1日最大耐受量为360g/kg，相当于人临床用量1.2g/kg的300倍。结论呈量效关系的忧虑康药影响大鼠行为学和调整血浆AP、GP平衡，可能正是其滋阴解郁的作用机制之一；该药是平安范围较大的药物，提示用于临床是平安的。【关键词】忧虑康；肾阴虚；抑郁症；环腺苷酸；环鸟苷酸；急毒TheeffetsandtxiityexperientalresearhfYuLvKangnanialdepressinbehavirandAP,GPintheplasa【Abstrat】bjetiveTbjetivetheeffetsfYuLvKangntheAP、GPintheplasafdelingra

3、tsfllingrenalyindefiienyandnthebehavirftheseanialsandtxiitytest.ethdsRatseredividedintsevengrupsrandly:ntrl,del,LiuEiDiHuangan,fiuxetine,thel、iddleandhigh-dsegrupfYuLvKang.Testablishthedelingratsfllingrenalyindefiienybyexpsingtheanialsthrnistressdepressinandgivingthebyintragastriadinstratin.Tbservet

4、hebehavirhangsinthepen-fieldtestandfluidsuptintest.theplasasaplesfexperientalratseretakenfrAPandGPdeterinatinbyradiiunassay.Tputeaxiallytlerateddsefratsbyautetxiitytest.ResultsAlltheindexesfthedelratsinthepen-fieldtestandfluidsuptintesteresignifiantlydereased,theplasanentratinfAPassignifiantlyelevat

5、ed;YuLvKanganpartlyiprvethebehavirftherats,theplasafAPeresignifiantlydereasedintheLiuEIDiHuanganandYuLvKanggrups.Theaxiallytlerateddsefuseere360g/kgeveryday,equivaent300tiesflinidses1.2g/kg.nlusinneftheehanisfinreasingyinandiprvingdepressinastheeffetsfTheYuLvKangnthebehavirhangsftheratsandnadjusting

6、thebalanebeteentheAPandGP.safetyarginfdrugisbigger,hihsuggestthedrugissafeinlini.【Keyrds】YuLvKang;renalyindefiieny;depressin;AP;GP;autetxiitytest1材料与方法1.1材料1.1.1动物安康SD大鼠，雌雄各半，体重170190g购自长沙开福区东创科技效劳部。昆明小鼠，雌雄各半，体重1822g购自湖南中医药大学实验动物中心，合格证号：20-001。1.1.2药物及试剂忧虑康药临床用量为每天80g，按处方称取药材湖南中医药大学附属医院提供熟地黄15g，何首乌1

7、5g，郁金10g，丹参15g，当归15g，石斛10g等，水煎2次,过滤，合并滤液,浓缩成相应浓度浸膏，4保存备用；六味地黄丸湖南省长沙九芝堂股份消费，产品批号：20220219；盐酸氟西汀胶囊常州华生制药，产品批号：80706001；甲状腺素片济南维尔康生化制药，产品批号：05055050；环腺苷酸AP、环鸟苷酸GP放免分析试剂盒:上海中医药大学同位素科，消费批号：061120。1.1.3仪器敞箱自制：由不透明材料制成，底面为100100的正方形，被等分为25个等边方格，高50；放射免疫计数器G-1200放射免疫计数器,中国科学技术大学科技实业；电子天平型号:ES-600电子天平,湘仪天平仪器

8、；低温大容量高速离心机型号：KD-2046低温大容量离心机,中国科学技术大学科技实业；秒表；止血钳；恒温烘箱等。1.2方法1.2.1动物分组试验前，进展敞箱试验和液体消耗试验，根据敞箱试验和液体消耗试验的结果挑选大鼠，共56只，随机分为7组：空白对照组简称空白组、模型对照组简称模型组、盐酸氟西汀组简称氟西汀组、六味地黄丸组简称地黄丸组、忧虑康液低剂量组简称ylk低剂量组、忧虑康液中剂量组简称ylk中剂量组、忧虑康液高剂量组简称ylk高剂量组，每组8只。1.2.3观察模型动物一般状态及体重变化实验过程中观察大鼠外表、性情、活动情况、饮水量、大便情况，每周测1次体重。1.2.6血浆AP、GP的测定

9、实验第22天，所有动物，断头采血，取血12l，注入含EDTANa2501的试管中，摇匀放入冰浴中，1h内，4离心2000rp离心10in，置于-15-20保存，用于测定。测定时严格按试剂盒说明进展操作。转贴于论文联盟.ll.1.3急性毒性试验1.3.1预试昆明小鼠6只，以忧虑康3g生药/l的流浸膏可供灌胃的最大浓度3g生药/l，小鼠可耐受的最大体积0.8l/20g一次性灌胃给药，灌胃前禁食不禁水12h，给药后正常饲养，连续观察7天。实验结果，在给药当天小鼠活动、精神状态、饮食均正常，一周内未见死亡及其他异常现象，处死后主要脏器肝、心、脾、肺、肾未发现任何异常改变。因此，无法测出忧虑康液复方制剂

10、的半数致死量LD50，故改做小鼠最大给药量试验。1.4统计学分析SPSS13.0FRinds统计软件包作为统计工具，计量资料用xs表示，方差齐者用单因素方差分析，方差不齐的采用Tahan分析。2结果2.1各组大鼠体重及行为学指标的比拟2.1.1应激前各组大鼠体重及行为学指标的比拟经过挑选分组后，实验前各组动物的体重、敞箱试验得分和液体消耗试验的各项指标相近，没有统计学差异P0.05。见表1。表1应激前各组大鼠体重及行为学指标的比拟注:P0.052.1.2治疗前各组大鼠体重及行为学指标的比拟治疗前应激第7天与空白组相比，各组体重、敞箱试验和液体消耗试验各项指标都有下降。敞箱试验中，低剂量组程度得

11、分及各组垂直得分均显著下降P0.05。液体消耗试验中，各组糖水偏爱%均低于空白组，其中忧虑康低剂量组、高剂量组糖水偏爱%降低有统计学意义，提示各组动物均出现不同程度的抑郁。见表2。表2治疗前各组大鼠体重及行为学指标的比拟注：与空白组比拟，*P0.05，*P0.012.1.3治疗后各组大鼠体重及行为学指标的比拟治疗14天应激第21天，与空白组比拟，模型组体重、敞箱试验和液体消耗试验各项指标差异均有显著性，提示抑郁模型复制成功；与模型组比拟，氟西汀组在各项指标上差异均有显著性P0.05，忧虑康高剂量程度得分及忧虑康低、中、高剂量组中央格停留时间显著减少；与氟西汀阳性对照组比拟忧虑康各剂量组各指标无统计学差异，说明忧虑康能局部改善模型动物的抑郁行为。见表3。表3治疗14天各组大鼠体重及行为学指标的比拟注：与空白组比拟，*P0.05，*P0.01；与模型组比拟，#P0.05，#P0.012.1.4忧虑康液对模型动物血浆AP、GP的影响与空白组比拟，模型组血浆AP含量及AP/GP比值升高差异有显著性，提示大鼠存在内在的肾阴虚；与模型组比拟，地黄丸组、忧虑康低、中、高剂量组都有下降趋势，其中地黄丸组、忧虑康中剂量、高剂量组下降有统计学意义P0.05。见表4。表4忧虑康液对肝肾阴虚抑郁模型大鼠血浆AP、GP影响注：与